高效液相色谱法的建立课件

北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。实用高效液相色谱法的建立L.R.Snyder,J.J.Kirkland,J.L.GlajchPracticalHPLCmethoddevelopment2nd1997(第一版1988年出版)HPLC技术问世已有30余年,已步入发展与应用的成熟时期,关于方法建立的研究目前已开始逐步趋向稳定。我们相信本书在未来十年或二十年中，理应不会过时并仍有参考价值。实用高效液相色谱法的建立1绪论*9常规样品分离2分离的基础*10计算机辅助方法3检测灵敏度与选择性11生化样品4样品的制备12手性分离5色谱柱*13制备分离6中性样品*14定量7离子样品*15完善方法8梯度洗脱*北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人1高效液相色谱法的建立课件2高效液相色谱法的建立课件3高效液相色谱法的建立课件4高效液相色谱法的建立课件51-2建立分离方法1-2-1选择HPLC分离模式与起始条件假设为一般样品（分子量〈2000）选择HPLC分离模式(图1--3)1-2-2开始方法建立1-2-3改善分离1-2-4可重现的分离1-2-5完善方法1-2建立分离方法1-2-1选择HPLC分离模式与起始条6高效液相色谱法的建立课件7主要HPLC方法的特性

反相HPLC流动相：水-有机溶剂(A%--B%)色谱柱：C18、C8、苯基、三甲基硅烷、氰基适合的样品能溶于水-有机混合液的大多数样品，尤其是中性或非离子性化合物的首选。主要HPLC方法的特性

反相HPLC8主要HPLC方法的特性

离子对HPLC流动相：水-有机溶剂，控制PH的缓冲溶液和离子对试剂色谱柱：C18、C8、氰基适合的样品离子或可电离的化合物，尤其是碱或阳离子样品的良好选择。主要HPLC方法的特性

离子对HPLC9主要HPLC方法的特性

正相HPLC流动相：有机溶剂混合液色谱柱：氰基、氨基、二醇基、硅胶适合的样品当反相或离子对HPLC无效是的第二个良好选择；不溶于水-有机混合液的亲脂样品的首选；异构体混合物。主要HPLC方法的特性

正相HPLC101-2-2开始方法建立首次HPLC分离较好的实验条件色谱柱C18、C85μm15×0.46cm流动相水或缓冲溶液-乙氰(80-100%)缓冲溶液25mmol磷酸钾2.0<PH>3.0添加剂胺改性剂、离子对试剂（开始不用）流速1.5—2.0ml/min温度35—45℃样品量体积<25μL重量<100μg1-2-2开始方法建立首次HPLC分离较好的实验条件11为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流动相,做第一次预实验,然后按照一定速度(20%)降低强溶剂的比例,如例（图1--4）所示.当样品中存在对纯乙氰或纯甲醇强保留的组分时可以考虑用非水反相色谱NARP或者是正相色谱HPLC方法建立的目标（表1--5）为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流12高效液相色谱法的建立课件13高效液相色谱法的建立课件14高效液相色谱法的建立课件15END16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿

17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克

18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云

19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋

20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔沃END16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿16北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人间良可辞。22、步步寻往迹，有处特依依。23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。24、结庐在人境，而无车马喧；问君何能尔？心远地自偏。25、人生归有道，衣食固其端。实用高效液相色谱法的建立L.R.Snyder,J.J.Kirkland,J.L.GlajchPracticalHPLCmethoddevelopment2nd1997(第一版1988年出版)HPLC技术问世已有30余年,已步入发展与应用的成熟时期,关于方法建立的研究目前已开始逐步趋向稳定。我们相信本书在未来十年或二十年中，理应不会过时并仍有参考价值。实用高效液相色谱法的建立1绪论*9常规样品分离2分离的基础*10计算机辅助方法3检测灵敏度与选择性11生化样品4样品的制备12手性分离5色谱柱*13制备分离6中性样品*14定量7离子样品*15完善方法8梯度洗脱*北京中医药大学马长华高效液相色谱法的建立21、静念园林好，人17高效液相色谱法的建立课件18高效液相色谱法的建立课件19高效液相色谱法的建立课件20高效液相色谱法的建立课件211-2建立分离方法1-2-1选择HPLC分离模式与起始条件假设为一般样品（分子量〈2000）选择HPLC分离模式(图1--3)1-2-2开始方法建立1-2-3改善分离1-2-4可重现的分离1-2-5完善方法1-2建立分离方法1-2-1选择HPLC分离模式与起始条22高效液相色谱法的建立课件23主要HPLC方法的特性

反相HPLC流动相：水-有机溶剂(A%--B%)色谱柱：C18、C8、苯基、三甲基硅烷、氰基适合的样品能溶于水-有机混合液的大多数样品，尤其是中性或非离子性化合物的首选。主要HPLC方法的特性

反相HPLC24主要HPLC方法的特性

离子对HPLC流动相：水-有机溶剂，控制PH的缓冲溶液和离子对试剂色谱柱：C18、C8、氰基适合的样品离子或可电离的化合物，尤其是碱或阳离子样品的良好选择。主要HPLC方法的特性

离子对HPLC25主要HPLC方法的特性

正相HPLC流动相：有机溶剂混合液色谱柱：氰基、氨基、二醇基、硅胶适合的样品当反相或离子对HPLC无效是的第二个良好选择；不溶于水-有机混合液的亲脂样品的首选；异构体混合物。主要HPLC方法的特性

正相HPLC261-2-2开始方法建立首次HPLC分离较好的实验条件色谱柱C18、C85μm15×0.46cm流动相水或缓冲溶液-乙氰(80-100%)缓冲溶液25mmol磷酸钾2.0<PH>3.0添加剂胺改性剂、离子对试剂（开始不用）流速1.5—2.0ml/min温度35—45℃样品量体积<25μL重量<100μg1-2-2开始方法建立首次HPLC分离较好的实验条件27为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流动相,做第一次预实验,然后按照一定速度(20%)降低强溶剂的比例,如例（图1--4）所示.当样品中存在对纯乙氰或纯甲醇强保留的组分时可以考虑用非水反相色谱NARP或者是正相色谱HPLC方法建立的目标（表1--5）为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流28高效液相色谱法的建立课件29高效液相色谱法