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文档简介
重组蛋白药物
生物学活性检测2014年2月28日2022/12/202022/12/202022/12/201.生物学活性检测必要性药品有效性必须是疗效确切,且含有特定的有效活性成分和一定浓度含量凡是不能用理化方法测定其含量或有效成分或虽有理化方法测定但不能真实反映临床实际应用价值的药物效价测定,可用生物测定法进行测定生物学活性测定是生物测定的重要内容2022/12/202.生物技术药物的生物学活性检测方法体内:动物模型分析体外:细胞(组织、器官)培养分析酶促反应法、免疫学法(体外)2022/12/20
蛋白药物的细胞学活性检测原理:相同条件下通过实验组与对照组对特定细胞生理或生存状况的影响程度来判断药物的活性例:抗肿瘤药物活性检测2022/12/20例:抗肿瘤药物细胞学活性检测肿瘤细胞(对数期)胰蛋白酶处理细胞悬液稀释96孔板培养24h实验组、对照组设置培养4~5d弃去上清液加MTT,37℃继续培养4
h小心弃上清,加
DMSO37℃继续培养4
h测定光密度值肿瘤细胞生长抑制率%=(1-
OD实验/OD对照)
×100%
在酶标仪上以实验波长为570
nm,参比波长为450
nm2022/12/20酶促反应、免疫学法优点:简单、灵敏、快速、精确缺点:不一定反应整体活性2022/12/20
思考题:1.重组蛋白药物的生物学活性检测方法主要有哪些?2.抗肿瘤药物细胞学活性检测一般步骤?
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