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文档简介
分析化学实验
药物分析教研室
维生素B12注射液
鉴别、检查和含量测定
P91实验十四1、维生素B12主要来源是动物性食物,存在于动物肝脏、牛肉、猪肉、蛋、牛奶和奶酪中;2、在吸收时需与钙结合才能有利于人体的机能活动;3、维生素B12能促进红血球的形成和再生,防止贫血;4、促进儿童发育;能使脂肪、碳水化合物、蛋白质适宜地为体内所利用。5、主要用于治疗恶性贫血,与叶酸合用治疗因抗叶酸药、脂肪泻等引起的巨幼红细胞性贫血。也用于多发性神经炎、肝炎、肝硬化、白细胞减少症等的辅助治疗,目前疗效有争议。口服维生素B12仅用于已证实维生素B12吸收正常的营养性维生素B12缺乏。一、实验目的:1、掌握Uvmini-1240型的使用方法。2、掌握维生素B12注射液的紫外分光光度法鉴别及含量测定。3、掌握吸收系数法定量测定的计算公式。4、熟悉绘制吸收曲线的一般方法。
二、主要仪器与试药维生素B12注射液、维生素B12对照品Mini-1240型紫外-可见分光光度仪、石英比色皿、50ml容量瓶,5ml吸量管精密仪器,小心!三、实验准备1.用标示量0.5mg/ml维生素B12配制贮备液(样品):吸量管精密量取2.5ml于50ml容量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液(约25μg/ml)。2.25μg/ml对照品溶液(实验室提供)
四、实验内容实验原理:维生素B12分子结构中有共轭体系,具有紫外吸收,故可采用紫外分光光度法鉴别和测定含量。实验步骤:1、取B12贮备液(约25μg/ml),以蒸馏水做空白液做光谱图(粗扫描),在278nm,361nm,550nm处有吸收峰。2、精测:在以上278nm,361nm,550nm波长分别±1范围内测定吸光度(每转换一次波长以水做空白)记录各最大吸收值。五、实验结果鉴别:维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰:278nm、361nm、550nm。检查:A361/A278
应为1.70-1.88,A361/A550应为3.15-3.45。含量测定:
吸收系数法:利用上述361nm处测定得到的吸收度,按其吸收系数E1%1cm=207计算含量及标示量百分含量。六、思考题如果取注射液水2ml稀释30倍,在361
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