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文档简介

细菌数量测定---标准平板计数法

一、实训目的1、掌握菌液稀释的方法和步骤。2、掌握浇混接种的操作步骤。3、掌握菌落计数的原理与方法

平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即代表原样品中的一个单细胞。二、实训原理三、实训仪器和材料1、仪器：恒温培养箱。高压蒸汽灭菌锅，电热套、托盘天平吸量管、烧杯、三角瓶、培养皿、试管、试管架、酒精灯

2试剂：大肠杆菌悬液、牛肉膏蛋白胨培养基（营养琼脂培养基），生理盐水、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水

四、实训步骤（一）培养基配制与灭菌1.生理盐水：180mL/2组

→分16支

（9mL/支）→加塞包扎灭菌2.营养琼脂培养基：330mL/2组

→加热煮沸→溶解→调pH=7.2±0.2

→分4个→加塞包扎灭菌(二)仪器包扎（每组用量）

培养皿7套1mL吸量管7支，包扎灭菌（三）菌液稀释1、编号

（1）无菌平皿7套，分别标记为10-4、10-5、10-6各2套，留一平皿做空白对照。2、标记

(2）6支盛9mL生理盐水的灭菌试管一次标记为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6检验结果活菌落数/mL=同一稀释度2个平皿上的菌落平均数×稀释倍数×5稀释度10-410-51

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