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文档简介
组织胚胎学绪论人卫演示文稿第一页,共二十九页。(优选)组织胚胎学绪论人卫第二页,共二十九页。细胞:是机体形态结构与功能的基本单位。组织:由细胞和细胞间质(又称细胞外基质)
组成的群体结构,是构成机体器官的基本成分。器官:具有一定的形态结构,并执行特定的生理功能。系统:由一些结构连续、功能相关的器官组合而成,完成连续的生理活动。细胞-组织-器官-系统第三页,共二十九页。人体器官分类-组织学特征实质性器官中空性中央:大空腔表面:被模如:消化腺、淋巴器官、内分泌腺、肾脏等。如:心血管、消化管、呼吸道等内部:实质-行使功能管壁:分3‒4层第四页,共二十九页。组织学结构观察组织学结构光镜结构-用光学显微镜观察的结构(LM)(lightmicroscope,LM简称光镜)电镜结构-电子显微镜下观察的结构(EM)(electronmicroscope,EM简称电镜)又称超微结构(ultrastructure)
第五页,共二十九页。二、组织学的研究方法和常用技术
(一)光学显微镜技术
1、常用组织切片标本制备技术
石蜡切片术①取材和固定;②脱水和包埋;③切片和染色;④封片。其他;火棉胶包埋,冰冻切片,
涂片,铺片,磨片等
第六页,共二十九页。
苏木精
伊红
碱性染料酸性染料
染成红色
(嗜酸性)细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体
细胞质细胞间质成份
染成蓝色(嗜碱性)常用染色方法:HE染色(Hematoxylin)(Eosin)HE染色第七页,共二十九页。嗜碱性:可使细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体等结构染成蓝紫色。嗜酸性:可使多数细胞的细胞质染成粉红色。中性:与两种染液亲合力都不强。组织结构的嗜色性嗜碱性嗜酸性第八页,共二十九页。
A嗜银性B嗜铬性C异染性其它染色方法第九页,共二十九页。普通光学显微镜是观察组织细胞微细结构最常用的工具,分为光学部分机械部分起放大作用光镜的分辨率约为0.2µm可放大1500倍左右(lightmicroscope,LM)第十页,共二十九页。几种特殊显微镜术
(1)相差显微镜
(phasecontrastmicroscope)用于观察生活细胞和末经染色细胞的形态结构。
神经干细胞培养第十一页,共二十九页。(2)
荧光显微镜(fluorescencemicrscope)
是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布。
神经球第十二页,共二十九页。
(二)
共焦激光扫描显微镜
共焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope,CLSM)
由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机图象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建三维图像,进行体视学分析;测定细胞内pH、钙浓度等;更精确地检测、识别,组织细胞的微细结构及其变化。CLSM又称细胞CT。CLSM第十三页,共二十九页。CLSM图像HumanneuronalprecursorcellsCLSM海马MR、GR共存第十四页,共二十九页。
(三)电子显微镜技术
(electronmicroscope,EM)
透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)
观察细胞内部结构分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万-几十万倍扫描电镜(scanningelectronmicroscope,SEM)
观察组织或细胞表面的立体结构冰冻蚀刻(freezeetchingmethod)观察细胞断裂表面形态结构分析电镜X–射线显微分析术(X–raymicroanalysis)研究细胞、组织内元素种类分布和含量第十五页,共二十九页。透射电镜与照片TEM淋巴细胞第十六页,共二十九页。扫描电镜与照片SEMSEM1.纤毛2.微绒毛第十七页,共二十九页。冰冻蚀刻细胞
冷冻断裂肾小球右下线粒体
冰冻蚀刻照片第十八页,共二十九页。分析电镜-X线微区分析图片分析电镜X线微区分析第十九页,共二十九页。糖类显示法-PAS反应:过碘酸—希夫反应(periodicacidSchiffreaction,PAS):检测组织或细胞中有无多糖存在。
原理:多糖PA氧化醛Schiff试剂紫红色沉淀(四)组织化学和细胞化学技术
PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在
PAS阳性小肠上皮第二十页,共二十九页。组织细胞化学染色图片酶细胞化学神经元ACP酶阳性
脂类显示法
苏丹Ⅲ
脂类显示法
苏丹Ⅲ
锇酸
髓鞘染色
核酸显示法第二十一页,共二十九页。
利用抗原(antigen,Ag),抗体(antibody)特异结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。免疫细胞化学原理第二十二页,共二十九页。免疫细胞化学标记物第二十三页,共二十九页。免疫细胞化学-PAP法第二十四页,共二十九页。免疫细胞化学-ABC法第二十五页,共二十九页。(五)免疫组织化学与细胞化学技术免疫组织化学术(immunohistochemistry)是将免疫学原理与组织化学技术相结合建立的新技术,根据抗原与抗体特异性结合的特点,检测组织细胞内某种多肽、蛋白质等大分子物质的存在与分布。
人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TM阳性第二十六页,共二十九页。(六)原位杂交术原位杂交(insituhybridization)是一种敏感性高、特异性强的,能在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术。常用的标记物有两种:1、放射性同位素,如3H、14C、
32P、35S、125I,2、为非放射性物质,如地高辛等。
非放射性原位杂交海马GAP-43mRNA第二十七页,共二十九页。(七)放射自显影术放射自显影术(autoradiograph)旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路
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