血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件

血细胞镜检规则的制定和应用

北京和睦家医院孙芾

血细胞镜检规则的制定和应用

1制定规则的目的保证血细胞检查结果准确性提供正确的细胞形态学信息提高工作效率为临床诊断提供依据为临床治疗方案提供依据制定规则的目的保证血细胞检查结果准确性2血细胞显微镜检查的重要性目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细胞、红细胞和血小板分析，仪器不仅提供细胞的常规计数和计算结果，同时还可得到白细胞三项或五项分类结果，大大提高了工作效率。由于人体细胞的多样性和复杂性，仪器仅依靠分析细胞体积、电导性、光闪射等物理特性很难提供准确的分类结果。因此血细胞显微镜检查仍然是必不可少的分析手段。血细胞显微镜检查的重要性目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细3影响细胞计数准确性的因素

电阻抗细胞计数原理影响细胞计数准确性的因素

电阻抗细胞计数原理4白细胞分类计数计算方法示意图

白细胞分类计数计算方法示意图5有核红细胞或疟原虫干扰

有核红细胞或疟原虫干扰6血小板聚集干扰

不完全溶解的红细胞干扰

血小板聚集干扰

不完全溶解的红细胞干扰7血小板聚集

血小板聚集8影响分类准确性的因素InjectorTipVCS

FocusedlaserbeamSheathfluidPurdueUniversityCytometryLaboratories影响分类准确性的因素InjectorVCSFocu9血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件10血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件11血细胞显微镜检查标准制定方法根据自己实验室所用的血细胞计数仪测定出的结果制定出显微镜检查的标准，以保证每个结果的准确性。血细胞显微镜检查标准制定方法根据自己实验室所用的血细胞计数仪12制定规则需考虑的因素和指标1．有无白细胞自动分类结果无结果必须进行显微镜检查且要给出白细胞形态和分类计数结果2．白细胞总数上限和下限WBC<2.5x109/L,>25.0x109/L制定规则需考虑的因素和指标1．有无白细胞自动分类结果13制定规则需考虑的因素和指标3．白细胞自动分类各种白细胞百分比的上限与下限五分类：Mono>15%,Eos>15%,Baso>3%,Lym>60%(成 人）或Lym>80％（儿童），Neu>85%三分类：Mono>10%,Lym>60%(成人）或Lym>80％（儿童），Neu>85%4.

仪器分析结果是否有如下提示：大血小板、血小板聚集、小红细胞/红细胞碎片、有核红细胞、异形淋巴、未成熟粒细胞/杆状核粒细胞和幼稚细胞等。计数结果后有星号提示（查看是否有有核红细胞）血小板后有星号提示（查看是否有凝块）制定规则需考虑的因素和指标3．白细胞自动分类各种白细胞百分比14制定规则需考虑的因素和指标5．血红蛋白、MCV、RDW

Hb<70g/L，MCV或RDW严重异常6.血小板数量减少PLT<80x109/L，确定假性血小板减少7.同一病人近日白细胞总数的变化情况3天内WBC总数差>5.0x109/L制定规则需考虑的因素和指标5．血红蛋白、MCV、RDW15制定规则需考虑的因素和指标8．同一病人上一次分类计数的时间24小时内不必再次计数8．医生申请或特殊病人群体（新生儿）9．各种病人的特点化疗放疗孕妇制定规则需考虑的因素和指标8．同一病人上一次分类计数的时间16血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件17血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件18血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件19血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件20血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件21血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件22

AtypicalLymphocyteAtypicalLymphocyte23血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件24血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件25血细胞显微镜检查包括：白细胞分析和分类计数包括：分类计数的白细胞数量、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、分叶核粒细胞、杆状核粒细胞、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞、原幼细胞、异形淋巴细胞、中毒颗粒和空泡变性等。红细胞形态大红细胞、有核红细胞、靶形红细胞、椭圆形红细胞、小红细胞、镰状红细胞、球形红细胞、裂红细胞、泪滴形红细胞、低色素、高色素、红细胞大小不等、嗜碱性点彩、多色素、豪-周氏小体、异形红细胞等。血小板形态和数量估计小血小板、大血小板、血小板聚集、血小板数量评估等其它异常：寄生虫等。血细胞显微镜检查包括：白细胞分析和分类计数26显微镜复检方法和注意事项：

1．良好的涂片和染色2．合适的读片位置：红细胞相接排列但很少重叠3．红细胞形态分析显微镜复检方法和注意事项：

1．良好的涂片和染色27油镜读片位置油镜读片位置28

红细胞形态红细胞形态29显微镜复检方法和注意事项：4．白细胞分析白细胞数量评估WBC4.0-7.0x109/L:2-4白细胞/hpf(x40)WBC7.0-10.0x109/L:4-6白细胞/hpf(x40)WBC10.0-13.0x109/L:6-10白细胞/hpf(x40)WBC13.0-18.0x109/L:10-12白细胞/hpf(x40)分类计数的白细胞数量 WBC1.0x109/L-30.0x109/L:计数100个白细胞WBC>30.0x109/L:计数200个白细胞WBC0.5x109/L-1.0x109/L:每1.0x109/L计数10白细胞WBC<0.5x109/L:不进行显微镜计数显微镜复检方法和注意事项：4．白细胞分析30显微镜检查方法和注意事项：5．血小板形态分析和数量判断，有无凝聚1个血小板/油镜读片视野10x109/L如果数量判断结果与仪器计数结果差距较大，需复检仪器结果或进行血小板人工显微镜计数血小板计数减低，显微镜见聚集存在时，需要重新采集标本测定。标本持续凝集，要用枸橼酸钠抗凝重新测定。6．疑难血片和特殊病例应请上级主管复查显微镜检查方法和注意事项：5．血小板形态分析和数量判断，有无31大血小板大血小板32血细胞显微镜检查报告方式白细胞形态分析和分类计数形态和白细胞总数正常不报告分类计数结果，注明白细胞正常形态或白细胞总数异常报告分类计数结果及形态红细胞形态未见异常异常时注明何种异常如小细胞、低色素、大细胞、疟原虫等血小板形态和数量有无血小板聚集大或小血小板增多估计数量与实际数量相差较多时，报手工计数结果血细胞显微镜检查报告方式白细胞形态分析和分类计数33量体裁衣根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应得到临床医生的认可。各医院检验科需根据自己的实际情况来制定自己的标准草案，与临床有关人员讨论后做出决定。量体裁衣根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应34血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件35复检规则应用效果评价和睦家医院对MAXM检测的9992份结果进行了统计分析：仪器结果正常不需复检：7062份，阴性率70.7%复检标本2930份，占29.3%其中镜检异常942份，占32.2%总体真阳性率9.4%总体假阳性率19.9%复检规则应用效果评价和睦家医院对MAXM检测的9992份结果36复检原因分析复检原因 数量 比率__________________________________________________________仪器白细胞分类计数异常 1444 49％其它异常提示 527 18％医生要求分类计数 462 16％新生儿标本 289 9.9％ 血小板减低 92 3.1％ 白细胞计数异常 72 2.5％ 血红蛋白异常 24 0.8％ 无仪器分类计数结果 20 0.7％论文已发表:中华检验医学杂志2005，第二期155页复检原因分析37国际联合小组提出的复检规则成员来自6个国家的17个实验室，仪器包括BeckmanCoulter,Sysmex,Bayer,Advia,Abbott生产的多种型号血细胞分析仪论文已发表：TheinternationalConsensusGroupforHematologyReview:SuggestedCriteriaforActionFollowingAutomatedCBCandWBCDifferentialAnalysis.LaboratoryHematology,2005,11:83-90规则有41条，在15个实验室进行了评估国际联合小组提出的复检规则成员来自6个国家的17个实验室，仪38国际联合小组复检筛查规则简介指标 处理方法（基于初次或随诊检测）______________________________________________________________________________新生儿 浏览血片WBC:<4.0或>30.0 浏览血片PLT:<100或<1000 浏览血片HGB:<70g/L或>200g/L 浏览血片，注意细胞形态MCV:<75或>105fl 浏览血片，注意细胞形态MCHC:<30或>38 浏览血片，注意细胞形态RDW:22 浏览血片，注意细胞形态无白细胞分类结果 浏览血片，手工分类中性粒细胞值：<1.0或>20.0 浏览血片淋病细胞值：>5.0（成人） 浏览血片单核细胞值：>1.5（成人） 浏览血片嗜酸细胞值：>2.0 浏览血片嗜碱细胞值：>0.5 浏览血片异常提示 浏览血片,注意提示内容国际联合小组复检筛查规则简介指标 处理方法（基于初次39评价结果共检测13298份病人标本真阳性率11.2%假阳性率18.6%真阴性率67.3%假阴性率2.9%各实验室评价结果接近评价结果共检测13298份病人标本40讨论和建议临床实验室忽视显微镜复检，将仪器结果直接发出，造成漏检。检验科必须根据自己医院和所用仪器的特点制定出血细胞复检规则。向临床医生宣传该规则，加强配合，提高工作效率利用实验室信息系统、血细胞分析仪提示功能，保证复检规则正确应用。讨论和建议临床实验室忽视显微镜复检，将仪器结果直接发出，造成41谢谢大家谢谢大家42

血细胞镜检规则的制定和应用

北京和睦家医院孙芾

血细胞镜检规则的制定和应用

43制定规则的目的保证血细胞检查结果准确性提供正确的细胞形态学信息提高工作效率为临床诊断提供依据为临床治疗方案提供依据制定规则的目的保证血细胞检查结果准确性44血细胞显微镜检查的重要性目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细胞、红细胞和血小板分析，仪器不仅提供细胞的常规计数和计算结果，同时还可得到白细胞三项或五项分类结果，大大提高了工作效率。由于人体细胞的多样性和复杂性，仪器仅依靠分析细胞体积、电导性、光闪射等物理特性很难提供准确的分类结果。因此血细胞显微镜检查仍然是必不可少的分析手段。血细胞显微镜检查的重要性目前普遍采用自动血细胞分析仪进行白细45影响细胞计数准确性的因素

电阻抗细胞计数原理影响细胞计数准确性的因素

电阻抗细胞计数原理46白细胞分类计数计算方法示意图

白细胞分类计数计算方法示意图47有核红细胞或疟原虫干扰

有核红细胞或疟原虫干扰48血小板聚集干扰

不完全溶解的红细胞干扰

血小板聚集干扰

不完全溶解的红细胞干扰49血小板聚集

血小板聚集50影响分类准确性的因素InjectorTipVCS

FocusedlaserbeamSheathfluidPurdueUniversityCytometryLaboratories影响分类准确性的因素InjectorVCSFocu51血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件52血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件53血细胞显微镜检查标准制定方法根据自己实验室所用的血细胞计数仪测定出的结果制定出显微镜检查的标准，以保证每个结果的准确性。血细胞显微镜检查标准制定方法根据自己实验室所用的血细胞计数仪54制定规则需考虑的因素和指标1．有无白细胞自动分类结果无结果必须进行显微镜检查且要给出白细胞形态和分类计数结果2．白细胞总数上限和下限WBC<2.5x109/L,>25.0x109/L制定规则需考虑的因素和指标1．有无白细胞自动分类结果55制定规则需考虑的因素和指标3．白细胞自动分类各种白细胞百分比的上限与下限五分类：Mono>15%,Eos>15%,Baso>3%,Lym>60%(成 人）或Lym>80％（儿童），Neu>85%三分类：Mono>10%,Lym>60%(成人）或Lym>80％（儿童），Neu>85%4.

仪器分析结果是否有如下提示：大血小板、血小板聚集、小红细胞/红细胞碎片、有核红细胞、异形淋巴、未成熟粒细胞/杆状核粒细胞和幼稚细胞等。计数结果后有星号提示（查看是否有有核红细胞）血小板后有星号提示（查看是否有凝块）制定规则需考虑的因素和指标3．白细胞自动分类各种白细胞百分比56制定规则需考虑的因素和指标5．血红蛋白、MCV、RDW

Hb<70g/L，MCV或RDW严重异常6.血小板数量减少PLT<80x109/L，确定假性血小板减少7.同一病人近日白细胞总数的变化情况3天内WBC总数差>5.0x109/L制定规则需考虑的因素和指标5．血红蛋白、MCV、RDW57制定规则需考虑的因素和指标8．同一病人上一次分类计数的时间24小时内不必再次计数8．医生申请或特殊病人群体（新生儿）9．各种病人的特点化疗放疗孕妇制定规则需考虑的因素和指标8．同一病人上一次分类计数的时间58血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件59血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件60血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件61血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件62血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件63血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件64

AtypicalLymphocyteAtypicalLymphocyte65血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件66血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件67血细胞显微镜检查包括：白细胞分析和分类计数包括：分类计数的白细胞数量、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、分叶核粒细胞、杆状核粒细胞、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞、原幼细胞、异形淋巴细胞、中毒颗粒和空泡变性等。红细胞形态大红细胞、有核红细胞、靶形红细胞、椭圆形红细胞、小红细胞、镰状红细胞、球形红细胞、裂红细胞、泪滴形红细胞、低色素、高色素、红细胞大小不等、嗜碱性点彩、多色素、豪-周氏小体、异形红细胞等。血小板形态和数量估计小血小板、大血小板、血小板聚集、血小板数量评估等其它异常：寄生虫等。血细胞显微镜检查包括：白细胞分析和分类计数68显微镜复检方法和注意事项：

1．良好的涂片和染色2．合适的读片位置：红细胞相接排列但很少重叠3．红细胞形态分析显微镜复检方法和注意事项：

1．良好的涂片和染色69油镜读片位置油镜读片位置70

红细胞形态红细胞形态71显微镜复检方法和注意事项：4．白细胞分析白细胞数量评估WBC4.0-7.0x109/L:2-4白细胞/hpf(x40)WBC7.0-10.0x109/L:4-6白细胞/hpf(x40)WBC10.0-13.0x109/L:6-10白细胞/hpf(x40)WBC13.0-18.0x109/L:10-12白细胞/hpf(x40)分类计数的白细胞数量 WBC1.0x109/L-30.0x109/L:计数100个白细胞WBC>30.0x109/L:计数200个白细胞WBC0.5x109/L-1.0x109/L:每1.0x109/L计数10白细胞WBC<0.5x109/L:不进行显微镜计数显微镜复检方法和注意事项：4．白细胞分析72显微镜检查方法和注意事项：5．血小板形态分析和数量判断，有无凝聚1个血小板/油镜读片视野10x109/L如果数量判断结果与仪器计数结果差距较大，需复检仪器结果或进行血小板人工显微镜计数血小板计数减低，显微镜见聚集存在时，需要重新采集标本测定。标本持续凝集，要用枸橼酸钠抗凝重新测定。6．疑难血片和特殊病例应请上级主管复查显微镜检查方法和注意事项：5．血小板形态分析和数量判断，有无73大血小板大血小板74血细胞显微镜检查报告方式白细胞形态分析和分类计数形态和白细胞总数正常不报告分类计数结果，注明白细胞正常形态或白细胞总数异常报告分类计数结果及形态红细胞形态未见异常异常时注明何种异常如小细胞、低色素、大细胞、疟原虫等血小板形态和数量有无血小板聚集大或小血小板增多估计数量与实际数量相差较多时，报手工计数结果血细胞显微镜检查报告方式白细胞形态分析和分类计数75量体裁衣根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应得到临床医生的认可。各医院检验科需根据自己的实际情况来制定自己的标准草案，与临床有关人员讨论后做出决定。量体裁衣根据自己医院的特点制定了血细胞显微镜检查的规则，并应76血细胞镜检规则的制定和应用(孙芾)课件77复检规则应用效果评价和睦家医院对MAXM检测的9992份结果进行了统计分析：仪器结果正常不需复检：7062份，阴性率70.7%复检标本2930份，占29.3%其中镜检异常942份，占32.2%总体真阳性率9.4%总体假阳性率19.9%复检规则应用效果评价和睦家医院对MAXM检测的9992份结果78复检原因分析复检原因 数量 比率__________________________________________________________仪器白细胞分类计数异常 1444 49％其它异常提示 527 18％医生要求分类计数 462 16％新生儿标本 289 9.9％ 血小板减低 92 3.1％ 白细胞计数异常 72 2.5％ 血红蛋白异常 24 0.8％ 无仪器分类计数结果 20 0.7％论文已发表:中华检验医学杂志2005，第二期155页复检原因分析79国际联合小组提出的复检规则成员来自6个国家的17个实验室，仪器包括BeckmanCoulter,Sysmex,Bayer,Advia,Abbott生产的多种型号血细胞分析仪论文已发表：TheinternationalConsensu