基因工程的操作过程 课件

学业分层测评当堂即时达标知识点一知识点二知识点三学业分层测评当堂即时达标知识点一知识点二知识点三补充：1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点启动子终止子启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.(以模板转录然后脱落)补充：1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游①不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质。：能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质编码区非编码区原核细胞的基因结构②有调控遗传信息表达的核苷酸序列，在该序列中，最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游启动子终止子①不能转录为信使RNA，不能：能转录相应的信使RNA，能编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶结合位点内含子外显子能够编码蛋白质的序列叫做外显子不能够编码蛋白质的序列叫做内含子启动子终止子编码区上游编码区下游内含子：外显子：补充：2.真核细胞的基因结构编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶内含子外显子能够编码真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列：有调控作用的核苷酸序列，包括位于编码区上游的RNA

聚合酶结合位点等。非编码序列：包括非编码区和内含子真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序原核细胞真核细胞不同点编码区是_____的编码区是间隔的、_____的相同点都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的原核细胞与真核细胞的基因结构比较思考编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？连续不连续编码区非编码原核细胞真核细胞不同点编码区是编码区是间隔的、_____的都1．下列关于基因结构的认识中，正确的是（）A．大豆基因中内含子是能够编码蛋白质的序列B．乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子C．大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区的下游D．水稻细胞基因的编码区中存在非编码序列2．（多选）原核细胞与真核细胞基因结构的共同特点是（）A．编码区都有能编码蛋白质的序列B．编码区都是连续的C．非编码区都能调控遗传信息的表达D．非编码区都有RNA聚合酶结合的位点DACD1．下列关于基因结构的认识中，正确的是（基因工程的操作过程课件1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基因工程基本操作的四个步骤有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受(一)、目的基因主要是______________________编码蛋白质的基因（二）、获取目的基因的常用方法有哪些?1、从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增3、人工合成如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的基因、具调控作用的因子等。(一)、目的基因主要是___________________1、从基因文库中获取目的基因（1）.基因文库

将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。种类基因组文库：含有一种生物的全部基因部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因，如：cDNA文库1、从基因文库中获取目的基因（1）.基因文库将含有提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片段将DNA片段与载体连接重组载体基因组文库导入受体菌中储存（2）.基因文库的构建方法①基因组文库的构建提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA单链DNA双链cDNA片段重组载体与载体连接cDNA文库反（逆）转录酶DNA聚合酶导入受体菌中储存②cDNA文库的构建-----逆转录法：提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA单链DNA双链c基因组DNA文库cDNA文库基因组DNA文库与cDNA文库的比较基因组DNA文库cDNA文库基因组DNA文库与cDNA文库的某生物体内全部DNA

许多DNA片段受体菌群体限制酶与运载体连接导入基因组文库cDNA反转录受体菌群体与运载体连接导入部分基因文库（cDNA文库）基因组DNA文库与cDNA文库的比较某种生物某个时期的mRNA某生物体内全部DNA许多DNA片段受体菌群体限制酶与运载体

真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？思考？真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同编码区非编码区非编码区DNA聚合酶剪接有关的酶RNA聚合酶mRNA前体mRNA单链DNAcDNA逆转录酶转录剪接逆转录复制启动子终止子基因不含非编码系列。即不含非编码区和内含子编码区非编码区非编码区DNA聚合酶剪接有关的酶RNA聚合酶m基因组DNA文库与cDNA文库的比较基因组DNA文库与cDNA文库的比较（3）构建基因文库的目的

怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢?便于在不知道目的基因核苷酸序列的情况下，获得所需的目的基因。(4）从基因文库中得到目的基因的方法依据：目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA

基因翻译产物蛋白质等特性（3）构建基因文库的目的怎样从基因文库中得到我们所需1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的A、染色体DNA

B、线粒体DNAC、总mRNA

D、tRNA2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是A、某生物的全套基因就是一个基因文库B、将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个生物体内，则这个生物就是一个基因文库C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库AC1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的2、目的基因可从①概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制___________的核酸合成技术

③条件：_________________________、______________、___________、_______________________②原理：__________④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）⑤结果：多聚酶链式反应体外特定DNA片段DNA复制已知基因的核苷酸序列（前提）四种脱氧核苷酸一对引物耐热的DNA聚合酶（Taq酶）指数2n使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增2、利用PCR技术扩增目的基因①概念：PCR全称为_______________，是一项⑥过程：a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板在热作用下，_____断裂，形成___________b、退火（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部________。

c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从引物处延伸，合成与模板互补的________。氢键单链DNA双链DNA链⑥过程：a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板b、具体过程：具体过程：基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件?

1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次，理论上至少需要几个引物？2×（2n-1）(n为循环次数)（24-1）×2=30?1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次，理论上至少需要目的基因的mRNA单链DNA(cDNA）双链DNA(即目的基因)反转录合成1）反转录法：

以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列目的基因推测推测化学合成2）根据已知的氨基酸序列合成DNA法：3、人工合成的目的基因目的基因的mRNA单链DNA(cDNA）双链DNA反转录合基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件目的基因

首端

RNA聚合酶

mRNA

终止子

尾端

转录

鉴别

目的基因

目的基因首端RNA聚合酶mRNA终止子尾端转录遗传

表达

目的基因

维持稳定

表达

农杆菌转化法

裸子

遗传表达目的基因维持稳定表达农杆菌转化法裸子单子叶植物

显微注射

受精卵

单子叶植物显微注射受精卵感受态细胞

重组表达载体DNA分子

遗传物质相对较少

感受态细胞重组表达载体DNA分子遗传物质相对较少基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件DNA分子杂交

分子

抗原—抗体

DNA分子杂交分子抗原—抗体接种

接种基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件学业分层测评（二）点击图标进入…

学业分层测评（二）学业分层测评当堂即时达标知识点一知识点二知识点三学业分层测评当堂即时达标知识点一知识点二知识点三补充：1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点启动子终止子启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.(以模板转录然后脱落)补充：1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游①不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质。：能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质编码区非编码区原核细胞的基因结构②有调控遗传信息表达的核苷酸序列，在该序列中，最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游启动子终止子①不能转录为信使RNA，不能：能转录相应的信使RNA，能编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶结合位点内含子外显子能够编码蛋白质的序列叫做外显子不能够编码蛋白质的序列叫做内含子启动子终止子编码区上游编码区下游内含子：外显子：补充：2.真核细胞的基因结构编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶内含子外显子能够编码真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列：有调控作用的核苷酸序列，包括位于编码区上游的RNA

聚合酶结合位点等。非编码序列：包括非编码区和内含子真核细胞的基因结构编码区非编码区外显子：能编码蛋白质的序原核细胞真核细胞不同点编码区是_____的编码区是间隔的、_____的相同点都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的原核细胞与真核细胞的基因结构比较思考编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？连续不连续编码区非编码原核细胞真核细胞不同点编码区是编码区是间隔的、_____的都1．下列关于基因结构的认识中，正确的是（）A．大豆基因中内含子是能够编码蛋白质的序列B．乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子C．大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区的下游D．水稻细胞基因的编码区中存在非编码序列2．（多选）原核细胞与真核细胞基因结构的共同特点是（）A．编码区都有能编码蛋白质的序列B．编码区都是连续的C．非编码区都能调控遗传信息的表达D．非编码区都有RNA聚合酶结合的位点DACD1．下列关于基因结构的认识中，正确的是（基因工程的操作过程课件1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基因工程基本操作的四个步骤有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受(一)、目的基因主要是______________________编码蛋白质的基因（二）、获取目的基因的常用方法有哪些?1、从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增3、人工合成如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的基因、具调控作用的因子等。(一)、目的基因主要是___________________1、从基因文库中获取目的基因（1）.基因文库

将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。种类基因组文库：含有一种生物的全部基因部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因，如：cDNA文库1、从基因文库中获取目的基因（1）.基因文库将含有提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片段将DNA片段与载体连接重组载体基因组文库导入受体菌中储存（2）.基因文库的构建方法①基因组文库的构建提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA单链DNA双链cDNA片段重组载体与载体连接cDNA文库反（逆）转录酶DNA聚合酶导入受体菌中储存②cDNA文库的构建-----逆转录法：提取某种生物的某器官或特定发育时期的mRNA单链DNA双链c基因组DNA文库cDNA文库基因组DNA文库与cDNA文库的比较基因组DNA文库cDNA文库基因组DNA文库与cDNA文库的某生物体内全部DNA

许多DNA片段受体菌群体限制酶与运载体连接导入基因组文库cDNA反转录受体菌群体与运载体连接导入部分基因文库（cDNA文库）基因组DNA文库与cDNA文库的比较某种生物某个时期的mRNA某生物体内全部DNA许多DNA片段受体菌群体限制酶与运载体

真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？思考？真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同编码区非编码区非编码区DNA聚合酶剪接有关的酶RNA聚合酶mRNA前体mRNA单链DNAcDNA逆转录酶转录剪接逆转录复制启动子终止子基因不含非编码系列。即不含非编码区和内含子编码区非编码区非编码区DNA聚合酶剪接有关的酶RNA聚合酶m基因组DNA文库与cDNA文库的比较基因组DNA文库与cDNA文库的比较（3）构建基因文库的目的

怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢?便于在不知道目的基因核苷酸序列的情况下，获得所需的目的基因。(4）从基因文库中得到目的基因的方法依据：目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA

基因翻译产物蛋白质等特性（3）构建基因文库的目的怎样从基因文库中得到我们所需1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的A、染色体DNA

B、线粒体DNAC、总mRNA

D、tRNA2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是A、某生物的全套基因就是一个基因文库B、将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个生物体内，则这个生物就是一个基因文库C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库AC1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的2、目的基因可从①概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制___________的核酸合成技术

③条件：_________________________、______________、___________、_______________________②原理：__________④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）⑤结果：多聚酶链式反应体外特定DNA片段DNA复制已知基因的核苷酸序列（前提）四种脱氧核苷酸一对引物耐热的DNA聚合酶（Taq酶）指数2n使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增2、利用PCR技术扩增目的基因①概念：PCR全称为_______________，是一项⑥过程：a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板在热作用下，_____断裂，形成___________b、退火（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部________。

c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从引物处延伸，合成与模板互补的________。氢键单链DNA双链DNA链⑥过程：a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板b、具体过程：具体过程：基因工程的操作过程课件基因工程的操作过程课件?

1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次，理论上至少需要几个引物？2×（2n-1）(n为循环次数)（24-1）