基因工程习题(完整资料)

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基因工程习题2０17．9.８基因工程习题(完整资料）(可以直接使用，可编辑优秀版资料，欢迎下载）1．利用细菌大量生产人类胰岛素,下列叙述错误的是（)Ａ．用适当的酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割与粘合B。用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌C．通常通过检测目的基因产物来检测重组DＮＡ是否已导入受体细菌D．重组DＮＡ必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素2.采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是（)①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的ＤＮA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNＡ序列,与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中。A．①②ﻩB．②③ﻩC.③④ﻩD．④①3。基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（）①人工合成目的基因②E.coliDNA连接酶结合目的基因与运载体③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达⑤个体生物学水平的鉴定。A．①③B．①⑤ﻩC．③⑤D。②③④4.．如图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法．下列相关叙述中正确的是(）A.这三种方法都用到酶，都是在体外进行B．①②③碱基对的排列顺序均相同C．图示ａ、b、c三种方法均属人工合成法D.方法a不遵循中心法则5。．如图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是（）Ａ。③表示ＰCR技术，用来扩增目的基因B.从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取C.若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于cDNA文库D．若基因比较小，核苷酸序列又已知,则可以直接通过人工合成的方法获取6．。以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图．据图分析，下列说法正确的是（）A．催化②⑤过程的酶都是DＮA聚合酶，都能耐高温Ｂ。催化①过程的酶是ＲNA聚合酶C．④过程发生的变化是引物与单链DNＡ结合Ｄ．如果RNA单链中Ａ与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链ＤNA中,A与U之和也占该DNA碱基含量的40%7。.下列关于质粒的叙述，正确的是(）Ａ．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器Ｂ.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的Ｃ．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状ＤNA分子８。。科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是（）A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性B.有利于检测目的基因否导入受体细胞Ｃ．增加质粒分子的相对分子质量D．便于与外源基因连接9。.下列关于基因工程工具的说法不正确的是（）A．构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DＮA连接酶B。DＮA连接酶对所连接的DNＡ两端碱基序列有专一性要求Ｃ。载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达D。在基因工程操作中,被用作载体的质粒，都是经过人工改造的1０．下列叙述符合基因工程概念的是（）Ａ。在细胞内将ＤNＡ进行重组,赋予生物新的遗传特性B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌,使其DＮA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株Ｄ。自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DＮA上1１。下列四条DNA分子,彼此间具有互补粘性末端的一组是（)Ａ。①② Ｂ．②④ C.③④ D．②③12．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是()Ａ．重组DNＡ技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快Ｄ．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达１3。下列提到的物质不是基因工程常用的工具的是（)①限制性核酸内切酶②ＤNA聚合酶③DNA连接酶④运载体⑤解旋酶．A。②④⑤ﻩB．①③④ C。①②③ﻩD。②⑤１４.如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SｍａⅠ、EcｏＲⅠ、ＡｐaⅠ为四种限制酶。下列说法错误的是（）Ａ.图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠC。抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D。除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构１5.一种质粒和人的胰岛素基因存在的限制酶的酶切位点(用Ｅ１表示)如图所示，ａ表示标记基因，ｂ表示胰岛素基因．现用该种限制酶分别切割质粒和胰岛素基因,然后用DNA连接酶连接切割后的质粒和胰岛素基因，最不可能出现的是（）A。ﻩＢ．ﻩC。ﻩＤ．１6.利用乳腺生物反应器生产药用蛋白是动物基因工程的重要应用，目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α﹣抗胰蛋白酶等医药产品．下列有关乳腺生物反应器的叙述错误的是(）Ａ。受体细胞可选用受精卵或胚胎干细胞Ｂ。获得转基因动物需利用胚胎移植技术C．鉴别药用蛋白基因是否导入受体细胞一般利用分子杂交法Ｄ。转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因１7。美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达，长成的植物通体光亮，堪称奇迹．下列有关发光烟草培育的叙述正确的是()A．在培育过程中需用同一种限制酶分别切割荧光素基因和质粒Ｂ．将目的基因直接导入烟草细胞常用的方法是显微注射法Ｃ．受体细胞只能用烟草的受精卵，因为受精卵的全能性最高D．导入目的基因的烟草细胞不需进行植物组织培养就能发育成一个完整的植株18。现有一长度为10０0碱基对（by）的ＤNA分子，用限制性核酸内切酶EcoＲ1酶切后得到的ＤNＡ分子仍是１０00ｂy，用Kpｎ１单独酶切得到40０by和6０0bｙ两种长度的DＮA分子,用EｃｏRⅠ，KpnⅠ同时酶切后得到200by和6０0ｂy两种长度的DNA分子.该ＤNA分子的酶切图谱正确的是（）A.ﻩB.C．D.１９．下列何种技术能有效地打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育农作物的新的优良品种A.基因工程技术ﻩB。诱变育种技术ﻩC。杂交育种技术ﻩD.组织培养技术20。科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白．以下有关该基因工程的叙述错误的是（）A。采用逆转录的方法得到的目的基因B．DNA分子杂交技术可以用来检测人奶基因是否表达Ｃ。马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D．用同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNＡ,可产生黏性末端而形成重组DNA分子21。下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是(）①一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列；②限制性核酸内切酶的活性受温度影响；③限制性核酸内切酶能识别和切割ＲNA；④限制性核酸内切酶可从原核生物中提取；⑤限制性核酸内切酶的操作对象是原核细胞。A．②③ﻩB．③④ﻩＣ．③⑤ D．①⑤２2.关于基因工程和蛋白质工程的说法正确的是()A.都是分子水平上的操作B．基因工程就是改造基因的分子结构C．蛋白质工程就是改造蛋白质的分子结构D．基因工程和蛋白质工程都能创造出自然界根本不存在的蛋白质２3。下列关于各种与基因工程有关酶的叙述，不正确的是（)Ａ。DＮA连接酶能将２个具有末端互补的DＮA片段连接在一起B．PCＲ反应体系中的引物可作为ＤNA聚合酶作用的起点C．限制酶的活性受温度影响D。逆转录酶是以核糖核苷酸为原料，以RＮA为模板合成互补DNA24．根据基因工程的有关知识,回答下列问题：（1）基因工程的基本操作程序的第四步。目前获取目的基因常用的方法有、和。（2）限制性内切酶切割DＮA分子后产生的片段，其末端类型有。（３）质粒载体用ＥcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EｃoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是.（４)按其来源不同,基因工程中所使用的ＤNＡ连接酶有两类,即DNＡ连接酶和Ｅ·coｌｉDNA连接酶。(5)反转录作用的模板是，产物是。若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术，此技术中需要的酶是。（6)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。（7）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。(8)被称为第二代基因工程，它的基本途径有四步，其中第二步是。2５.如图是利用基因工程技术产生人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答:(1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？原因是．（２）过程②必须的酶是，过程③必须的酶是．(3）若A中共有a个碱基对,其中鸟嘌呤有ｂ个,则③④⑤连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶个.（４）图中B应该符合的条件为、、．（5)为使过程⑧更易进行可用药剂处理D.26。某质粒上有SａlＩ、Ｈindｍ、ＢaｍHI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。（１）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状）的来源属于__＿___。

（2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能______，也不能______。ﻫ（3)在构建重组质粒时，应选用____＿_和＿_＿___两种隳对__＿＿__和_____＿进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性.ﻫ（４)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤.为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有_＿＿___、__＿___。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是__＿___菌落中的细菌.为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的___＿＿_作探针进行分子杂交检测，又要用_＿＿_＿＿方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。ﻫ（5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_＿_＿___技术，愈伤组织经__＿___进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加.２7。某一质粒载体如图所示,外源DＮA插入到Aｍpr或Tｅtr中会导致相应的基因失活（Ａmpr表示氨苄青霉素抗性基因,Ｔetr表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用ＢamHI酶切后，与用BamＨI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_____＿＿__＿___(答出两点即可）。

而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。

（2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____＿＿＿____＿__；并且___＿_____＿_＿_＿和＿________＿_＿＿_的细胞也是不能区分的，其原因是＿______＿＿_＿__。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有是__＿＿_____＿＿＿＿的固体培养基.

（3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNＡ复制所需的原料来自于__＿______＿＿__2８。我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高６０％的转基因水稻,改良了稻米的营养品质．下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答.（1)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用法获得此目的基因或扩增目的基因。(2）构建重组Ti质粒时，通常要用分别切割．将重组Ｔi质粒转入农杆菌时,可以处理农杆菌，使重组Tｉ质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻细胞经过获得的愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得;因为培养基3与培养基2的区别是的浓度比例，所以在培养基３中经过可获得完整植株．检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻．29．α1－抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α1－抗胰蛋白酶来缓解症状.（1）图1表示获取人α１－抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题:①a过程是在酶的作用下完成的,该酶的作用特点是。②c过程称为,该过程需要的原料是。③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用技术检测该基因的碱基序列。(2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵,最终培育出能在乳腺细胞表达人α1—抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。①获得目的基因后,常利用技术在体外将其大量扩增。②载体上绿色荧光蛋白(GＥＰ)基因的作用是便于。基因表达载体ｄ，除图中的标示部分外，还必须含有。③若要使转基因羊的后代均保持其特有的性状，理论上应选用技术进行繁殖。３０。Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图甲、图乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:（1）一个图甲所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有个和__＿____个游离的磷酸基团？(2）若对图中质粒进行改造，插入的SｍａⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越。(3)与只使用EｃoRＩ相比较，使用ＢamHⅠ和ＨｉｎdⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源ＤNＡ的优点在于可以防止.Ⅱ．原核生物(如大肠杆菌）是基因工程中较理想的受体细胞，它们具有一些其他生物没有的特点:①繁殖快②多为单细胞③＿________＿_＿__等优点.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_________处理细胞，使之成为＿_______＿___细胞,然后完成转化。Ⅲ.植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是_＿＿_______,且一般将目的基因插入Tｉ质粒的＿_＿__＿_＿_＿_＿中形成重组Ｔi质粒，这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上，科学家发现:这样得到的转基因植株，其目的基因的传递符合孟德尔遗传规律,则该转基因植株一般为＿____＿_＿___子.若要避免基因污染,一般需将目的基因导入植物细胞的__＿_____＿＿DＮA中。31。下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题：（1)图中cDNA文库基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。(２）①过程提取的DＮA需要的切割，B过程是。（３)为在短时间内大量获得目的基因,可用扩增的方法。目的基因获取之后，需要进行,其组成必须有以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。(４）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是，其能否在此植物体内稳定遗传可以用技术进行检测。1.1基因工程的基本工具练习题一、选择题1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是()Ａ、将目的基因从染色体上切割出来Ｂ、识别并切割特定的DＮA核苷酸序列Ｃ、将目的基因与运载体结合D、将目的基因导入受体细胞2、下列四条ＤＮA分子,彼此间具有粘性末端的一组是()TAGGTAGGCCATTACCGGTA①②③④A．①②Ｂ．②③C。③④Ｄ．②④3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有关基因工程的叙述中,错误的是（）A、限制酶只用于切割获取目的基因、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA连接酶D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测４、下列有关基因工程的叙述,正确的是：（)A．ＤNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C.目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外Ｄ．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等5、下列关于ＤＮA连接酶的叙述中,正确的是（）Ａ.DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B.DＮA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C。ＤNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D。同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端６、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcｏｒI，能识别DNA分子中的GAATＴＣ序列,切点在G与A之间.这是应用了酶的（）Ａ.高效性B.专一性Ｃ.多样性Ｄ。催化活性受外界条件影响7、下列有关质粒的叙述，正确的是（)A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DＮＡ分子Ｃ．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的8、右图所示为限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是A.ＣTTAAG,切点在C和T之间B。CTTＡAG，切点在G和Ａ之间C.GAAＴTＣ,切点在G和Ａ之间D。GＡAＴＴC，切点在C和Ｔ之间９、关于右图DNA分子片段的说法正确的是(）①GCATA①GCATATGCATAT15N14N②③……………Ｂ。②处的碱基缺失导致染色体结构的变异Ｃ.把此DNＡ放在含15N的培养液中复制2代,子代中含15Ｎ的ＤNA占3/4Ｄ.该DNA的特异性表现在碱基种类和(A+T）/(G+C)的比例上１0、下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是Ａ．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接Ｂ。RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录Ｃ.一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因Ｄ．胰蛋白酶能作用于离体的动物组织,使其分散成单个细胞11、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（）Ａ．反转录酶

B.ＲNＡ聚合酶

C．DNＡ连接酶

D.解旋酶12、除下列哪一项外，转基因工程的运载体必须具备的条件是：()A。能在宿主细胞中复制并保存

B。具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接Ｃ.具有标记基因，便于进行筛选

D。是环状形态的DＮA分子1３、下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是Ａ．①②B。①③C。①④D．②③１4、基因工程中可用作载体的是①质粒②噬菌体③病毒④动物细胞核A．①②③Ｂ.①②④C．②③④D.①③④１５.关于限制酶的说法中，正确的是A。限制酶是一种酶，只识别ＧAＡTＴC碱基序列Ｂ.EcoRI切割的是G—Ａ之间的氢键C．限制酶一般不切割自身的DＮA分子，只切割外源ＤＮAD．限制酶只存在于原核生物中16．限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNＡ分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamHI，EcoRＩ，ＨiｎdⅢ以及ＢglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何?A．BaｍHI和EcoＲＩ;末端互补序列—AATT—B.ＢａmHＩ和HiｎdⅢ；末端互补序列—GATC-C.EcｏRI和HindⅢ;末端互补序列-ＡATT—D．BamHI和BglII；末端互补序列—GATC-１7．镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变.检测这种碱基序列改变必须使用的酶是（）A。解旋酶B。ＤＮA连接酶C.限制性内切酶D.RＮA聚合酶1８.DNA连接酶催化的反应是Ａ.DNA复制时母链与子链之间形成氢键Ｂ。黏性末端碱基之间形成氢键C。两个DＮA片段黏性末端之间的缝隙的连接Ｄ.A、B、C都不正确19．在受体细胞中能检测出目的基因是因为A．目的基因上有标记Ｂ．质粒具有某些标记基因C．重组质粒能够复制D。以上都不正确20．关于质粒的叙述正确的是A.质粒是能够自我复制的环状DNA分子B.质粒是唯一的载体C.重组质粒是目的基因Ｄ。质粒可在宿主外单独复制二、非选择题２１.下图为DNＡ分子的切割和连接过程。（1)EcoRI是一种

酶，它识别的序列是

，切割位点是

与

之间的

键。切割结果产生的DNA片段末端形式为

.（2）不同来源ＤNＡ片段结合，在这里需要的酶应是

酶,此酶的作用是在

与

之间形成

键。有一种能连接平末端的ＤNA连接酶是

。22.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种.这种转基因番茄已于19９3年在美国上市,请回答：(１）促进果实成熟的重要激素是

。（２）在培育转基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是,基因的“针线”是,基因的“运输工具”是。（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是、23。下图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图，据图回答:(1）①过程需要__＿_______＿_＿__酶的参与。(２)②物质是从大肠杆菌分离出的＿＿＿＿__＿____＿_____。其化学本质是____＿____＿_＿_＿＿_,它必须能在宿主细胞中______＿＿＿＿＿______＿____＿___.（３）③过程表明目的基因＿_______＿______＿_________。答案:１-５ＢＤＡCB６—-１0BBCAC１1－——15ＣDBAC１６-－20DCDBA2１、(１）限制酶

GAAＴTC

鸟嘌呤脱氧核苷酸

腺嘌呤脱氧核苷酸

磷酸二酯

黏性末端

（2）DNA连接

鸟嘌呤脱氧核苷酸

腺嘌呤脱氧核苷酸

磷酸二酯Ｔ4ＤＮA连接酶(１)乙烯（2）限制酶DNA连接酶运载体(３)定向改变生物的遗传性状克服远缘杂交不亲和的障碍2３.（8分)（１）限制性内切酶(2分)（２）质粒（1分)DＮA（１分)复制并稳定地保存（2分)(３）在大肠杆菌内表达(2分)基因工程的应用练习题7-1４点滴积累汇江海厚积薄发1、下列各项中,说明目的基因完成了表达的是A、棉珠中含有杀虫蛋白基因Ｂ、大肠杆菌中具有胰岛素基因Ｃ、酵母菌中产生了干扰素D、抗病毒基因导入土豆细胞中２、转基因动物是指Ａ、提供基因的动物Ｂ、基因组中增加外源基因的动物C、能产生白蛋白的动物D、能表达基因信息的动物3、抗病毒转基因植物成功表达后，以下说法正确的是A．抗病毒转基因植物，可以抵抗所有病毒Ｂ.抗病毒转基因植物，对病毒的抗性具有局限性或特异性C。抗病毒转基因植物可以抗害虫D．抗病毒转基因植物可以稳定遗传，不会变异4。如果通过转基因技术，成功改造了某血友病女性的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常。当她与正常男性结婚,婚后所生子女的表现型为A．儿子、女儿全部正常B．儿子、女儿中各一半正常C。儿子全部有病,女儿全部正常D．儿子全部正常，女儿全部有病５.若利用基因工程技术培育能固氮的水稻新品种，其在环保上的重要意义是A．减少氮肥的使用量,降低生产成本B.减少氮肥的使用量，节约能源C．避免氮肥过多引起环境污染D．改良土壤结构６．疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是Ａ．口服化学药物B．注射化学药物C．采用基因治疗D。利用辐射或药物诱发致病基因突变７．在基因诊断技术中,所用的探针DNA分子中必须存在一定量的放射性同位素,后者的作用是A。为形成杂交的DNＡ分子提供能量B.引起探针DＮＡ产生不定向的基因突变ﻫC.作为探针DＮA的示踪元素D．增加探针ＤNＡ的分子量8.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是ﻩＡ.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．一种基因探针能检测水体中的各种病毒 C．基因诊断的基本原理是ＤNA分子杂交Ｄ.原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良9。采用基因工程的方法培育抗棉虫，下列导入目的基因的作法正确的是①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DＮＡ序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DＮA序列,与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵ﻩﻩA。①② B。②③ﻩC.③④ Ｄ.④①１0.科学家能利用基因工程技术培育出特殊的西红柿、香蕉，食用后人体内可产生特定的抗体，这说明这些西红柿、香蕉中的某些物质至少应 A。含有丰富的免疫球蛋白 Ｂ．含有某种抗原特异性物质 C．含有一些生活的病菌ﻩD．能刺激人体内的效应T细胞分泌抗体1１、切取某动物合成生长激素的基因，用某种方法将此基因转移到鲇鱼的受精卵中,从而鲇鱼比同类个体大3～4倍，此项研究遵循的原理是Ａ．基因突变，DNA→RＮA→蛋白质Ｂ。基因工程,DNＡ→tRＮA→蛋白质C．细胞工程,DNA→ＲＮＡ→蛋白质D．基因重组，ＤNA→RNA→蛋白质12．下列各项不属于基因工程在实际中的应用的是A。转基因抗虫棉的培育成功B。利用DNA探针检测饮用水中有无病毒C.培育工程菌使之能产生胰岛素Ｄ。将C4植物细胞内的叶绿体移入C3植物细胞内13．有关基因工程的成果及应用的说法正确的是A．用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒B．基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培养体型巨大、品质优良的动物Ｃ．基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物D。目前，在发达国家,基因治疗已用于临床实践14、运用现代生物技术的育种方法,将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种,这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白,对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用,保护农业生态环境.根据以上信息，下列叙述正确的是A、Bt基因的化学成分是蛋白质B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物15．基因工程培育的“工程菌”通过发酵工程生产的产品，不包括A.白细胞介素一2ﻩB.干扰素Ｃ.聚乙二醇 D.重组乙肝疫苗１6、利用基因工程技术将生长激素基因导入绵羊体内,转基因绵羊生长速率比一般的绵羊提高30％,体型大50％，在基因操作过程中生长激素基因的受体细胞最好采用A．乳腺细胞B。体细胞 Ｃ.受精卵D．精巢１7、下列不属于利用基因工程技术制取的药物是A、从大肠杆菌体内制取白细胞介素B、在酵母菌体内获得的干扰素C、在青霉菌体内提取青霉素D、在肠杆菌体内获得胰岛素18、基因治疗是人类疾病治疗的一种崭新手段，下列有关叙述中不正确的是Ａ、基因治疗可使人类遗传病得到根治B、基因治疗是一种利用基因工程产品治疗人类疾病的方法C、基因治疗是指将健康基因导入有基因缺陷的细胞中D、基因治疗的靶细胞可以是体细胞和生殖细胞19．下列有关基因工程技术的应用中,对人类不利的是Ａ。制造“工程菌”用于药品生产B.创造“超级菌”分解石油、ＤＤTC．重组DNA诱发受体细胞基因突变D.导人外源基因替换缺陷基因20.“工程菌”是指Ａ.用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系B．用遗传工程的方法把相同种类不同株系的菌类通过杂交得到新细胞株系Ｃ．用基因工程的方法使外源基因得到高效表达的菌类的细胞株系Ｄ。从自然界中选取的能迅速增殖的菌类2１．生产上培育无子番茄、青霉素高产菌株、杂交培育矮秆抗锈病小麦、抗虫棉的培育原理依次是①生长素促进果实发育②染色体变异③基因重组④基因突变⑤基因工程A．①②③④B。①④③②ﻩ Ｃ．①④②⑤D。①④③③２２、下列属于利用基因工程技术培育的新品种的是A、耐寒的小黑麦B、抗棉铃虫的转基因抗虫棉Ｃ、太空椒D、试管牛23、下列有关基因工程的叙述中，不正确的是

A。DＮＡ连接酶将黏性末端的碱基对连接起来Ｂ．基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子

C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换Ｄ。蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料24．把兔控制血红蛋白合成的mRNA加入到大肠杆菌的提取液中，结果能合成出兔的血红蛋白，这说明A。兔和大肠杆菌共用一套遗传密码子B．大肠杆菌的遗传物质是RNAC．兔的ＲNＡ和大肠杆菌的ＲＮA携带相同的遗传信息D．兔控制血红蛋白合成的基因能进人大肠杆菌２5、科学家将菜豆储存蛋白的具有转移到向日葵中,培育出了“向日葵豆”植物.这一过程不涉及Ａ．DNＡ按照碱基互补配对原则自我复制B。DNA以其一条链为模板合成RNAC。RNA以自身为模板自我复制D.按照RNＡ密码子的排列顺序合成蛋白质26。科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，可以携带DNA分子。把它注射入组织中，可以通过细胞的内吞作用的方式进入细胞内,DＮA被释放出来，进入到细胞核内,最终整合到细胞染色体中,成为细胞基因组的一部分，DNA整合到细胞染色体中的过程，属于A．基因突变B。基因重组C．基因互换D.染色体变异27。下列何种技术能有效地打破物种的界限,定向地改造生物的遗传性状,培育新的农作物优良品种Ａ.基因工程技术B。诱变育种技术C．杂交育种技术D。组织培养技术28．生物细胞中含有细胞质基因的结构是①细胞核②染色体③核糖体④线粒体⑤质粒⑥叶绿体A．①②③B．①④⑤Ｃ.②④⑥D．④⑤⑥２９。下列关于遗传与基因工程的叙述正确的是 A.“人类基因组计划"中的基因测序工作是指测定基因的碱基对排列顺序Ｂ．基因治疗的主要原理是引入健康外源基因修复患者的细胞缺陷C．细胞质遗传表现为母系遗传的主要原因是受精卵的遗传物质全部来自于母本Ｄ。人们将苏云金杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞育成抗虫棉的原理是基因重组3０.下列关于基因工程的叙述，错误的是A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B。限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达31。我国自主研制的复制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒RNA的几个重要片段逆转录后插入天花病毒DNA中，形成重组病毒疫苗。该疫苗在人体内具有复制能力，产生的抗原蛋白可以持续刺激免疫系统，使人产生较强的免疫能力。在该疫苗研制过程中A。运用了RNA病毒容易突变的特点B。运用基因工程手段,用质粒作载体C．可用利用培养的动物细胞培养天花病毒D．体现了天花病毒的间接使用价值32、用人的胰高血糖素基因制成的DＮA探针，检测下列物质，不可能形成杂交分子的是A。人胰岛Ａ细胞中的DNAB。人胰岛A细胞中的mRNＡC。人胰岛B细胞中的DNAD．人胰岛Ｂ细胞中的mＲNＡ33.下图表示细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因的克隆技术操作过程，相关分析正确的是A．获得该mRNA的最佳材料是受精卵B.完成过程①②必不可少的酶分别是反转录酶、ＤNA聚合酶C．构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌D．探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌３4、科学家将一段控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋.下列分析不正确的是A。这些鸡是转基因工程的产物B．这种变异属于可遗传的变异C.该过程运用了胚胎移植技术D。该种变异属于定向变异35．目前科学家把兔子血红蛋白基因导入到大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白.下列所叙述的哪一项不是这一先进技术的理论依据Ａ．所有生物共用一套遗传密码子B。基因能控制蛋白质的合成Ｃ.兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DＮＡ都是由四种脱氧核苷酸构成,都遵循碱基互补配对原则,都具有相同的空间结构D。兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先3６、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是A、大肠杆菌B、酵母菌C、Ｔ4噬菌体Ｄ、质粒DNA37．下列不属于基因工程育种优点的是A．育种周期短B．克服远缘杂交不亲和的障碍C．据盲目性D.目的性强38.下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻②我国科学家将苏云金杆菌的某些基因移植到棉花体内，培育出抗虫棉③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒④科学工作者将猪的胰岛素转变成人的胰岛素⑤将人的α－抗胰蛋白酶基因导入到羊的ＤNA分子中A。①②⑤B．①②④⑤C．②④⑤D．①②③④⑤39.转基因抗虫棉可以有效地用于棉铃虫的防治。在大田中种植转基因抗虫棉的同时,间隔种植少量非转基因的棉花或其他作物，供棉铃虫取食.这种做法的主要目的是A。维持棉田物种多样性B．减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度Ｃ．使食虫鸟有虫可食ﻩD．维持棉田生态系统中的能量流动４0．下列哪项不是转基因食物潜在的安全隐患A．转基因植物有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质B.转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏源C．某些转基因生物可以合成干扰素，进人人体增强相应细胞的免疫力Ｄ。某些基因足以使植物体内某些代谢途径发生变化,导致转基因农作物营养成分的改变二、填空题1、番茄果实成熟过程中,某种酶（PG）开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术（见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是，从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNＡ为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中，反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA（靶mRNA）互补形成双链RNＡ,阻止靶mＲＮA进一步翻译形成ＰG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答：（１)反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子，合成该分子的第一条链时，使用的模板是细胞质中的信使RNA，原料是四种,所用的酶是.(2）如果指导番茄合成PG的信使ＲＮA的碱基序列是—Ａ-U—Ｃ—C—Ａ—G—G—Ｕ—Ｃ—,那么,ＰG反义基因的这段碱基对序列是.（３）将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞原生质体的运输工具是,在受体细胞中该基因指导合成的最终产物是。２、随着科学技术的发展,化学农药的产量和品种逐年增加,但害虫的抗药性也不断增强，对农作物危害仍然很严重.如近年来，棉铃虫在我国大面积暴发成灾,造成经济损失每年达100亿以上。针对这种情况,江苏农科院开展“转基因抗虫棉”的科技攻关研究,成功地将某种能产生抗虫毒蛋白细菌的抗虫基因导入棉花细胞中,得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上。就以上材料，分析回答：(１）细菌的抗虫基因之所以能“插入”到棉花体内，原因是。（2)从细菌的DNA中“剪下"抗虫基因的酶是。将细菌的抗虫基因“插入”棉花体细胞中的酶是。(３)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力，这表明棉花体内产生了抗虫的＿_＿_＿_______＿物质。这种变异属于。这个事实说明,害虫和植物共用一套____________＿。（4)假设抗虫基因含有１20０0个碱基对，则该基因控制合成的蛋白质共有个氨基酸。（5）棉花的DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说明—--—————--————。（6)“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可表示为＿____＿＿＿_________＿_。（7)该项科技成果在环境保护上的作用是___＿＿___＿_____＿＿_＿＿。（8)科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，也将出现不抗虫的植株,此现象来源于____。(9）害虫抗药性的增强是的结果；3．在培育转基因植物研究中，卡那霉素抗性基因(kan）常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.下图为获得抗虫棉的技术流程.A构建抗虫基因导入A构建抗虫基因导入B培养选择含重组质粒土壤农杆菌重组质粒B培养选择含重组质粒土壤农杆菌重组质粒土壤农杆菌含kan质粒含kan质粒侵染侵染分化C诱导选择D检测离体棉花叶片组织分化C诱导选择D检测离体棉花叶片组织再生植株愈伤组织转基因抗虫植株转基因抗虫植株(1)Ｂ过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是=1＼*GＢ3①＿＿_＿__________＿___＿____＿_＿___＿______＿_＿__＿____＿__＿＿＿_____,=2\*GB３②＿＿＿_____________＿＿＿＿____＿＿___＿＿__＿___＿__＿_______＿__＿_____.(2）如果利用DＮA分子杂交原理对再生植株进行检测,Ｄ过程应该用________＿＿______________＿_____＿_＿＿_____＿_＿_＿__＿_____＿___＿作为探针(3)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。＝1\＊GB3①将转基因植株与___________＿_____杂交,其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1:1。＝２\＊ＧB3②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为__＿_。③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____＿_______%。(4）种植上述转基因植物，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”.如果把目的基因导人叶绿体ＤＮA中,就可以避免“基因污染”,原因是__＿＿＿＿___＿__。4、请阅读下列几段文字后回答：Ａ．有人把蚕的DＮＡ分离出来，用一种酶“剪切”下制造丝蛋白的基因，再从细菌细胞中提取一种叫“质粒”的ＤNA分子，把它和丝蛋白基因拼接在一起再送回细菌细胞中，结果，此细菌就有生产蚕丝的本领。B．法国科学家发现，玉米、烟草等植物含有类似人体血红蛋白的基因,如加入“Fe”原子,就可以制造出人的血红蛋白，从而由植物提供医疗中所需要的人体血液。Ｃ。19９1年，我国复旦大学遗传所科学家成功的进行了世界上首例用基因疗法治疗血友病的临床实验。D．江苏农科院开展转基因抗虫棉花的研究，得到的棉花新品种对棉铃虫等害虫毒杀效果高达80%～100%。（1）所有这些实验统称为工程，所有这些实验的结果，有没有生成前所未有的新型蛋白质?。(2）A段中实验结果的细菌能生产蚕丝,说明.在将质粒导入大肠杆菌时，一般要用__＿处理该菌,以使处于细胞状态，以便吸收周围环境中的DNA分子。(3）B段中由玉米、烟草的基因生产人类血红蛋白为什么要加入“Fe”原子?,植物中含类似人类血红蛋白基因,从进化上看,说明.（4)人类基因组计划（HGＰ)测定了人体中条染色体的双链DNＡ分子的脱氧核苷酸序列，C段中血友病基因疗法中有关的染色体是染色体；5、如下图所示，在a、b试管内加入的ＤNA都含有30对碱基，四个试管内都有产物生成。请回答:RNAATP酶RNAATP酶脱氧核苷酸DNAATP酶核糖核苷酸DNAATP酶脱氧核苷酸RRNAATP酶核糖核苷酸ａbcｄ（１)a、d两试管内的产物是相同的，但ａ试管内模拟的是过程;ｄ试管内模拟的是过程。（２）b、c两试管内的产物都是,但b试管内模拟的是过程;c试管内模拟的是过程；ｂ试管的产物中１个分子中最多含有碱基,有个密码子。(3)d试管中与ａ试管相比,特有的酶是。６.荧火虫能发光是因为荧火虫体内可以通过荧光素酶催化的系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内，也可使植物体发光。一直以来荧光素酶的惟一来源是从荧火虫腹部提取的。但加利福利亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内,并在大肠杆菌体４内产生荧光素酶.请你根据已有的知识回答下列有关问题：（1）在此转基因工程中，目的基因是，提取目的基因的方法通常有两种,提取该目的基因的方法最可能的途径是。（2)将此目的基因导入到大肠杆菌体内需要运载体的帮助。下列所列各项是选取运载体的时候必须考虑的是A.能够在宿主细胞内复制并稳定保存 Ｂ。具有特定的限制酶切点C．具有与目的基因相同的碱基片断ﻩD．具有某些标记基因(3)下列可作为受体细胞的生物有Ａ。土壤农杆菌ﻩB.结核杆菌 C。噬菌体ﻩD。枯草杆菌（4)在此转基因工程中,是由质粒承担运载体的，除此结构外，常作为载体的物质还有。在将体外重组体DＮＡ导入大肠杆菌体内之前通常要用处理大肠杆菌，目的是。(5）与杂交育种、诱变育种相比,通过基因工程来培育新品种的主要优点是和.７、糖尿病是一种常见病,且发病率有逐年增加的趋势，以致发达国家把它列为第三号“杀手"。（1）目前对糖尿病Ⅰ型的治疗,大多采用激素疗法，所用激素为__＿＿______＿__,由___＿_____＿＿＿＿__＿_细胞分泌。（2)目前检测尿糖常用的试剂为，糖尿遇该试剂加热后呈色。(3）让一健康人和糖尿病患者于空腹时同时口服葡萄糖，服用量按每人每千克体重1克计算，随后每隔一段时间，测定各人的血糖浓度如图甲所示,图中表示糖尿病患者的曲线是___（4）这种治疗用的激素过去主要是从动物的内脏中提取，数量有限，２0世纪70年代后，开始采用基因工程的方法生产，如图乙所示，请回答：①指出图中２、４、6、７的名称：2_＿_＿_________，4＿___________＿,6＿__＿＿＿____＿__，7_＿__＿__＿＿___＿。②一般获取４采用的方法是___＿__＿__＿___.③6的获得必须用___＿__＿_＿_＿＿_切割3和4，使它们产生相同的____＿_＿_＿____，再加入适量的__＿__＿___＿___酶，才可形成。④2的化学本质为.(5）大肠杆菌质粒经ＥcoRＩ（一种限制性核酸内切酶)切割后所形成的黏性末端之一是,则ＥcoRI的识别序列和切点是＿＿__＿_＿＿_＿＿(切点用箭头标在序列上）。9、下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。人胰岛细胞人胰岛细胞大肠杆菌胰岛素mRNAA①人胰岛素人胰岛素大量的A重复进行③④②⑤⑥⑦⑧⑨⑩BCD（1)大肠杆菌等微生物是基因工程最早的突破口和常用的实验材料，这是因为:①大肠杆菌结构简单，容易从体内取出和导入；②大肠杆菌繁殖速度快，产量大，成本低。(2）“目的基因”能在大肠杆菌内实现遗传信息成功的表达，说明大肠杆菌具有一种细胞器是。（3)自然界中生物的变异是的，而以上的基因工程技术使大肠杆菌按照人们目的发生的变异.(4）若Ａ中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有ｂ个，则③④⑤过程连续进行４次,至少需要提供胸腺嘧啶个。（５）家蚕的体细胞共有５６条染色体,对家蚕的基因组进行分析（参照人类基因组计划要求）,应测定家蚕的条双链ＤNA分子上的核苷酸序列，它们分别是。（6）为了提高蚕丝的产量和品质，可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步的选育来完成.这些变异的来源有：。8．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规PＣR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的ＤNA聚合酶,其最主要的特点是。(2)PＣR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________.（３)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?。（4）为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌Ｂ通常为。（5)对符合设计要求的重组质粒Ｔ进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。①采用EｃoRⅠ和PsｔⅠ酶切，得到__＿_＿_＿__种ＤNA片断。②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到____＿＿___种DＮＡ片断。练习题答案一、选择题1--—5CBＢＣＣ６---１0CCCCＢ1１—-—15DＤCCC１６—-—20ＣＣBCC21——-25ＤBAAC26——－３0BADDＤ31--—3５CDＢCD36－—-4０BCＡBＣ二、填空题1、答案:(１）脱氧核苷酸；逆转录酶（２)-T—A-G—G—T—C—Ｃ—Ａ-Ｇ-—A—Ｔ-C—C-A—G-Ｇ—T—C—(3）质粒（或运载体、病毒）；（反义）ＲＮＡ2、(1）①人和羊DNA分子的空间结构、化学组成相同；②有互补的碱基序列（答出其中一点即可）（2）限制酶;DＮＡ连接酶（3)毒蛋白基因重组遗传密码（4）４000（5）基因是遗传物质结构和功能的基本单位(6)ＤNA(基因）→RＮA→蛋白质（7）减少农药对环境的污染，保护生态环境或生态平衡(8）基因突变（９)农药对害虫抗药性的变异进行定向选择3．（1）具有标记基因能在宿主细胞中复制并稳定保存（2)放射性元素标记的抗虫基因（3）①非转基因②3:1③1０0（4)叶绿体遗传表现为母系遗传,目的基因不会通过花粉传递而在下一代中显现出来4、（1）基因没有（2)蚕的丝蛋白基因在细菌体内得以表达Ca2＋感受态（3）人类的血红蛋白是一种含Fe的特殊蛋白质不同生物之间具有一定的亲缘关系（4)24X5、(１)DNＡ的复制逆转录（２）ＲＮＡ转录RNA的复制30１0(3）逆转录酶6．（1)荧光素酶基因；人工合成法（2)AＢD（3)AD(4）动植物病毒、噬菌体；CaCl２以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内（5）目的明确培育周期短可以克服远缘杂交的不亲和性(只要合理,两点即得分)7、（１)胰岛素胰岛B细胞（2）斐林试剂砖红色（3）B(4）①质粒胰岛素基因重组DNＡ受体细胞②人工合成③限制酶黏性末端ＤNA连接酶④DNA（5）—GAATTC－８、(1）质粒(2）核糖体（3）不定向定向(４）15（ａ-b)(5）29２7条常染色体+XＹ两条性染色体（6)基因突变、基因重组、染色体变异9．(１）耐高温(2)引物对B(3）否（4）农杆菌（5）①2②１基因工程原理习题集1、DNA分子克隆技术:克隆，指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。DNA分子克隆技术也称基因克隆技术,是在体外将ＤＮA分子片段与载体DＮＡ片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程。其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达.载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。主要目的是获得某一基因或DNＡ片段的大量拷贝,有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能,随着引入的DＮＡ片段不同，有两种DＮA库，一种是基因组文库，另一种是cDNＡ库。２、分子杂交：两条不同来源的DＮA（或RＮA）链或DNA与RNA之间存在互补顺序时,在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子.形成杂交分子的过程称为分子杂交.3、限制性片段长度多态性:从不同个体制备的ＤＮA,使用同一种限制性内切酶酶切,切得的片段长度各不相同。酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。通常是在酶切位点处发生突变而引发的。4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR):一种体外扩增DＮA的方法。PCR使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。以过高温变性将模板DNA分离成两条链。低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3／端合成一条互补的新链。而新合成的ＤNA又可以继续进行上述循环,因此DＮA的数目不断倍增。６、核酸的凝胶电泳:将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率,它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。在生理条件下，核酸分子中的磷酸基团是离子化的，所以，DNＡ和RＮA实际上呈多聚阴离子状态.将DNA、ＲＮA放到电场中，它就会由负极向正极移动。在凝胶电泳中，一般加入溴化乙锭进行染色，此时，核酸分子在紫外光下发出荧光，肉眼能看到约５0ngDNA所形成的条带。７、细菌转化:所谓细菌转化，是指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的ＤNＡ，而导致遗传特性发生改变的过程。这种提供转化DＮA的菌株叫做供体菌株,而接受转化DNA的菌株则叫做受体菌株。大肠杆菌是使用最广泛的实验菌株。8、反义核酸：指与靶DNA或RNA碱基互补,并能与之结合的一段DNA或RNA。９、ＲNAiｎｔｅrfeｒeｎce：是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRＮA存在同源互补序列的双链ＲNA导入细胞后，能特异性地降解该ｍRＮA，从而产生相应的功能表型缺失，这一过程属于转录后基因沉默机制范畴。１0、Ｓpｉ：λ噬菌体体重组克隆的一种筛选方法,其筛选方法是Spi+：λ不能感染E.cｏｌｉ（p2）；Spi－:λ（rｅd-gam—)能感染E.cｏli(p２)，形成小噬斑/hoｓtｒecA+／chi.λ包装时若ｇａm—，需ｒｅcA产物的作用才可形成噬斑（但为小噬斑）,所以对宿主菌有要求(reｃＡ＋）但rｅcA+可引起其它重组：载体改为red—/gam+可在recA-受体中增殖。11、ＤNA文库：将某种生物的基因组ＤNＡ切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。12、cDNA：cＤNA是指以ｍRＮＡ为模板,在逆转录酶的作用下形成的互补DNA。13、ｃＤNA文库：以细胞的全部ｍＲNA逆转录合成的cDNA组成的重组克隆群体称为cＤＮA文库。１4、DNＡ探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。１5、转导（作用)：借助于病毒载体，遗传信息从一个细胞转移到另一个细胞.16、染色体步移：通过相互重叠的基因组克隆之间进行一连串杂交从而实现染色体上基因的定位。17、斑点杂交：将被检标本点到膜上，烘烤固定后与探针进行杂交。这种方法耗时短，可做半定量分析,一张膜上可同时检测多个样品.18、α—complｅmenｔation：质粒载体重组克隆的筛选方法,LaｃZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β—半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。ＬacＺ△M１5:放在F质粒上，随宿主传代;ＬaｃZ'：放在载体上，作为筛选标记。1９、菌落原位杂交：将细胞从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上,然后将滤膜上的菌落裂解以释放出ＤＮA。将DNＡ烘干固定于膜上与３2P标记的探针杂交，放射自显影检测菌落杂交信号,并与平板上的菌落对位。２0、核酸原位杂交:标记探针与细胞或组织切片中的核酸进行杂交的方法.21、限制性内切酶:识别DNA的特异序列，并在识别点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。22、酶切位点:DNＡ上一段碱基的特定序列，限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DＮＡ酶切成两段。23、DＮA连接酶:催化DＮA中相邻的5／磷酸基与3/羟基间形成磷酸二酯键，使DＮA切囗封合，连接DNA片段.２4、持家基因:是指对所有类型组织细胞在任何时候都需要其表达的基因，通常都是维持细胞基本生存所必须的基因，其表达常保持在固定的水平。又称为组成性表达基因。25、奢侈基因：只在某特定的细胞类型中表达或者说只在发育阶段的某些时期表达的基因叫做奢侈基因。26、Tm值：是反映DNA的热稳定性的一个参数,称为ＤNA的熔解温度,系指一半的双链DNA解离成为单链时的温度.２7、分子标记：广义的分子标记是指可遗传的并可检测的ＤNA序列或蛋白质。蛋白质标记包括种子贮藏蛋白和同工酶(指由一个以上基因位点编码的酶的不同分子形式)及等位酶(指由同一基因位点的不同等位基因编码的酶的不同分子形式）。狭义的分子标记是指能够用来作为指纹鉴定或区分个体特点的DＮA片段。2８、基因工程:指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子中，构成遗传物质的重新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达的过程。29、载体：是携带外源ＤＮA进入宿主细胞进行扩增和表达的DNＡ,它们一般是通过改造质粒、噬菌体或病毒等构建的。30、卫星DNA:又称短串联重复，２～6个核苷酸组成的重复单位串联重复（１0～60次),两侧为特异的单拷贝序列,人类基因组中每1０kｂＤNA序列至少有一个STR序列.31、多克隆位点：ＤNA中含有两个以上密集的、能被多种限制性内切酶识别和切割的位点区.32、定位克隆：也称为图位克隆，是在获取基因在染色体上的位置信息后，采用各种实验方法对基因进行克隆和定位.定位克隆包括定位和克隆两个过程,定位是通过连锁分析找出与目的基因紧密连锁的遗传标记在染色体上的位置，克隆是从定位的染色体区段内分离克隆所要的基因，并进一步研究其功能。也可以回答为“通过遗传标记”先获得某一表型基因在染色体上的定位,再在候选区域内选择已知基因,进行突变的筛选，并获得cDＮＡ及全基因的过程。33、基因芯片:基因芯片又称为DNA微阵列，以基因序列为分析对象的微阵列,是通过缩微技术，根据分子间特异性地相互作用的原理,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测。3４、RT-PCR:是以ＲNA为起始材料经逆转录反应产生cDNＡ,再以cＤNＡ为模板进行PＣR扩增，从而获取目的基因或检测基因表达。主要用于分析基因的转录产物，克隆ｃDNA及合成cＤNA探针，改造cDNA序列等.3５、锚定PＣＲ：用于在体外扩增未知序列的DNA片段的方法，一般的ＰＣＲ必须预先知道欲扩增DNA片段两侧的序列，但人们经常需要分析一端序列未知的基因片段,可利用锚定ＰＣR.该法的基本原理是在基因未知序列端添加同聚物尾，人为赋予未知基因末端序列信息，再用人工合成的与多聚尾互补的引物作为锚定引物，在与基因另一侧配对的特异引物参与下，扩增带有同聚物尾的序列。锚定引物PCR对分析未知序列基因有特殊用途。3６、反向PCＲ:常规PCR可扩增位于两个引物之间的DNA片段,但不能扩增引物外侧的ＤNA序列,反向PCR则可扩增引物外侧的DＮＡ片段，对已知ＤNA片段两侧的未知序列进行扩增和研究。其原理为：先用一种在目标DNＡ区段上没有识别位点的限制性内切酶从距离目标DNA一定距离的两侧位置切割DNＡ分子,然后将这些片断进行分子内连接形成环，根据已知的目标DNA序列按照向外延伸的要求设计一对向外引物,保证被扩增的是目标ＤNA区段两侧的未知序列.３7、多重ＰCR：在同一反应中采用多对引物同时扩增几个不同ＤNA片段,如果基因某一区段缺失，则相应的电泳图谱上此区段ＰＣR扩增产物消失,从而发现基因异常。多重PCＲ具有灵敏、快速的特点,特别适用于检测单拷贝基因缺失、重排、插入等异常改变，其结果与soｕtｈernbｌotｔinｇ一样可靠。38、质粒：是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸（ＤNＡ)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DＮA分子。在基因工程中质粒常被用做载体。39、粘粒载体:也叫柯斯质粒，是一类人工构建的含有λＤNA的cos序列和复制子的特殊特殊类型的质粒载体。40、穿梭质粒载体：是人工构建的一类具有两种不同复制起点和选择记号,因而可以在两种不同寄主细胞中存活和复制的质粒载体.41、基因突变：基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化,亦称点突变。42、逆转录酶：在体内、外均能转录病毒性RNＡ成为DＮA，称为依赖RNA多聚酶，，即为逆转录酶。分布在病毒的类核内.逆转录酶与三种功能有关:①使RＮＡ一DNA杂合双链形成；②切除杂合双链中的RNA链；③进而再生成DNＡ一DＮA的双链.43、扣除杂交:就是用一般细胞的mRNA与特殊细胞的cDNＡ杂交,先扣除一般共有的ｃDＮＡ，再将剩下的特异的cDNA进行克隆，用此方法已成功克隆出控制动物胚胎发育和组织分化的基因.4４、测序酶为修饰的T7DＮApｏｌymerasｅ，９9％3’-5’外切活性被除去（Ｖeｒｓion1。0）；完全除去（V２.０)；用于测序反应（测序酶）。4５、ＹAＣ载体酵母人工染色体载体；含酵母染色体复制起点ori，自主复制序列AＲS;着丝粒(ＣＥN）;两个端粒（ＴEL）。用于克隆50kｂ以上甚至—Mb(２00-50０kb）。原生质体电转化,URA3-trp－ａde2－1赭石突变酵母菌，红色菌落插入失活。４6、同尾酶一类产生相同粘性末端的限制性内切酶。47、cI筛选法CⅠ基因发生突变时不能溶源化，CⅠ-:在hflＡ（高频溶源化）中形成噬斑。ＣⅠ+在ｈｆlA中形成溶源,产生混浊噬斑.48、Ｓａnｇer测序即酶法测序,用双脱氧核苷酸作为链终止试剂,通过聚合酶的引物延伸产生一系列大小不同的分子后再进行分离的方法。4９、同裂酶:DNＡ经限制性内切酶切割后,产生相同粘性末端，这类限制性内切酶称为同裂酶。５０、复制起点：ＤＮA复制的起始位点,DNA复制在起始位点处形成复制叉进行双向复制，通常DNA复制的起始DNＡ序列存在重复倒位序列.51、启动子：启动子是DNＡ分子可以与RNＡ聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位.在ＲNＡ合成开始位点的上游大约10bp和３5ｂp处有两个共同的顺序,称为－10和-３５序列.这两个序列的共同顺序如下,—35区“AATGTGTＧGAＡT”，-１0区“TＴＧACAＴATATT”。大多数启动子均有共同顺序（coｎsenｓｕsｓｅｑueｎce），只有少数几个核苷酸的差别。52、起始密码子：ＡUG不仅是Meｔ或者fＭet（在原核细胞)的密码子，也是肽链合成的起始信号，故称AUＧ为起始密码子。５3、起始因子:在蛋白质生物合成的起始阶段与核糖体亚基结合，起始蛋白质的合成.在E.coli中已分离出三种IＦ。IF1、ＩF2和IＦ3。其中，IF3具有形成三元复合物和解离因子活性，使70S核糖体颗粒解离为30S和50S亚基；IF2形成30Ｓ前起始复合物；IF1无特异功能，但具有加强IF2和IF3的活性作用.54、复制终点ＤNA复制的终止位点,DＮA复制在起始位点处形成复制叉进行双向复制，在终止位点处终止DNA复制,通常DNA复制的终点DNA序列存在重复倒位序列。5５、终止子：细菌DＮA中有转录终止信号,称为终止子。作用是在DNA模板的特异位点处终止ＲNA的合成。在终止子处，RＮA聚合酶停止其聚合作用,将新生RNA链释出,并离开模板DＮＡ。5６、终止密码子：UＡA、ＵＡG和UGＡ为终止密码子,不代表任何氨基酸，也称为无意义密码子.57、终止因子：蛋白质肽链合成的终止因子,在E．cｏli中已分离出三种释放因子.RＦ１,RF2和RＦ3。其中，只有RＦ3与GＴＰ（或ＧＤP)能结合。它们均具有识别mRNA链上终止密码子的作用，使肽链释放,核糖体解聚。二、选择题１、对限制性内切酶的作用，下列哪能个不正确？—－－——--A、识别序列长度一般为4~６bpB、只能识别和切割原核生物DNA分子C、识别序列具有回文结构D、切割原核生物ＤNA分子2、1、同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时，它们的迁移速率是:A、OCＤNA＞ＳＣDNA＞ＬDＮA。B、ＳCDNA〉LDNA＞OCDＮＡ.C、LDNA＞OＣDNA〉ＳCDNA。Ｄ、SＣDNＡ＞OCDNＡ>LDＮA。3、下列关于基因克隆操作方法的叙述哪一个是不正确的。A、选择合适的限制酶，使其在特定的位点切开DＮA分子。B、选择能够进行自我复制的小分子DNA作为载体DNAC、基因克隆就是分子杂交D、制备所需要的DNA片段,用ＤNA连接酶使其和载体DNA连接成重组DNＡ。４、酵母双杂交体系被用来研究____＿A、哺乳动物功能基因的表型分析Ｂ、酵母细胞的功能基因C、蛋白质的相互作用Ｄ、基因的表达调控5、有关反转录的正确叙述是＿_＿___＿Ａ、反转录反应不需要引物B、反转录后的产物是ｃＤNAC、反转录的模板可以是RＮA，也可以是DＮAＤ、合成链的方向是3/→５／６、关于禽类ＲNA病毒逆转录酶有关活性的描述,正确的选择是______A、ＤNＡ聚合酶活性，3/→5/的外切酶活性，DNA旋转酶活性Ｂ、DNA聚合酶活性,５/→3/的外切酶活性，DNA旋转酶活性Ｃ、DNA聚合酶活性,DNA内切酶活性,ＤNＡ旋转酶活性７、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件＿＿＿___Ａ、含有复制原点，抗选择基因Ｂ、含有复制原点，合适的酶切位点C、抗性基因，合适的酶切位点８、关于核酸电泳的叙述,错误的是?__＿_＿_Ａ、泳动速率与分子构象有关B、聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨率最高C、分子泳动的方向与净电荷有关D、泳动速率与分子大小有关9、ｍRNA的序列是5/ACUGAＧＣU３/,那么通过反转录合成的ｃDNＡ的序列应该是:＿___Ａ、5/TGＡCＴCＧA3/B、5／AＧCＴCＡGT３/C、5/ＡGCＵＣAＧU3／D、５/AＣＴGAＧＣＴ3/1０、ＰCR实验的特异性主要取决于______A、DNA聚合酶的种类Ｂ、反应体系中模板DNＡ的量C、引物序列的结构和长度Ｄ、四种dＮTP的浓度11、下列关于限制性核酸内切酶的叙述哪一个是不正确的？Ａ、限制性内切酶存在于许多种细菌中B、限制酶的功能是识别和降解外来的DNAＣ、限制酶是识别和降解DNA的酶的总称D、限制酶能识别DNＡ分子上特定的核苷酸序列并在特定的位点切割DNA12、下列关于ｃDNＡ文库与基因组文库的叙述中,哪一项是不正确的?Ａ、cDNA文库代表了mRＮＡ来源B、从不同类型细胞制备的