抗心磷脂抗体的检测与临床意义课件

抗心磷脂抗体的检测

与临床意义时景伟2014-04-02抗心磷脂抗体的检测

与临床意义时景伟2014-04-021提纲1什么是抗心磷脂抗体2抗心磷脂抗体的检测方法3抗心磷脂抗体的临床意义

（抗磷脂综合征）提纲1什么是抗心磷脂抗体2什么是抗心磷脂抗体？第一分部什么是抗心磷脂抗体？第一分部3抗心磷脂抗体的定义抗心磷脂抗体（anticardiolipin，aCL）是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。常见于系统性红斑狼疮（SLE）及其他自身免疫性疾病。该抗体与血栓形成、血小板减少、习惯性流产或宫内死胎关系密切。1.自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体；2.人体有完整的自身免疫耐受机制的维持；3.自身免疫反应，产生自身抗体；4.正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体。抗心磷脂抗体的定义抗心磷脂抗体（anticardiolipi4*狼疮抗凝物（Lupusanticoagulants，LA）*抗心磷脂抗体（Anticardiolipinantibodies，aCL)

*抗2-糖蛋白I抗体（Anti-2-glycoprotein-Iantibodies，

a-2-GPI)抗磷脂抗体*狼疮抗凝物抗磷脂抗体5抗磷脂抗体抗心磷脂抗体抗磷脂抗体抗心磷脂抗体6*抗心磷脂抗体(aCL)

属于IgG/IgM型的自身抗体，通常使用ELISA方法测定，其中IgG被认为与血栓形成和习惯性流产有很强的相关性。抗心磷脂抗体

*抗心磷脂抗体(aCL)

属于IgG/Ig7抗心磷脂是pangborn1941年从牛的心肌中分离出来的一种具有抗原性的磷脂，并加以命名抗心磷脂抗体的免疫学分型有IgG和IgA和IgM三类，其发生率男女无明显差异。抗心磷脂抗体

抗心磷脂是pangborn1941年从牛的心8

研究证实，许多因素与aCL产生密切相关，常见的原因有：（1）自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮（SLE)、类风湿性关节炎（RA）、硬皮病等；（2）病毒感染：如腺病毒、风疹病毒、水痘病毒、腮腺炎病毒等感染；（3）其它疾病：如支原体系统疾病等；（4）口服某些药物：如氯丙嗪、吩噻嗪等；（5）少数无明显器质性疾病的正常人，特别是老年人。抗心磷脂抗体

研究证实，许多因素与aCL产生密切相关，常见的原因有：抗心9抗心磷脂综合征与aCL抗磷脂综合征（anti-phospholipidsyndrome,APS）是指由抗磷脂抗体（APL抗体）引起的一组临床征象的总称，主要表现为血栓形成，习惯性流产，血小板减少等。在同一患者可仅有上述一种表现，也可同时有多种表现。APS是一种自身免疫性疾病，目前公认的诊断标准是病人具有下列临床特点之一：全身各脏器动、静脉血栓：复发性流产；胎儿死亡以及由于胎儿宫内窘迫提前分娩致新生儿死亡；自身免疫性血小板减少，上述临床表现同时伴有病人血清中出现抗心磷脂抗体（aCL）和/或狼疮凝血因子（LA）。在临床上由于抗心磷脂抗体的特异性更强，与上述临床表现关系更密切，因而也称为抗心磷脂综合征（anti-cardiolipinsyndrome,ACS)。抗心磷脂综合征与aCL抗磷脂综合征（anti-phospho10第一部分小结抗心磷脂抗体（aCL）①自身抗体②抗磷脂抗体③与一些疾病相关抗磷脂综合征抗心磷脂综合征≈第一部分小结抗心磷脂抗体（aCL）①自身抗体②抗磷脂抗体③与11抗心磷脂抗体的检测第二部分抗心磷脂抗体的检测第二部分12方法学标准化检测采用ELISA法，分为IgG、IgM和IgA型方法学标准化检测采用ELISA法，分为IgG、IgM和IgA13检测流程血清1:201倍稀释酶结合物1:10倍稀释取100微升稀释后血清加入反应孔温浴30min洗板3次加入稀释后的酶结合物100微升温浴30min洗板3次加入TMB底物液100微升避光温浴15min加入终止液100微升酶标仪450nm波长读取吸光度值绘制标准曲线，报结果检测流程血清1:201倍稀释取100微升稀释后血清加入反应孔14注意事项1.样本：血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆2.酶结合物使用前需混匀，稀释后需在4小时内使用3.所有试剂使用前需在室温（18-25℃）平衡30min4.底物液对光敏感，需避光显色注意事项1.样本：血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆15结果判读结果判读16结果判读半定量：按照以下公式将对照血清或患者样本的吸光度值比上标准品2的吸光度值，通过比值半定量估计结果。比值＝对照或患者样本的吸光度值标准品2的吸光度值欧蒙建议按照以下原则解释结果：比值＜1.0阴性比值≥1.0阳性结果判读半定量：按照以下公式将对照血清或患者样本的吸光度值比17结果判读定量检测：分别以3份标准血清浓度和其吸光度为横、纵坐标，以点对点的方式绘制标准曲线，根据标准曲线求出患者血清中的抗体浓度。欧蒙建议对结果做如下解释：＜12阴性≥12阳性结果判读定量检测：分别以3份标准血清浓度和其吸光度为横、纵坐18结果判读关于单位：心磷脂抗体IgA/G/MRU/ml心磷脂抗体IgMPL-IgM-U/ml心磷脂抗体IgGPL-IgG-U/ml心磷脂抗体IgAPL-IgA-U/ml相对单位百分位经亲和层析从标准血清纯化得到1微克/ml抗心磷脂IgA抗体结合心磷脂的活性结果判读关于单位：相对单位经亲和层析从标准血清纯化得到1微克19抗心磷脂抗体的临床意义第三部分抗心磷脂抗体的临床意义第三部分20所有发生自发性静脉血栓病变者对于小于50岁的人群或没有其他明显危险因素的老年人，发生中风或者外周动脉栓塞事件者SLE或其他自身免疫疾病并发血栓病变者反复流产或伴有早产的妊娠并发症的患者不明原因的血小板减少患者aPL实验室检测的适应症所有发生自发性静脉血栓病变者aPL实验室检测的适应症21

动静脉均可形成血栓，尤以静脉血栓居多。静脉血栓发生率70%，动脉血栓30%，动静脉血栓5%。静脉血栓以下肢深静脉血栓为最多见。其他还有多种脏器、组织内血栓形成。1.血栓形成临床表现动静脉均可形成血栓，尤以静脉血栓居多。静脉血栓发生22静脉血栓多累积下肢深静脉（水肿）、肾脏、肝脏、视网膜动脉血栓多累积脑部（脑卒中）、上下肢（缺血性坏疽）、肾脏、肠系膜、冠状动脉（心肌梗死）静脉血栓多累积下肢深静脉（水肿）、肾脏、肝脏、视网膜23动、静脉血栓*aPL抗体与血栓之间有显著的统计学相关性*Love和Santoro对SLE发生血栓栓塞性意外的综合报道动、静脉血栓*aPL抗体与血栓之间有显著的统计学相关性24

胎盘血管的血栓形成导致胎盘功能不全，可引起宫内发育迟滞、反复流产。其发生率可达10%-25%，一般发生在妊娠10周以后。在第34周或之前还可发生先兆子痫或妊高症以及严重的胎盘功能不足所致的早产。2.产科表现临床表现胎盘血管的血栓形成导致胎盘功能不全，可引起宫内发育迟253.血液系统表现：

血小板减少有25%~50%的病例出现，但程度较轻，常在90x109/L以上，机制尚不清楚

溶血性贫血临床表现3.血液系统表现：临床表现264.APS相关肾病

肾动脉血栓/狭窄、肾脏缺血坏死、肾性高血压、深静脉血栓、微血管闭塞性肾病和相关的终末期肾病统称为APS相关肾病临床表现4.APS相关肾病临床表现274.其他类型的APS

网状青斑（80%）

心脏瓣膜病变（晚期）

神经精神症状——偏头痛、舞蹈病、癫痫、

格林巴利综合症等

缺血性骨坏死（少见）临床表现4.其他类型的APS临床表现28抗心磷脂抗体的检测与临床意义课件29抗心磷脂抗体的检测与临床意义课件30在抗磷脂抗体检测结果的判读上，应该与临床资料相结合，同时要考量其他致栓风险因子的存在。在诊断、风险预测以及疾病预后的判断方面，多种血清学标记物的联合检测是一种合理有效的方法。发现与疾病致病机制密切相关而且具有更高特异性的血清学标记物是未来抗磷脂抗体检测的发展方向。抗磷脂抗体的检测对预防血栓性疾病，降低心血管疾病风险具有重要的临床意义。结语在抗磷脂抗体检测结果的判读上，应该与临床资料相结合，同时要考31抗心磷脂抗体的检测与临床意义课件32抗心磷脂抗体的检测

与临床意义时景伟2014-04-02抗心磷脂抗体的检测

与临床意义时景伟2014-04-0233提纲1什么是抗心磷脂抗体2抗心磷脂抗体的检测方法3抗心磷脂抗体的临床意义

（抗磷脂综合征）提纲1什么是抗心磷脂抗体34什么是抗心磷脂抗体？第一分部什么是抗心磷脂抗体？第一分部35抗心磷脂抗体的定义抗心磷脂抗体（anticardiolipin，aCL）是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。常见于系统性红斑狼疮（SLE）及其他自身免疫性疾病。该抗体与血栓形成、血小板减少、习惯性流产或宫内死胎关系密切。1.自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体；2.人体有完整的自身免疫耐受机制的维持；3.自身免疫反应，产生自身抗体；4.正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体。抗心磷脂抗体的定义抗心磷脂抗体（anticardiolipi36*狼疮抗凝物（Lupusanticoagulants，LA）*抗心磷脂抗体（Anticardiolipinantibodies，aCL)

*抗2-糖蛋白I抗体（Anti-2-glycoprotein-Iantibodies，

a-2-GPI)抗磷脂抗体*狼疮抗凝物抗磷脂抗体37抗磷脂抗体抗心磷脂抗体抗磷脂抗体抗心磷脂抗体38*抗心磷脂抗体(aCL)

属于IgG/IgM型的自身抗体，通常使用ELISA方法测定，其中IgG被认为与血栓形成和习惯性流产有很强的相关性。抗心磷脂抗体

*抗心磷脂抗体(aCL)

属于IgG/Ig39抗心磷脂是pangborn1941年从牛的心肌中分离出来的一种具有抗原性的磷脂，并加以命名抗心磷脂抗体的免疫学分型有IgG和IgA和IgM三类，其发生率男女无明显差异。抗心磷脂抗体

抗心磷脂是pangborn1941年从牛的心40

研究证实，许多因素与aCL产生密切相关，常见的原因有：（1）自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮（SLE)、类风湿性关节炎（RA）、硬皮病等；（2）病毒感染：如腺病毒、风疹病毒、水痘病毒、腮腺炎病毒等感染；（3）其它疾病：如支原体系统疾病等；（4）口服某些药物：如氯丙嗪、吩噻嗪等；（5）少数无明显器质性疾病的正常人，特别是老年人。抗心磷脂抗体

研究证实，许多因素与aCL产生密切相关，常见的原因有：抗心41抗心磷脂综合征与aCL抗磷脂综合征（anti-phospholipidsyndrome,APS）是指由抗磷脂抗体（APL抗体）引起的一组临床征象的总称，主要表现为血栓形成，习惯性流产，血小板减少等。在同一患者可仅有上述一种表现，也可同时有多种表现。APS是一种自身免疫性疾病，目前公认的诊断标准是病人具有下列临床特点之一：全身各脏器动、静脉血栓：复发性流产；胎儿死亡以及由于胎儿宫内窘迫提前分娩致新生儿死亡；自身免疫性血小板减少，上述临床表现同时伴有病人血清中出现抗心磷脂抗体（aCL）和/或狼疮凝血因子（LA）。在临床上由于抗心磷脂抗体的特异性更强，与上述临床表现关系更密切，因而也称为抗心磷脂综合征（anti-cardiolipinsyndrome,ACS)。抗心磷脂综合征与aCL抗磷脂综合征（anti-phospho42第一部分小结抗心磷脂抗体（aCL）①自身抗体②抗磷脂抗体③与一些疾病相关抗磷脂综合征抗心磷脂综合征≈第一部分小结抗心磷脂抗体（aCL）①自身抗体②抗磷脂抗体③与43抗心磷脂抗体的检测第二部分抗心磷脂抗体的检测第二部分44方法学标准化检测采用ELISA法，分为IgG、IgM和IgA型方法学标准化检测采用ELISA法，分为IgG、IgM和IgA45检测流程血清1:201倍稀释酶结合物1:10倍稀释取100微升稀释后血清加入反应孔温浴30min洗板3次加入稀释后的酶结合物100微升温浴30min洗板3次加入TMB底物液100微升避光温浴15min加入终止液100微升酶标仪450nm波长读取吸光度值绘制标准曲线，报结果检测流程血清1:201倍稀释取100微升稀释后血清加入反应孔46注意事项1.样本：血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆2.酶结合物使用前需混匀，稀释后需在4小时内使用3.所有试剂使用前需在室温（18-25℃）平衡30min4.底物液对光敏感，需避光显色注意事项1.样本：血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆47结果判读结果判读48结果判读半定量：按照以下公式将对照血清或患者样本的吸光度值比上标准品2的吸光度值，通过比值半定量估计结果。比值＝对照或患者样本的吸光度值标准品2的吸光度值欧蒙建议按照以下原则解释结果：比值＜1.0阴性比值≥1.0阳性结果判读半定量：按照以下公式将对照血清或患者样本的吸光度值比49结果判读定量检测：分别以3份标准血清浓度和其吸光度为横、纵坐标，以点对点的方式绘制标准曲线，根据标准曲线求出患者血清中的抗体浓度。欧蒙建议对结果做如下解释：＜12阴性≥12阳性结果判读定量检测：分别以3份标准血清浓度和其吸光度为横、纵坐50结果判读关于单位：心磷脂抗体IgA/G/MRU/ml心磷脂抗体IgMPL-IgM-U/ml心磷脂抗体IgGPL-IgG-U/ml心磷脂抗体IgAPL-IgA-U/ml相对单位百分位经亲和层析从标准血清纯化得到1微克/ml抗心磷脂IgA抗体结合心磷脂的活性结果判读关于单位：相对单位经亲和层析从标准血清纯化得到1微克51抗心磷脂抗体的临床意义第三部分抗心磷脂抗体的临床意义第三部分52所有发生自发性静脉血栓病变者对于小于50岁的人群或没有其他明显危险因素的老年人，发生中风或者外周动脉栓塞事件者SLE或其他自身免疫疾病并发血栓病变者反复流产或伴有早产的妊娠并发症的患者不明原因的血小板减少患者aPL实验室检测的适应症所有发生自发性静脉血栓病变者aPL实验室检测的适应症53

动静脉均可形成血栓，尤以静脉血栓居多。静脉血栓发生率70%，动脉血栓30%，动静脉血栓5%。静脉血栓以下肢深静脉血栓为最多见。其他还有多种脏器、组织内血栓形成。1.血栓形成临床表现动静脉均可形成血栓，尤以静脉血栓居多。静脉血栓发生54静脉血栓多累积下肢深静脉（水肿）、肾脏、肝脏、视网膜动脉血栓多累积脑部（脑卒中）、上下肢（缺血性坏疽）、肾脏、肠系膜、冠状动脉（心肌梗死）静脉血栓多累积下肢深静脉（水肿）、肾脏、肝脏、视网膜55动、静脉血栓*aPL抗体与血栓之间有显著的统计学相关性*Love和Santoro对SLE发生血栓栓塞性意外的综合报道动、静脉血栓*aPL抗体与血栓之间有显著的统计学相关性56