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文档简介
实验三叶绿素提取的常见问题材料取样量(实验目的)平行样的选择平均数的计算有效数字的选择平行样的选择随机选几张叶片,然后分别取三份、各1g的材料,分别研磨,提取、测定叶绿素含量;1g材料获得叶绿素20ml,分别倒入三个比色皿中测定OD值;一个比色皿在三台机器中分别测定得到三个数据。平均数的计算具有统计学意义的数据格式应该是:算术平均数±标准差Ca=12.7OD663-2.69OD645Cb=22.9OD645-4.68OD663CT=Ca+Cb=8.02OD663+20.21OD6450.007550.0051326.0084831.0110037.920477实验四、植物生理学实验常用仪器植物生理学实验室仪器叶绿素含量仪(SPAD,Konica)叶面积仪(CI-202,CID)光合测定仪叶绿素荧光仪(Junior-PAM,Walz)叶绿素a、b含量的测定原理研磨法提取分光光度计的核心作用原理叶绿素含量测定仪单位不同:SPAD、每克鲜重叶片中Chla、b的浓度SPAD使用注意事项SPAD-502Plus通过测量叶子对两个波长段里的吸收率,来评估当前叶子中的叶绿素的相对含量。活体测量,保证叶片表面干净,保证发射窗和接收窗的干净。当发现机器有污物,请用软布沾上中性洗洁剂擦拭或联系老师叶面积的计算方法第二单线态10-12S第一单线态10-9S基态能量三线态10-3~10-2S分子内能量传递传向反应中心吸收430nm光吸收670nm光680nm荧光热能热能热能磷光PAM测量的荧光曲线——饱和脉冲法FoFmFvFFo’Fm’ΔFMLALALMLSPSPqP=(Fm’-F)/(Fm’-Fo’)qN=1-(Fm’-Fo’)/(Fm-Fo)NPQ=(Fm-Fm’)/Fm’Fv/Fm=(Fm-Fo)/FmY=ΔF/Fm’=(Fm’-F)/Fm’qPNPQFv/Fm=(Fm-Fo)/Fm
:PSII的最大量子产量,反映了植物的潜在最大光合能力(光合效率)
高等植物:0.8-0.84;绿藻:0.7-0.75;硅藻/甲藻:0.65-0.7;蓝藻/红藻:无固定值当植物受到胁迫(Stress)时,Fv/Fm显著下降!常用叶绿素荧光参数叶绿素荧光仪Fo,Fm,Fv/Fm,Fm’,Fo’,
ΔF/Fm’,Fv’/Fm’,rETR等教学实验(植物生理、光合作用、荧光分析)基础研究可测量荧光诱导曲线、快速光曲线、淬灭分析、暗驰豫等软件可自动拟合快速光曲线Junior-PAM使用注意事项XP、Win7系统光纤保护好,切忌折确定是否材料需要暗适应关注两组参数暗适应:Fo,Fm,Fv/Fm非暗适应:Fm’,Fo’,
Fv’/Fm’光合作用(photosynthesis)指标:光合速率(photosyntheticrate)——每小时每平方分米叶面积吸收二氧化碳的毫克数mg/(dm2·h)或每平方米叶面积吸收二氧化碳的微摩尔数μmol/(m2·s)表示。ECA-PB0402光合测定仪的参数CO2浓度:ppm(partspermillion)=10-7TC:叶室温度℃TL:叶片温度℃RH(%):湿度传感器PAR:光合有效辐射(植物吸收并参与光化学反应的太阳辐射光谱成份,400~
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