病原实验室消毒灭菌课件

病原微生物实验室的

消毒与灭菌省疾病预防控制中心病原微生物实验室的

消毒与灭菌1总论

在病原微生物实验室进行病原微生物相关操作时,对含有病原微生物的废物必须经过灭菌,才能作为普通废物处理;对操作中可能产生的迸溅或泄漏,必须通过消毒处理杀灭病原微生物,以达到操作人员的保护.总论在病原微生物实验室进行病原微生物相关操作时,对2病原微生物实验室消毒、灭菌

基本要求高效、安全、价廉灭菌和高水平消毒剂消毒高度危险性物品中水平消毒剂消毒中度危险性物品低水平消毒剂低度危险性物品病原微生物实验室消毒、灭菌

基本要求高效、安全、价廉3选择消毒灭菌方法的原则耐高温、湿度的物品和器材,应首选压力蒸汽灭菌,耐高温的玻璃器材、油剂类和干粉类等可选用干热灭菌不耐热、不耐湿,以及贵重物品,可选用环氧乙烷或低温蒸汽甲醛气体消毒、灭菌器械的浸泡灭菌,应选择对金属基本无腐蚀的消毒剂选择表面消毒的方法,应考虑表面性质,光滑表面可选择紫外线消毒器近距离照射,

或液体消毒剂擦拭;多孔材料表面可采用喷雾消毒法选择消毒灭菌方法的原则耐高温、湿度的物品和器材,应首选压力蒸4化学消毒灭菌方法1、甲醛(福尔马林)

适用范围:纸张、毛皮、服装、精密仪器、环境物体表面的消毒与灭菌使用方法:熏蒸处理.熏蒸时应将房间密闭,相对湿度70%-90%,温度18度以上,被消毒物品之间应留有充分的空间加热熏蒸法:福尔马林25ml/m3加热熏蒸12h化学熏蒸法:福尔马林40ml/m3和高锰酸钾30ml

/m3混合,熏蒸12h化学消毒灭菌方法1、甲醛(福尔马林)5注意事项:

甲醛对人体有毒性和刺激性,应做好对操作人员的防护.熏蒸时应严格控制温度和相对湿度,以保证消毒效果.消毒后应通风,使甲醛气体散尽.注意事项:6化学消毒灭菌方法2、戊二醛适用范围:适用于不耐热的医疗器械和精密仪器等消毒与灭菌使用方法:使用前要活化,一般可以连续使用,2%7-14天,3.4%28天.常用浸泡法,即将清洗、晾干待灭菌处理的物品浸没于装有戊二醛的容器中,加盖灭菌处理,应浸泡10h,消毒处理,一般20-45min,用无菌水冲洗干净,并无菌擦干后使用化学消毒灭菌方法2、戊二醛7注意事项:

1、戊二醛对手术刀片等碳钢制品有腐蚀性,使用前应先加入0.5%亚硝酸钠防锈2、戊二醛对皮肤粘膜有刺激性,应避免接触,防止接触皮肤、溅入眼内或吸入体内3、遵守化学品安全的国家规定.盛装容器要加盖,环境通风良好.4、使用中戊二醛的浓度可用浓度测试条测定活性戊二醛的含量,当浓度大不到产品要求的使用浓度或溶液变浑浊时,则应废弃.

注意事项:83）擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用0.2％－0.5%过氧乙酸擦拭，作用30min4）喷洒法：对一般污染表面的消毒用0.2％－0.5%过氧乙酸喷洒，作用30－60min注意事项

1）过氧乙酸不稳定，应贮存于通风阴凉处，用前应测定有效含量，原液浓度低于12％时禁止使用

2）稀释液临用前配置，配置溶液时忌与碱或有机物相混合3）擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用0.93.过氧乙酸适用范围：适用于耐腐蚀物品的灭菌，环境及空气等的消毒使用方法：熏蒸、喷雾、浸泡、擦拭、喷洒

1）喷雾法：用气容胶喷雾器以浓度为0.1％－0.5％的过氧乙酸，以20ml/m3的用量对室内空气和物体表面进行喷雾消毒，作用1h2）浸泡法：将清洗，沥干的待消毒物品浸没于装有0.2％－0.5%过氧乙酸的容器中，加盖浸泡30min3.过氧乙酸适用范围：适用于耐腐蚀物品的灭菌，环境及空气等的103）过氧乙酸对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，金属制品与织物经浸泡消毒后，即用清水冲洗干净。

4）使用浓溶液时，谨防溅入眼内或皮肤粘膜上，一旦溅上，即时用清水冲洗。

5）消毒被血液、脓液等污染的物品时，需适当的延长作用时间3）过氧乙酸对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，金属制品与114二氧化氯适用范围：适用于环境、物体表面和水等消毒使用方法：浸泡、擦拭、喷洒

1）浸泡法：将清洗、晾干的待消毒或灭菌物品浸没于装有二氧化氯的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用100－250mg/L二氧化氯溶液浸泡30min；对肝炎病毒和结核分支杆菌污染物品的消毒，用500mg/L的二氧化氯浸泡30min；对细菌芽孢污染物品的消毒用，用1000mg/L的二氧化氯浸泡30min4二氧化氯适用范围：适用于环境、物体表面和水等消毒122)擦拭法：对大件物品或其他不宜用浸泡法消毒的物品可用擦拭法消毒。消毒所用的浓度和作用时间于浸泡法相同。

3)喷洒法：对一般污染的表面，用500mg/L的二氧化氯均匀喷洒，作用30min;对肝炎病毒的结合杆菌污染的表面，用1000mg/L二氧化氯均匀喷洒，作用60min。

4）饮水消毒法：在饮用水源中加入5mg/L的二氧化氯，作用5min，使大肠杆菌数达到饮用水卫生标准。2)擦拭法：对大件物品或其他不宜用浸泡法消毒的物品可用擦13注意事项：

1）A和B液混合后产生的二氧化氯溶液不稳定，应现配现用

2）配制溶液时，忌与碱或有机物相混合

3）二氧化氯对金属有腐蚀性，金属制品经二氧化氯消毒后，应迅速用清水冲洗干净并沥干。注意事项：145含氯消毒剂适用范围：适用与玻璃器皿、物体表面、环境地面、墙面、污水、排泄物、分泌物等消毒使用方法：浸泡、擦拭、喷洒与干粉消毒等

1）浸泡法：将待消毒物品浸没于装有含氯消毒剂溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用含有效氯1000mg/L消毒液浸泡10min以上；对细菌芽孢污染物品的消毒用，用含有效氯5000mg/L消毒液浸泡30min以上

5含氯消毒剂适用范围：适用与玻璃器皿、物体表面、环境地面、墙152)擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用擦拭法消毒。

3)喷洒法：对一般污染的表面，1000mg/L的消毒液均匀喷洒，作用30min以上;对细菌芽孢污染物品的消毒用，用含有效氯5000mg/L消毒液均匀喷洒，作用60min以上

4)干粉消毒法：对排泄物的消毒，用含氯消毒剂干粉加入排泄物中，使含有效氯10000mg/L，略加搅拌后作用2－6h；对医院污水的消毒，用干粉按有效氯50mg/L用量加入污水，并搅拌均匀，作用2h后，测定余氯大于6.5mg/L即可排放2)擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用擦拭法16注意事项：

1）粉剂应于阴凉处避光、防潮、密封保存；水剂应于阴凉处避光、密封保存。所需溶液应现配现用。

2）配置漂白粉等粉剂溶液时，应戴口罩，橡胶手套。

3）未加防锈剂的含氯消毒剂对金属有腐蚀性，不应用于金属物品的消毒，加防锈剂的含氯消毒剂对金属物品消毒后，应用净水冲洗干净，并擦干后使用。注意事项：174）对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒

5）用于餐具的消毒后，应及时用净水冲洗

6）消毒时，若存在大量有机物时，应提高使用浓度或延长作用时间。

7）用于污水消毒时，应根据污水中还原性物质的含量适当增加浓度。4）对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒186碘伏适用范围：适用于手、皮肤、粘膜等的消毒使用方法：

1）浸泡法：对皮肤的浸泡消毒，卫生洗手消毒用含有效碘500mg/L的消毒液浸泡2min。

2）擦拭法：对手、皮肤和粘膜用擦拭法消毒。消毒时，用浸有有效碘2500－5000mg/L碘伏消毒液的无菌棉球擦拭待消毒部位。消毒液局部擦拭2遍，共作用2min。

3）冲洗法：对伤口、创面、粘膜的消毒，用有效碘含量为2500mg/L的消毒液冲洗，作用3－5min6碘伏适用范围：适用于手、皮肤、粘膜等的消毒19注意事项：

1）碘伏应于阴凉处避光、防潮、密封保存。

2）碘伏对二价金属制品有腐蚀性，不应做相应金属制品的消毒

3）消毒时，若存在有机物，应增加消毒剂浓度或延长消毒时间。

4）避免与拮抗药物同用。注意事项：207、乙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等使用方法：

1）浸泡法：将待消毒物品放于装有乙醇溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用75％的乙醇溶液浸泡10min以上。

2）擦拭法：对皮肤、仪器外物体表面的消毒，用75％的乙醇擦拭7、乙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等21注意事项：

1）乙醇易燃，忌明火，需置冷及通风处保存。

2）必须用医用乙醇，严禁使用工业乙醇消毒和作为原材料配置消毒剂。

3）用于手和皮肤消毒时，对酒精过敏者慎用

4）乙醇能破坏用胶镶嵌的仪器镜头，可使橡胶及某些塑料管在延长使用或重复使用后变硬膨胀，故用乙醇消毒仪器应注意。注意事项：228异丙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等使用方法：

1）浸泡法：将待消毒物品放于装有异丙醇溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用60％的异丙醇溶液浸泡10min以上。

2）擦拭法：对皮肤、仪器外物体表面的消毒，用用60％的异丙醇擦拭8异丙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等23注意事项：

1）异丙醇易燃，忌明火，需置冷及通风处保存。

2）用于手和皮肤消毒时，对醇类过敏者慎用

4）醇能破坏用胶镶嵌的仪器镜头，可使橡胶及某些塑料管在延长使用或重复使用后变硬膨胀，故用于消毒仪器应注意。注意事项：249氯己定适用范围：适用于手、皮肤消毒和粘膜消毒使用方法：

1）擦拭法：对手、皮肤的消毒。消毒时，用5000mg/L醋酸氯己定－乙醇（70％）溶液涂擦2遍，共作用1min；对伤口创面消毒，用5000mg/L醋酸氯己定水溶液涂擦创面2－3遍，作用2min。

2）冲洗法：粘膜、创面的消毒，用500－1000mg/L醋酸氯己定水溶液冲洗，至冲洗液变清为止。9氯己定适用范围：适用于手、皮肤消毒和粘膜消毒25注意事项：

1）勿与肥皂、洗衣粉等阴离子表面活性剂混合使用或前后使用

2）冲洗消毒时，若创面脓液太多，应延长冲洗时间。注意事项：26环氧乙烷气体灭菌适用范围：主要适用于忌湿、忌热物品的灭菌，如：精密仪器、塑料制品、纸张、书籍、记录纸、毛皮制品等。使用方法;1)大型环氧乙烷灭菌器（5m3以上）适用于大件物品、精密仪器和大量的物品的灭菌。用药量：0.8－1.2kg/m3，温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。

环氧乙烷气体灭菌适用范围：主要适用于忌湿、忌热物品的灭菌，如272)中型环氧乙烷灭菌器（1—5m3）适用于一次性卫生用品和精密仪器的灭菌。用药量：800-1000mg/L；消毒450mg/L。温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。

3）小型环氧乙烷灭菌器（<1m3）适用于小型精密仪器、病例、纸张、信件的灭菌。用药量：800-1000mg/L。温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。2)中型环氧乙烷灭菌器（1—5m3）适用于一次性卫生用品和28注意事项

1）环氧乙烷钢瓶存放于无火源、无转动马达、无日晒、通风好、温度低于40℃的地方。

2）吸取或分装液态环氧乙烷时，须先将容器用冰水冷却。操作人员应戴防毒口罩，若不慎将液体落于皮肤黏膜上，必须立即用水冲洗半分钟。

注意事项293）投药及开钢瓶时不能用力过猛，以免药液喷出。

4）经常检查环氧乙烷泄漏情况。可用含10％酚酞的饱和硫代硫酸钠溶液浸泡湿滤纸，贴于疑漏气处，如滤纸变红，即证明有环氧乙烷泄漏，应立即进行处理。

5）热水加热环氧乙烷容器时，必须先打开阀门；移出热水后，才能关闭阀门。

6）灭菌后的物品，放入解析器内清除残留环氧乙烷。

7）环氧乙烷遇水后形成有毒的乙二醇。故不可用用于食品的消毒灭菌。3）投药及开钢瓶时不能用力过猛，以免药液喷出。30二物理灭菌方法1、压力蒸汽灭菌适用范围：适用于耐高温、高湿度医疗器械的实验器材物品的灭菌，预真空和脉动真空式压力蒸汽灭菌器适用于多孔性物品的灭菌，但不适用于液体的灭菌。注意事项

1）操作和日常维护人员应经培训合格

2）预防性的维护程序应包括：由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。二物理灭菌方法1、压力蒸汽灭菌313）应用饱和蒸汽，且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这些物质可能污染正在灭菌的物品。

4）物品应放在空气能够排出，又良好热渗透性的容器；灭菌器柜腔装载要松散，便于蒸汽可以均匀作用于装载物。

5）无互锁装置的高压灭菌器，应关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下再开门，开门时应戴适当的手套和面罩防护

6）高压灭菌液体时，取出的液体可能因过热而沸腾，应采用慢排式设置。3）应用饱和蒸汽，且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这327）高压灭菌效果监测时，化学指示卡和电热偶计应置于每件物品的中心，最好在“最大”装载时监测，以确定灭菌程序是否恰当。预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器应定期进行B-D测试，监测其排气效果。

8）灭菌器的排水过滤器应当每天拆下清洗

9）应保证安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。7）高压灭菌效果监测时，化学指示卡和电热偶计应置于每件物332、干热灭菌焚烧法和干烤法为主前者适用于可能具有传染性的可燃性废弃物的处理，后者适用于耐高温的实验室用品的消毒和灭菌，灭菌条件150℃，2.5h或160℃，2h或170℃，1h或180℃，30min干烤灭菌时注意的问题

1）物品干烤前应洗净，以防附着的污物炭化。

2）玻璃器皿干烤前应完全干燥，灭菌时勿于烤箱底、壁直接接触，灭菌后温度降至40℃再开箱，以防炸裂。

3）包装不宜过大，安放物品不能超过箱体内高度的2/3，物品间应留有空隙，粉剂和油脂的厚度不得超过1.3cm。2、干热灭菌343、紫外线消毒适用范围：凡被微生物污染的表面和空气均可采用紫外线消毒注意事项

1）物表消毒照射剂量：繁殖体不低于10000uw.s/cm2

芽孢不低于100000uw.s/cm2

真菌孢子不低于600000uw.s/cm22）紫外线灯表面保持清洁

3）温度低于20℃高于40℃，相对湿度大于60％时，适当延长照射时间3、紫外线消毒354）不得使紫外线光源直接照射到人体。

5）使用高臭氧紫外线消毒柜和臭氧消毒柜，应安放于通风良好的环境中，防止臭氧泄漏中毒。

6）普通型或低臭氧型直管紫外灯（30w）新灯管的辐照度值在灯管下方垂直1m的中心处，应≥90uw.s/cm2

使用中的，应≥70uw.s/cm2，低于此值应与更换。4）不得使紫外线光源直接照射到人体。364、HEPA过滤

1）空气经HEPA滤器过滤，更新后，可在实验室内再循环使用

2）HEPA滤器消毒可用福尔马林熏蒸，或过氧乙酸喷雾消毒

3）卸载后用医用废物塑料袋包装后送焚烧。4、HEPA过滤375、电力辐照灭菌适用范围：可用于一次性医疗卫生用品，移植物，食品，药品，纸制品的消毒和灭菌。注意事项：

1）电力辐射对人体有很大的伤害，甚至可至人死亡，因此操作人员要特别注意防护，严格执行操作规程。

2）电力辐射对一些物品有破坏作用，可使棉织品和塑料制品的强度降低，药品失效，食品失去香味，玻璃变暗，在处理时对此应加以考虑。5、电力辐照灭菌38实验室消毒灭菌的应用一般原则

1）及时消毒

2）彻底消毒

3）有效消毒

4）消毒灭菌前应进行预清洁

5）避免二次污染

6）减少对人体的伤害，对物品的破坏，对环境的污染实验室消毒灭菌的应用一般原则39一、一般工作场所消毒空气消毒：一般可加强开窗，自然通风换气，可能时采用排气扇人工机械通风，做到每小时换气10－15次。也可用紫外线照射，在天花板上距离地面2.5m处吊装低臭氧紫外线灯及向上反射的灯罩，或装在墙壁上，反射罩斜向上方，使紫外线照射在与水平面成30－800角左右范围内，不宜直接，以免对人、试剂及标本危害。每立方米空间不少于1.5W，上午下午各照射一次，每次不少于45min.当有可能产生微生物气溶胶时，应随时照射并延长照射时间，清洁区每天开窗通风数次即可。一、一般工作场所消毒空气消毒：一般可加强开窗，自然通风换气，40表面消毒：

1）桌（台）椅等表面每天工作前用湿抹布抹擦1次，地面用湿拖把拖擦1次，禁用干抹干扫，工作完成后，用250－500mg/L有效氯溶液、0.1％－0.2％过氧乙酸溶液或2％碱性戊二醛溶液抹擦1次，作用30－60min,对地面所用消毒剂浓度或消毒时间应比消毒台面者加倍，铺于工作面的纸张，工作后烧毁，布或塑料薄膜浸入消毒液内或用压力蒸汽消毒，各种表面也可用便携式高强度紫外线消毒器距表面不高于3cm，缓慢移动照射表面1s以上。表面消毒：412）若被明显污染，应立即用1000－2000mg/L有效氯或02.－0.5％过氧乙酸溶液洒于污染表面，并使消毒液浸没污染物，保持30－60min，再用抹布或拖把拖擦干净，该拖把或抹布浸于上述消毒液1h或煮沸30min3）抹布和拖把等清洁工具应各室专用，特别是污染区和情节区不能混用，，用后清洗干净晾干，最好放阳光下曝晒，清洁区每天湿抹湿擦表面1次，每周用消毒液消毒1次即可。2）若被明显污染，应立即用1000－2000mg/L有效42二、一般器材消毒金属器材：穿刺取血针或针头应用压力蒸汽灭菌，做到一人一份一灭菌，用完消毒后毁弃，接种环类可用酒精灯灼烧灭菌，但当环上有较多物品，尤其是液体时注意避免爆裂或溅泼。较大的金属器材或有锋刃的刀剪受污染后不宜灼烧灭菌，可煮沸10－30min或浸入2％碱性或中性戊二醛或8％甲醛乙醇溶液180min后，清洗、沥干，必要灭菌时再干热或压力蒸汽灭菌。二、一般器材消毒金属器材：43玻璃器材：

1）采标本的器材如玻片、吸管、玻瓶要做到一人一份一消毒，凡曾受污染的吸管、试管、滴管、离心管、玻片、玻棒、波瓶、平皿等应立即浸入1％洗涤剂中或0.5％肥皂液中煮沸15－30min，也可浸入洗涤消毒液中数小时，再洗清沥干；曾装过蛋白质较多的液体如血液、血清、唾液、胃液等，在煮沸前应用水冲洗，此冲洗液另行煮沸消毒，接种培养过的琼脂平皿应单独煮沸，趁热将琼脂倒弃，再刷洗和灭菌。玻璃器材：442）刷洗后，用于生化检验或免疫学检验者，可浸泡于重铬酸钾－浓硫酸清洁液内，24小时后彻底冲洗干净，最后再用蒸馏水冲洗三遍，沥干、烘干后再用。

3）用于微生物检验者，吸管一端应塞少量棉花，再用牛皮纸包好，不宜用报纸包，140℃,3h或160℃,2h；170℃,1h灭菌，待冷至80℃才能开烤箱门，若箱内易燃品冒烟或出现焦唯，应立即切断电源并关闭出气孔，切勿开启箱门，以免供氧导致燃烧，也可用压力蒸汽121℃，105.4kpa灭菌15－30min，吸管宜直放，空试管和空瓶口应朝下，且不能完全密闭，带螺旋帽的管瓶应旋松，玻璃容器塞子和容器间放一纸条，灭菌后再塞紧。2）刷洗后，用于生化检验或免疫学检验者，可浸泡于重铬酸45塑料制品：

1）一次性使用的塑料制品如薄膜手套、无纺布帽子、工作衣、口罩等，用后放污物袋内中烧毁。

2）耐热塑料用0.5％－1.0％肥皂液或洗涤剂中煮沸15－30min，洗涤后，压力争气灭菌。

3）不耐热塑料用0.5％过氧乙酸或1000mg/L有效氯溶液浸泡30－60min，再洗净晾干，若要求灭菌再用环氧乙烷在消毒柜内灭菌，800mg/L，于54±2℃，相对湿度60％±10％下作用4－6h，或在丁基橡胶布袋中1500mg/L，大于20℃下作用4h；若为薄膜或板状物品，也可用便携式高强度紫外线灯照射1－3s。

4）一般血清学反应用过的塑料板可直接浸入1％盐酸2h以上或过夜塑料制品：46橡胶制品：橡胶制品如手套、吸液管（球）受污染后可用0.5％－1.0％肥皂液或洗涤剂溶液中煮沸15－30min，煮时吸液管（球）内应充满液体而无气泡，全部浸没液内，清洗后晾干，必要时再用压力蒸汽115℃，70kpa灭菌15min.橡胶制品：47纺织品：棉制工作服、帽子、口罩、鞋套等一般放专用污物袋内，送洗衣房清洗，每周两次；有明显污染随时喷洒2％碱性或中心戊二醛溶液作用30－60min或压力蒸汽121℃,104.5kpa，15－30min.纺织品：48贵重仪器：

1）贵重仪器不宜加热，不能用消毒剂浸泡，局部轻度污染时，可用2％碱性或中性戊二醛溶液或1％氯已定乙醇溶液擦拭；污染严重或传染性强时，半小时后重复擦拭1－2次。

2）若离心时，离心管未密闭，试管破裂、液体外溢，离心机内部也应2％碱性或中性戊二醛反复擦拭，或整机用环氧乙烷在54±2℃,相对湿度60％±10%下，用800mg/L于消毒柜或袋内消毒4－6h贵重仪器：49洁净室(箱或台)的消毒高效滤器过滤、层流通风只能排除空气中及操作产生的气溶胶中的微生物,不能排除洁净室(箱或台)表面及其内物品表面上的微生物.故对洁净室(箱或台)的上下及四壁表面仍须另行消毒.一般在工作开始前及工作后各进行一次,所有放入的物品(被检标本除外)的表面,都应经过消毒或灭菌.一般用2%戊二醛溶液抹擦,有时也可用甲醛(35ml/m3,＞18℃,RH80%,24h),过氧乙酸喷雾(2%溶液8ml/m3,2h),熏蒸或抹擦,也可用紫外线灯照射,但须面面照到,对操作中被污染的器材应立即放入消毒液如2%戊二醛,2%煤酚皂,1%氯己定乙醇溶液浸泡消毒.洁净室(箱或台)的消毒50其他：

1）培养基一般应用压力蒸121℃,104.5kpa15min；若容积大应适当增加灭菌温度和时间，但有的培养基灭菌温度不能过高，时间不能过长，否则培养基变质或降低营养价值，如乳酸会分解，琼脂或明胶的凝固性可能降低，应降低温度未115℃，70kpa，10－15min或流动蒸汽间歇灭菌，如鸡蛋或血清培养基在80－100℃下30min，每日一次，连续3d，也可达到灭菌目的。其他：51其他：

2）有的忌热的液体试剂如尿素、血清可过滤除菌，若所过滤液体较浑浊，应先用孔径稍大的滤器虑除较大颗粒，再用除菌滤器过滤。其他：52三、肝炎病毒及结核杆菌污染物的消毒肝炎病毒污染物的消毒

1）对受污染的表面消毒应用2500－5000mg/L有效氯溶液或0.5％过氧乙酸溶液擦拭消毒30－60min；对受污染的器材最好煮沸20－30min，或用2％碱性或中性戊二醛、0.5％过氧乙酸溶液或500－10000mg/L有效氯溶液擦拭或浸泡。三、肝炎病毒及结核杆菌污染物的消毒肝炎病毒污染物的消毒532）若有明显的血液污染，用高浓度的消毒液浸泡，常使血液凝固反不易消毒彻底，可先将血液冲洗干净，冲洗液另行消毒

3）肝炎血清血检验用的反应板可用0.5％过氧乙酸。1％过氧戊二酸或3000mg/L有效氯溶液浸泡2－4h4)检查肝炎标本后，决不可用肥皂流水洗手，，必须用消毒液如0.2％过氧乙酸、500mg/L有效碘的碘伏溶液浸泡1－2min或取3－5ml于手上互相搓擦1－2min。2）若有明显的血液污染，用高浓度的消毒液浸泡，常使血液凝54结核杆菌污染物的消毒

1）结核杆菌污染物品消毒首推热力法，但用热固定的痰涂片不能认为安全，应立即投入消毒液内。

2)不能热力消毒的物品才用消毒液消毒，可用0.5％的过氧乙酸，5％的酚，有效氯6000－10000mg/L的含氯消毒液，70％乙醇溶液，1％的二氧化氯溶液和2％的戊二醛溶液抹擦或浸泡，忌热忌湿的物品也可用环氧乙烷熏蒸消毒。结核杆菌污染物的消毒55四、检验单的消毒检验单除可用电离辐射、微波或紫外线照射、环氧乙烷或甲醛熏蒸外，可用便携式高强度紫外线消毒器，两面均照射四、检验单的消毒检验单除可用电离辐射、微波或紫外线照射、环氧56五、剩余标本及容器的处理消毒处理首选焚烧、压力蒸汽灭菌、干热或煮沸，化学消毒法也不能排除。特别是液体标本如少量的尿、胸水、腹水、脑脊液、唾液、胃液、肠液、关节腔液，可每100ml加漂白粉5g或二氯异氰尿酸钠2.5g,搅匀后作用2－4h；少量痰、脓、血、粪及其他固体形标本加2倍量25000－50000mg/L有效氯漂白粉或二氯异氰尿酸钠溶液，拌匀后作用2－4h，若为病毒性肝炎或结核病的标本延长至6h五、剩余标本及容器的处理消毒处理首选焚烧、压力蒸汽灭菌、干热57不能烧毁的容器可浸入1000mg/L的有效氯漂白粉澄清液或异氯二氰尿酸钠溶液内2－6h,每日更换消毒液1－2次，然后用洗涤剂和流水刷洗、沥干，下次再用时，再用压力蒸汽灭菌。若属结核杆菌污染标本也可用5％－10％煤酚皂溶液代替有效氯溶液，所有处理应由专人负责，每天至少处理一次。不能烧毁的容器可浸入1000mg/L的有效氯漂白粉澄清液或异58六、手的消毒1）手的消毒用消毒剂比用肥皂流水效果好，特别是接触具有传染性标本后，一定要用消毒剂消毒手。

2）氯己定乙醇溶液杀菌作用强，对皮肤刺激性不大，比单纯用70％乙醇好，使用渐多。

3）碘伏由较好的杀菌作用，又可去污，对皮肤无刺激性，但太贵

4）过氧乙酸和有效氯溶液杀菌作用最强，也最便宜，但又刺激性且不稳定，还有腐蚀性。六、手的消毒1）手的消毒用消毒剂比用肥皂流水效果好，特别595)手消毒的注意事项

1、用自动洗手设备较非自动洗手设备效果好。

2、肥皂挂起保持干燥比放在肥皂盒内经常潮湿好，潮湿肥皂比干燥肥皂污染严重。

3、洗手用自来水龙头开关宜用脚踏或长臂的，最好用自动开关的

4、洗手后不用公用毛巾擦手，任其自然干燥或用个人专用毛巾或一次性使用的纸巾擦干，最好用烘干机烘干。

5、消毒液浸泡洗手，不宜短于1min，消毒液每天更换，容器应清洗；消毒液擦手用量不宜少于2ml,一般3－5ml，且手掌、手背、手指均需擦到，保持湿润1min以上。5)手消毒的注意事项60

谢谢！

61病原微生物实验室的

消毒与灭菌省疾病预防控制中心病原微生物实验室的

消毒与灭菌62总论

在病原微生物实验室进行病原微生物相关操作时,对含有病原微生物的废物必须经过灭菌,才能作为普通废物处理;对操作中可能产生的迸溅或泄漏,必须通过消毒处理杀灭病原微生物,以达到操作人员的保护.总论在病原微生物实验室进行病原微生物相关操作时,对63病原微生物实验室消毒、灭菌

基本要求高效、安全、价廉灭菌和高水平消毒剂消毒高度危险性物品中水平消毒剂消毒中度危险性物品低水平消毒剂低度危险性物品病原微生物实验室消毒、灭菌

基本要求高效、安全、价廉64选择消毒灭菌方法的原则耐高温、湿度的物品和器材,应首选压力蒸汽灭菌,耐高温的玻璃器材、油剂类和干粉类等可选用干热灭菌不耐热、不耐湿,以及贵重物品,可选用环氧乙烷或低温蒸汽甲醛气体消毒、灭菌器械的浸泡灭菌,应选择对金属基本无腐蚀的消毒剂选择表面消毒的方法,应考虑表面性质,光滑表面可选择紫外线消毒器近距离照射,

或液体消毒剂擦拭;多孔材料表面可采用喷雾消毒法选择消毒灭菌方法的原则耐高温、湿度的物品和器材,应首选压力蒸65化学消毒灭菌方法1、甲醛(福尔马林)

适用范围:纸张、毛皮、服装、精密仪器、环境物体表面的消毒与灭菌使用方法:熏蒸处理.熏蒸时应将房间密闭,相对湿度70%-90%,温度18度以上,被消毒物品之间应留有充分的空间加热熏蒸法:福尔马林25ml/m3加热熏蒸12h化学熏蒸法:福尔马林40ml/m3和高锰酸钾30ml

/m3混合,熏蒸12h化学消毒灭菌方法1、甲醛(福尔马林)66注意事项:

甲醛对人体有毒性和刺激性,应做好对操作人员的防护.熏蒸时应严格控制温度和相对湿度,以保证消毒效果.消毒后应通风,使甲醛气体散尽.注意事项:67化学消毒灭菌方法2、戊二醛适用范围:适用于不耐热的医疗器械和精密仪器等消毒与灭菌使用方法:使用前要活化,一般可以连续使用,2%7-14天,3.4%28天.常用浸泡法,即将清洗、晾干待灭菌处理的物品浸没于装有戊二醛的容器中,加盖灭菌处理,应浸泡10h,消毒处理,一般20-45min,用无菌水冲洗干净,并无菌擦干后使用化学消毒灭菌方法2、戊二醛68注意事项:

1、戊二醛对手术刀片等碳钢制品有腐蚀性,使用前应先加入0.5%亚硝酸钠防锈2、戊二醛对皮肤粘膜有刺激性,应避免接触,防止接触皮肤、溅入眼内或吸入体内3、遵守化学品安全的国家规定.盛装容器要加盖,环境通风良好.4、使用中戊二醛的浓度可用浓度测试条测定活性戊二醛的含量,当浓度大不到产品要求的使用浓度或溶液变浑浊时,则应废弃.

注意事项:693）擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用0.2％－0.5%过氧乙酸擦拭，作用30min4）喷洒法：对一般污染表面的消毒用0.2％－0.5%过氧乙酸喷洒，作用30－60min注意事项

1）过氧乙酸不稳定，应贮存于通风阴凉处，用前应测定有效含量，原液浓度低于12％时禁止使用

2）稀释液临用前配置，配置溶液时忌与碱或有机物相混合3）擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用0.703.过氧乙酸适用范围：适用于耐腐蚀物品的灭菌，环境及空气等的消毒使用方法：熏蒸、喷雾、浸泡、擦拭、喷洒

1）喷雾法：用气容胶喷雾器以浓度为0.1％－0.5％的过氧乙酸，以20ml/m3的用量对室内空气和物体表面进行喷雾消毒，作用1h2）浸泡法：将清洗，沥干的待消毒物品浸没于装有0.2％－0.5%过氧乙酸的容器中，加盖浸泡30min3.过氧乙酸适用范围：适用于耐腐蚀物品的灭菌，环境及空气等的713）过氧乙酸对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，金属制品与织物经浸泡消毒后，即用清水冲洗干净。

4）使用浓溶液时，谨防溅入眼内或皮肤粘膜上，一旦溅上，即时用清水冲洗。

5）消毒被血液、脓液等污染的物品时，需适当的延长作用时间3）过氧乙酸对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用，金属制品与724二氧化氯适用范围：适用于环境、物体表面和水等消毒使用方法：浸泡、擦拭、喷洒

1）浸泡法：将清洗、晾干的待消毒或灭菌物品浸没于装有二氧化氯的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用100－250mg/L二氧化氯溶液浸泡30min；对肝炎病毒和结核分支杆菌污染物品的消毒，用500mg/L的二氧化氯浸泡30min；对细菌芽孢污染物品的消毒用，用1000mg/L的二氧化氯浸泡30min4二氧化氯适用范围：适用于环境、物体表面和水等消毒732)擦拭法：对大件物品或其他不宜用浸泡法消毒的物品可用擦拭法消毒。消毒所用的浓度和作用时间于浸泡法相同。

3)喷洒法：对一般污染的表面，用500mg/L的二氧化氯均匀喷洒，作用30min;对肝炎病毒的结合杆菌污染的表面，用1000mg/L二氧化氯均匀喷洒，作用60min。

4）饮水消毒法：在饮用水源中加入5mg/L的二氧化氯，作用5min，使大肠杆菌数达到饮用水卫生标准。2)擦拭法：对大件物品或其他不宜用浸泡法消毒的物品可用擦74注意事项：

1）A和B液混合后产生的二氧化氯溶液不稳定，应现配现用

2）配制溶液时，忌与碱或有机物相混合

3）二氧化氯对金属有腐蚀性，金属制品经二氧化氯消毒后，应迅速用清水冲洗干净并沥干。注意事项：755含氯消毒剂适用范围：适用与玻璃器皿、物体表面、环境地面、墙面、污水、排泄物、分泌物等消毒使用方法：浸泡、擦拭、喷洒与干粉消毒等

1）浸泡法：将待消毒物品浸没于装有含氯消毒剂溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用含有效氯1000mg/L消毒液浸泡10min以上；对细菌芽孢污染物品的消毒用，用含有效氯5000mg/L消毒液浸泡30min以上

5含氯消毒剂适用范围：适用与玻璃器皿、物体表面、环境地面、墙762)擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用擦拭法消毒。

3)喷洒法：对一般污染的表面，1000mg/L的消毒液均匀喷洒，作用30min以上;对细菌芽孢污染物品的消毒用，用含有效氯5000mg/L消毒液均匀喷洒，作用60min以上

4)干粉消毒法：对排泄物的消毒，用含氯消毒剂干粉加入排泄物中，使含有效氯10000mg/L，略加搅拌后作用2－6h；对医院污水的消毒，用干粉按有效氯50mg/L用量加入污水，并搅拌均匀，作用2h后，测定余氯大于6.5mg/L即可排放2)擦拭法：对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的物品用擦拭法77注意事项：

1）粉剂应于阴凉处避光、防潮、密封保存；水剂应于阴凉处避光、密封保存。所需溶液应现配现用。

2）配置漂白粉等粉剂溶液时，应戴口罩，橡胶手套。

3）未加防锈剂的含氯消毒剂对金属有腐蚀性，不应用于金属物品的消毒，加防锈剂的含氯消毒剂对金属物品消毒后，应用净水冲洗干净，并擦干后使用。注意事项：784）对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒

5）用于餐具的消毒后，应及时用净水冲洗

6）消毒时，若存在大量有机物时，应提高使用浓度或延长作用时间。

7）用于污水消毒时，应根据污水中还原性物质的含量适当增加浓度。4）对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒796碘伏适用范围：适用于手、皮肤、粘膜等的消毒使用方法：

1）浸泡法：对皮肤的浸泡消毒，卫生洗手消毒用含有效碘500mg/L的消毒液浸泡2min。

2）擦拭法：对手、皮肤和粘膜用擦拭法消毒。消毒时，用浸有有效碘2500－5000mg/L碘伏消毒液的无菌棉球擦拭待消毒部位。消毒液局部擦拭2遍，共作用2min。

3）冲洗法：对伤口、创面、粘膜的消毒，用有效碘含量为2500mg/L的消毒液冲洗，作用3－5min6碘伏适用范围：适用于手、皮肤、粘膜等的消毒80注意事项：

1）碘伏应于阴凉处避光、防潮、密封保存。

2）碘伏对二价金属制品有腐蚀性，不应做相应金属制品的消毒

3）消毒时，若存在有机物，应增加消毒剂浓度或延长消毒时间。

4）避免与拮抗药物同用。注意事项：817、乙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等使用方法：

1）浸泡法：将待消毒物品放于装有乙醇溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用75％的乙醇溶液浸泡10min以上。

2）擦拭法：对皮肤、仪器外物体表面的消毒，用75％的乙醇擦拭7、乙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等82注意事项：

1）乙醇易燃，忌明火，需置冷及通风处保存。

2）必须用医用乙醇，严禁使用工业乙醇消毒和作为原材料配置消毒剂。

3）用于手和皮肤消毒时，对酒精过敏者慎用

4）乙醇能破坏用胶镶嵌的仪器镜头，可使橡胶及某些塑料管在延长使用或重复使用后变硬膨胀，故用乙醇消毒仪器应注意。注意事项：838异丙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等使用方法：

1）浸泡法：将待消毒物品放于装有异丙醇溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用60％的异丙醇溶液浸泡10min以上。

2）擦拭法：对皮肤、仪器外物体表面的消毒，用用60％的异丙醇擦拭8异丙醇适用范围：适用于皮肤、环境表面及医疗器械的消毒等84注意事项：

1）异丙醇易燃，忌明火，需置冷及通风处保存。

2）用于手和皮肤消毒时，对醇类过敏者慎用

4）醇能破坏用胶镶嵌的仪器镜头，可使橡胶及某些塑料管在延长使用或重复使用后变硬膨胀，故用于消毒仪器应注意。注意事项：859氯己定适用范围：适用于手、皮肤消毒和粘膜消毒使用方法：

1）擦拭法：对手、皮肤的消毒。消毒时，用5000mg/L醋酸氯己定－乙醇（70％）溶液涂擦2遍，共作用1min；对伤口创面消毒，用5000mg/L醋酸氯己定水溶液涂擦创面2－3遍，作用2min。

2）冲洗法：粘膜、创面的消毒，用500－1000mg/L醋酸氯己定水溶液冲洗，至冲洗液变清为止。9氯己定适用范围：适用于手、皮肤消毒和粘膜消毒86注意事项：

1）勿与肥皂、洗衣粉等阴离子表面活性剂混合使用或前后使用

2）冲洗消毒时，若创面脓液太多，应延长冲洗时间。注意事项：87环氧乙烷气体灭菌适用范围：主要适用于忌湿、忌热物品的灭菌，如：精密仪器、塑料制品、纸张、书籍、记录纸、毛皮制品等。使用方法;1)大型环氧乙烷灭菌器（5m3以上）适用于大件物品、精密仪器和大量的物品的灭菌。用药量：0.8－1.2kg/m3，温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。

环氧乙烷气体灭菌适用范围：主要适用于忌湿、忌热物品的灭菌，如882)中型环氧乙烷灭菌器（1—5m3）适用于一次性卫生用品和精密仪器的灭菌。用药量：800-1000mg/L；消毒450mg/L。温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。

3）小型环氧乙烷灭菌器（<1m3）适用于小型精密仪器、病例、纸张、信件的灭菌。用药量：800-1000mg/L。温度55-60℃，相对湿度60％-80％，作用6h。2)中型环氧乙烷灭菌器（1—5m3）适用于一次性卫生用品和89注意事项

1）环氧乙烷钢瓶存放于无火源、无转动马达、无日晒、通风好、温度低于40℃的地方。

2）吸取或分装液态环氧乙烷时，须先将容器用冰水冷却。操作人员应戴防毒口罩，若不慎将液体落于皮肤黏膜上，必须立即用水冲洗半分钟。

注意事项903）投药及开钢瓶时不能用力过猛，以免药液喷出。

4）经常检查环氧乙烷泄漏情况。可用含10％酚酞的饱和硫代硫酸钠溶液浸泡湿滤纸，贴于疑漏气处，如滤纸变红，即证明有环氧乙烷泄漏，应立即进行处理。

5）热水加热环氧乙烷容器时，必须先打开阀门；移出热水后，才能关闭阀门。

6）灭菌后的物品，放入解析器内清除残留环氧乙烷。

7）环氧乙烷遇水后形成有毒的乙二醇。故不可用用于食品的消毒灭菌。3）投药及开钢瓶时不能用力过猛，以免药液喷出。91二物理灭菌方法1、压力蒸汽灭菌适用范围：适用于耐高温、高湿度医疗器械的实验器材物品的灭菌，预真空和脉动真空式压力蒸汽灭菌器适用于多孔性物品的灭菌，但不适用于液体的灭菌。注意事项

1）操作和日常维护人员应经培训合格

2）预防性的维护程序应包括：由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。二物理灭菌方法1、压力蒸汽灭菌923）应用饱和蒸汽，且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这些物质可能污染正在灭菌的物品。

4）物品应放在空气能够排出，又良好热渗透性的容器；灭菌器柜腔装载要松散，便于蒸汽可以均匀作用于装载物。

5）无互锁装置的高压灭菌器，应关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下再开门，开门时应戴适当的手套和面罩防护

6）高压灭菌液体时，取出的液体可能因过热而沸腾，应采用慢排式设置。3）应用饱和蒸汽，且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这937）高压灭菌效果监测时，化学指示卡和电热偶计应置于每件物品的中心，最好在“最大”装载时监测，以确定灭菌程序是否恰当。预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器应定期进行B-D测试，监测其排气效果。

8）灭菌器的排水过滤器应当每天拆下清洗

9）应保证安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。7）高压灭菌效果监测时，化学指示卡和电热偶计应置于每件物942、干热灭菌焚烧法和干烤法为主前者适用于可能具有传染性的可燃性废弃物的处理，后者适用于耐高温的实验室用品的消毒和灭菌，灭菌条件150℃，2.5h或160℃，2h或170℃，1h或180℃，30min干烤灭菌时注意的问题

1）物品干烤前应洗净，以防附着的污物炭化。

2）玻璃器皿干烤前应完全干燥，灭菌时勿于烤箱底、壁直接接触，灭菌后温度降至40℃再开箱，以防炸裂。

3）包装不宜过大，安放物品不能超过箱体内高度的2/3，物品间应留有空隙，粉剂和油脂的厚度不得超过1.3cm。2、干热灭菌953、紫外线消毒适用范围：凡被微生物污染的表面和空气均可采用紫外线消毒注意事项

1）物表消毒照射剂量：繁殖体不低于10000uw.s/cm2

芽孢不低于100000uw.s/cm2

真菌孢子不低于600000uw.s/cm22）紫外线灯表面保持清洁

3）温度低于20℃高于40℃，相对湿度大于60％时，适当延长照射时间3、紫外线消毒964）不得使紫外线光源直接照射到人体。

5）使用高臭氧紫外线消毒柜和臭氧消毒柜，应安放于通风良好的环境中，防止臭氧泄漏中毒。

6）普通型或低臭氧型直管紫外灯（30w）新灯管的辐照度值在灯管下方垂直1m的中心处，应≥90uw.s/cm2

使用中的，应≥70uw.s/cm2，低于此值应与更换。4）不得使紫外线光源直接照射到人体。974、HEPA过滤

1）空气经HEPA滤器过滤，更新后，可在实验室内再循环使用

2）HEPA滤器消毒可用福尔马林熏蒸，或过氧乙酸喷雾消毒

3）卸载后用医用废物塑料袋包装后送焚烧。4、HEPA过滤985、电力辐照灭菌适用范围：可用于一次性医疗卫生用品，移植物，食品，药品，纸制品的消毒和灭菌。注意事项：

1）电力辐射对人体有很大的伤害，甚至可至人死亡，因此操作人员要特别注意防护，严格执行操作规程。

2）电力辐射对一些物品有破坏作用，可使棉织品和塑料制品的强度降低，药品失效，食品失去香味，玻璃变暗，在处理时对此应加以考虑。5、电力辐照灭菌99实验室消毒灭菌的应用一般原则

1）及时消毒

2）彻底消毒

3）有效消毒

4）消毒灭菌前应进行预清洁

5）避免二次污染

6）减少对人体的伤害，对物品的破坏，对环境的污染实验室消毒灭菌的应用一般原则100一、一般工作场所消毒空气消毒：一般可加强开窗，自然通风换气，可能时采用排气扇人工机械通风，做到每小时换气10－15次。也可用紫外线照射，在天花板上距离地面2.5m处吊装低臭氧紫外线灯及向上反射的灯罩，或装在墙壁上，反射罩斜向上方，使紫外线照射在与水平面成30－800角左右范围内，不宜直接，以免对人、试剂及标本危害。每立方米空间不少于1.5W，上午下午各照射一次，每次不少于45min.当有可能产生微生物气溶胶时，应随时照射并延长照射时间，清洁区每天开窗通风数次即可。一、一般工作场所消毒空气消毒：一般可加强开窗，自然通风换气，101表面消毒：

1）桌（台）椅等表面每天工作前用湿抹布抹擦1次，地面用湿拖把拖擦1次，禁用干抹干扫，工作完成后，用250－500mg/L有效氯溶液、0.1％－0.2％过氧乙酸溶液或2％碱性戊二醛溶液抹擦1次，作用30－60min,对地面所用消毒剂浓度或消毒时间应比消毒台面者加倍，铺于工作面的纸张，工作后烧毁，布或塑料薄膜浸入消毒液内或用压力蒸汽消毒，各种表面也可用便携式高强度紫外线消毒器距表面不高于3cm，缓慢移动照射表面1s以上。表面消毒：1022）若被明显污染，应立即用1000－2000mg/L有效氯或02.－0.5％过氧乙酸溶液洒于污染表面，并使消毒液浸没污染物，保持30－60min，再用抹布或拖把拖擦干净，该拖把或抹布浸于上述消毒液1h或煮沸30min3）抹布和拖把等清洁工具应各室专用，特别是污染区和情节区不能混用，，用后清洗干净晾干，最好放阳光下曝晒，清洁区每天湿抹湿擦表面1次，每周用消毒液消毒1次即可。2）若被明显污染，应立即用1000－2000mg/L有效103二、一般器材消毒金属器材：穿刺取血针或针头应用压力蒸汽灭菌，做到一人一份一灭菌，用完消毒后毁弃，接种环类可用酒精灯灼烧灭菌，但当环上有较多物品，尤其是液体时注意避免爆裂或溅泼。较大的金属器材或有锋刃的刀剪受污染后不宜灼烧灭菌，可煮沸10－30min或浸入2％碱性或中性戊二醛或8％甲醛乙醇溶液180min后，清洗、沥干，必要灭菌时再干热或压力蒸汽灭菌。二、一般器材消毒金属器材：104玻璃器材：

1）采标本的器材如玻片、吸管、玻瓶要做到一人一份一消毒，凡曾受污染的吸管、试管、滴管、离心管、玻片、玻棒、波瓶、平皿等应立即浸入1％洗涤剂中或0.5％肥皂液中煮沸15－30min，也可浸入洗涤消毒液中数小时，再洗清沥干；曾装过蛋白质较多的液体如血液、血清、唾液、胃液等，在煮沸前应用水冲洗，此冲洗液另行煮沸消毒，接种培养过的琼脂平皿应单独煮沸，趁热将琼脂倒弃，再刷洗和灭菌。玻璃器材：1052）刷洗后，用于生化检验或免疫学检验者，可浸泡于重铬酸钾－浓硫酸清洁液内，24小时后彻底冲洗干净，最后再用蒸馏水冲洗三遍，沥干、烘干后再用。

3）用于微生物检验者，吸管一端应塞少量棉花，再用牛皮纸包好，不宜用报纸包，140℃,3h或160℃,2h；170℃,1h灭菌，待冷至80℃才能开烤箱门，若箱内易燃品冒烟或出现焦唯，应立即切断电源并关闭出气孔，切勿开启箱门，以免供氧导致燃烧，也可用压力蒸汽121℃，105.4kpa灭菌15－30min，吸管宜直放，空试管和空瓶口应朝下，且不能完全密闭，带螺旋帽的管瓶应旋松，玻璃容器塞子和容器间放一纸条，灭菌后再塞紧。2）刷洗后，用于生化检验或免疫学检验者，可浸泡于重铬酸106塑料制品：

1）一次性使用的塑料制品如薄膜手套、无纺布帽子、工作衣、口罩等，用后放污物袋内中烧毁。

2）耐热塑料用0.5％－1.0％肥皂液或洗涤剂中煮沸15－30min，洗涤后，压力争气灭菌。

3）不耐热塑料用0.5％过氧乙酸或1000mg/L有效氯溶液浸泡30－60min，再洗净晾干，若要求灭菌再用环氧乙烷在消毒柜内灭菌，800mg/L，于54±2℃，相对湿度60％±10％下作用4－6h，或在丁基橡胶布袋中1500mg/L，大于20℃下作用4h；若为薄膜或板状物品，也可用便携式高强度紫外线灯照射1－3s。

4）一般血清学反应用过的塑料板可直接浸入1％盐酸2h以上或过夜塑料制品：107橡胶制品：橡胶制品如手套、吸液管（球）受污染后可用0.5％－1.0％肥皂液或洗涤剂溶液中煮沸15－30min，煮时吸液管（球）内应充满液体而无气泡，全部浸没液内，清洗后晾干，必要时再用压力蒸汽115℃，70kpa灭菌15min.橡胶制品：108纺织品：棉制工作服、帽子、口罩、鞋套等一般放专用污物袋内，送洗衣房清洗，每周两次；有明显污染随时喷洒2％碱性或中心戊二醛溶液作用30－60min或压力蒸汽121℃,104.5kpa，15－30min.纺织品：109贵重仪器：

1）贵重仪器不宜加热，不能用消毒剂浸泡，局部轻度污染时，可用2％碱性或中性戊二醛溶液或1％氯已定乙醇溶液擦拭；污染严重或传染性强时，半小时后重复擦拭1－2次。

2）若离心时，离心管未密闭，试管破裂、液体外溢，离心机内部也应2％碱性或中性戊二醛反复擦拭，或整机用环氧乙烷在54±2℃,相对湿度60％±10%下，用800mg/L于消毒柜或袋内消毒4－6h贵重仪器：