实验二 显微镜油镜的使用、细菌形态观察及大小测定课件

实验二油镜的使用、细菌形态的观察及微生物大小测定1目的要求1.1学习并掌握油镜的原理和使用方法1.2学习观察细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌、葡萄球菌、链球菌、霍乱弧菌)的形态特征。1.3掌握微生物大小的测定方法。2实验原理2.1油镜的工作原理2.1.1增加照明亮度2.1.2增加显微镜的分辩率2.2微生物大小测定原理3实验器材显微镜、擦镜纸、细菌教学片、目镜测微尺、镜台测微尺4、操作步骤4.1细菌的形态观察4.1.1观察前的准备（1）显微镜的安置（2）光源的调节（3）调节双筒显微镜的目镜（4）聚光器数值孔径值的调节4.1.2显微观察（1）低倍镜观察（2）高倍镜观察（3）油镜观察4.2微生物大小的测定4.2.1装目镜测微尺把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，旋上目镜透镜。4.2.2目镜测微尺的校正

把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5＝10μm注意事项：观察时光线不宜过强,否则难以找到镜台测微尺的刻度;换高倍镜和油镜校正时,务必十分小心,防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。1.测微尺的校正（标定）：两重合线间镜台测微尺格数Ⅹ10目镜测微尺每格长度(μm)=

两重合线间目镜测微尺格数2．细菌菌大小的测定：取细菌装片，用高倍镜测出宽和长各占目镜测微尺的格数，再将测到的格数乘以目镜测微尺（用高倍镜时标定的）每格所代表的长度，即为细菌的实际大小。大肠杆菌：大肠杆菌（Escherichiacoli，E.coli）革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。大肠杆菌（E.coli）为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。破伤风梭菌枯草芽孢杆菌芽孢枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。炭疽杆菌菌体粗大，两端平截或凹陷，是致病菌中最大的细菌。排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，本菌在氧气充足，温度适宜（25～30℃）的条件下易形成芽胞。在活体或未经解剖的尸体内，则不能形成芽胞。芽胞呈椭圆形，位于菌体中央，其宽度小于菌体的宽度。在人和动物体内能形成荚膜，在含血清和碳酸氢钠的培养基中，孵育于CO2环境下，也能形成荚膜。形成荚膜是毒性特征。炭疽杆菌（普通平板）

链球菌(Streptococcus)是化脓性球菌的另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部，引起各种化脓性炎症，猩红热，丹毒，新生儿败血症，脑膜炎，产褥热以及链球菌变态反应性疾病等。球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。幼龄培养物大多可见到透明质酸形成的荚膜。无芽胞，无鞭毛，革兰氏染色阳性。