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无菌试验用培养基的适用性检查标准操作规程无菌试验用培养基的适用性检查标准操作规程无菌试验用培养基的适用性检查标准操作规程资料仅供参考文件编号：2022年4月无菌试验用培养基的适用性检查标准操作规程版本号：A修改号：1页次：1.0审核：批准:发布日期：无菌试验用培养基的适用性检查标准操作规程1菌种试验用菌株多少传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。检定菌种类菌种号检定菌种类菌种号金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】枯草芽胞杆菌【CMCC（B）63501】铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】生孢梭菌【CMCC（B）64941】白色念珠菌【CMCC（F）98001】黑曲霉【CMCC（F）98003】2菌液制备金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物接种至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，生孢梭菌的新鲜培养物接种至硫乙醇酸盐流体培养基中，于30～35℃培养18～24小时；上述培养物用无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。白色念珠菌白色念珠菌的新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖液体培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上，于20～25℃培养24～48小时。上述培养物用无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。黑曲霉黑曲霉的新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖琼脂培养基上，于20～25℃培养5～7天。加入3~5ml含%（ml/ml）聚山梨酯80的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含%（ml/ml）聚山梨酯80的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。备注：菌悬液若在室温下放置，应在2小时内使用，若保存在2~8℃可在24小时内使用；黑曲霉的孢子悬液可保存在2～8℃，在验证过的储存期内使用。3无菌试验用培养基的适用性检查具体方法培养基名称胰酪大豆胨液体培养基硫乙醇酸盐流体培养基培养温度20~25℃30~35℃无菌性检查每批培养基随机取不少于5支(瓶)，置各培养基规定的温度培养14天，应无菌生长。灵敏度检查试验用菌株枯草芽胞杆菌、白色念珠菌、黑曲霉金黄葡萄球菌、铜绿假单孢菌、生孢梭菌培养基装量9ml/管12ml/管培养时间5天3天接种方法分别接种各试验用菌悬液于该培养基（2支）中，接种量小于100cfu；另1支

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