高中生物校本课程微生物的实验室培养课件

微生物的实验室培养微生物的基础知识微生物病毒真菌原生动物原核生物

结构简单,个体多数十分微小(光学显微镜或电子显微镜才能看到)，繁殖迅速课题1.微生物的实验室培养三.纯化大肠杆菌四.菌种保存一.培养基二.无菌技术课题1.微生物的实验室培养一.培养基2.分类：a、根据物理性质分固体培养基——用于微生物的分离计数液体培养基——常用于工业生产课题1.微生物的实验室培养一.培养基3.分类：b、根据化学成分分合成培养基——成分明确天然培养基——成分不明确c、根据用途分选择培养基鉴别培养基选择培养基加入青霉素的培养基

分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基

分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基

分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基

分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基

分离导入了目的基因的受体细胞课题1.微生物的实验室培养二.无菌技术利用较为温和的化学或物理方法,杀死物体中的部分微生物(不包括芽孢和孢子)1.消毒以强烈的化学或物理方法消灭体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。2.灭菌a.煮沸消毒法:100℃煮沸5-6minb.巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15minc.化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灵等进行皮肤消毒;氯气消毒水源d.紫外线消毒……常用消毒的方法：课题1.微生物的实验室培养三.纯化大肠杆菌一).培养基配制与灭菌二).接种、培养—纯化大肠杆菌三).结果分析与评价倒平板操作的讨论用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。

通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止凝结在皿盖上的水珠落入培养基,造成污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。课题1.微生物的实验室培养二).纯化大肠杆菌1.原理在适宜环境下，单个细菌能迅速生长增殖形成一个细胞群体－－菌落课题1.微生物的实验室培养二).纯化大肠杆菌2.方法:平板划线法、稀释涂布平板法1.原理在适宜环境下，单个细菌能迅速生长增殖形成一个细胞群体－－菌落课题1.微生物的实验室培养3.平板划线法

通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。二).纯化大肠杆菌课题1.微生物的实验室培养注意事项:

a.在操作的第一步、划线之前以及划线操作结束时都要灼烧接种环？避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者4.稀释涂布平板法

将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。二).纯化大肠杆菌系列稀释操作101102103104105106课题1.微生物的实验室培养5.培养观察

将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37度恒温箱中培养

12h和24h后，分别观察记录二).纯化大肠杆菌

1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则，说明培养基有杂菌，需要重新制备。

2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似？

如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。三).结果分析与评价

1.试管低温临时保存

将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，培养成菌落后，置于4OC的冰箱中保存（每隔3～6个月要重新接种培养后再保存）。