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文档简介
尿液蛋白质检查(jiǎnchá)第一页,共十九页。一、尿液微量白蛋白的测定(cèdìng)健康人的尿液白蛋白一般(yībān)小于20mg/L,大于30mg/L时即提示异常。定义:微量白蛋白是指尿中白蛋白含量超过(chāoguò)健康人水平,但常规尿蛋白试验为阴性的低浓度白蛋白。检测方法:染料结合法、放射免疫分析、酶联免疫吸附、免疫比浊分析、胶体金纸片第二页,共十九页。报告(bàogào)方式:定时留尿法(μg/ml;mg/24h)
晨尿法(mg/L)
随机留尿法(mg/mmolCr;mg/gCr)国际上以尿白蛋白排泄(páixiè)率>20mg/L
或尿总蛋白>30mg/24h作为尿微量白蛋白的临界值。第三页,共十九页。临床意义:尿微量白蛋白在糖尿病肾病(shènbìnɡ)中的应用尿微量白蛋白在心血管疾病(jíbìng)中的应用尿微量白蛋白在炎症(yánzhèng)方面的应用其他第四页,共十九页。二、Bence-Jonesprotein:
实质(shízhì)是免疫球蛋白轻链或其聚合物,单聚体分子量为2.3万。凝溶蛋白:pH4.5~5.5,56℃条件加热出现白色混浊(hùnzhuó)及凝固,100℃煮沸以后混浊消失或明显减退,再冷却时又可重新凝固。蛋白电泳时可在α2至γ球蛋白区带间的某个部位(bùwèi)出现M区带。第五页,共十九页。检测方法:对甲苯磺酸沉淀筛选(shāixuǎn)实验:灵敏度3mg/L热沉淀法验证(yànzhèng)乙酸纤维素膜电泳(diànyǒnɡ)或者聚丙烯酰胺凝胶电泳(diànyǒnɡ):M带免疫固定电泳:区带电泳分离蛋白后,立即将浸有特异抗L链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋白带的位置上,使之产生抗原抗体的复合物反应。免疫扩散实验:用特异的L链血清进行免疫扩散实验。临床意义:多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症第六页,共十九页。三、β2-microglobulin性质:一种(yīzhǒnɡ)低分子量的蛋白质(1.18万),是细胞膜上完整组织相溶性抗原HLA的一部分。检测方法:放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)参考值:血β2-M<3.0mg/L尿β2-
M<0.2mg/L临床意义:肾小管疾病、血清β2-M异常增高第七页,共十九页。四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢(dàixiè)产物检查1.hemoglobin正常人血浆中游离(yóulí)血红蛋白与珠蛋白结合,以复合物的形式运转至单核-巨噬细胞系统被代谢,不能从尿液中排出。疾病时尿液中血红蛋白有两个来源:1.发生血管内溶血,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中排出。2.尿路(尤其是上尿路)出血,红细胞在低渗或者高渗的环境下破坏逸出的血红蛋白。第八页,共十九页。检测方法:试纸法:利用血红蛋白中亚铁血红素具有类过氧化物酶作用(zuòyòng),在邻联甲苯胺等供氢体存在下,使过氧化物还原为水,而邻联甲苯胺被氧化成有色物质。
免疫测定方法:利用抗人血红蛋白单克隆抗体临床意义:
血管内溶血(rónɡxuè)泌尿道出血第九页,共十九页。2.myoglobin肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素的蛋白质,分子量小,易通过肾小球。
测定方法:纸片法:原理与血红蛋白测定类似。肌红蛋白能溶于0.8饱和度的硫酸铵溶液中免疫(miǎnyì)法:利用单克隆抗体ELISA、第十页,共十九页。3.hemosiderin当发生血管内溶血时,大部分血红蛋白随尿排出,其中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收(xīshōu)后在肾小管上皮细胞内分解形成血铁黄素,再随细胞脱落至尿中排出。检测方法:Prussian反应,当尿中含有铁血黄素时,其中高铁离子(lízǐ)与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下,产生蓝色的亚铁氰化钾沉淀。
注意事项:1.避免(bìmiǎn)铁污染;2.清晨第一次尿阳性率较高
临床意义:血管内溶血、行进性血红蛋白尿。第十一页,共十九页。4.porphyrinδ-氨基酮戊酸、卟胆原尿卟啉粪卟啉原卟啉+Fe血红素卟啉尿是指尿中排出过多(ɡuòduō)的卟啉或者其前体测定方法:酸萃取后,紫外线进行检测临床意义:先天性卟啉病、肝性卟啉病
第十二页,共十九页。五、Tamm—Horsfall
proteinTH蛋白由Henle袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔基复合体产生(chǎnshēng),是一种肾特异性蛋白质。是构成管型的一种重要蛋白。
检测方法:酶联免疫吸附法、放射免疫法
临床意义:协助诊断上尿路疾患有助于泌尿系统结石形成机制的研究。第十三页,共十九页。六、尿液酶测定(cèdìng)尿液酶的来源:血液的酶:淀粉酶、溶菌酶肾实质(shízhì)的酶:肾小管刷状缘(γ-GT、AAP、LAP、ALP、α-GLU)、溶菌体(NAG、ACP、β-葡萄糖醛酸苷酶)、胞浆(LDH)及线粒体(AST)尿路及生殖系统的酶:前列腺(ACP、NAG)、精液(LDH、hyaluronicacid)、肿瘤细胞第十四页,共十九页。尿液酶测定时尿液标本的处理方法:尿液通常为弱酸性,且蛋白质浓度较低,不利于尿酶活力的保存,因此必须(bìxū)及时测定和处理。大部分尿酶活性比血浆酶活性低,在测定时适当加大标本用量或延长酶作用时间。尿液中含有较高浓度的低分子物质,如尿素、尿酸、肌酐、硫酸盐、磷酸盐等,他们可能是某些酶的抑制剂,因此必须对尿液标本进行预处理:超滤法、透析法、凝胶过滤法第十五页,共十九页。1.N-乙酰-β-D-氨基(ānjī)葡萄糖苷酶(N-acetyl-β–D-glucosaminidase,NAG)NAG是一种位于溶酶体内的酸性水解酶,存在于所有组织中,以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。临床应用:各种肾脏疾病:急慢性肾功能不全、肾病综合症肾移植排斥反应:早期诊断药物性肾损害:其他系统疾病:糖尿病肾病、高血压肾病第十六页,共十九页。2.α-葡萄糖苷酶(α-glucosdiase,
α-GLU)α-GLU主要(zhǔyào)存在于肾小管上皮细胞刷状缘,在血清中的含量极低,且分子量大(9万),不易通过肾小球,因而尿中的α-GLU主要来自肾小管上皮细胞。测定:用麦芽糖做底物,经α-GLU的水解作用生成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。临床意义:肾小管损伤的敏感指标第十七页,共十九页。3.谷氨酰转移酶(γ-glutamyltransferase,γ-GT)γ-GT广泛存在于人体各组织中,以肾、肝、胰等组织含量(hánliàng)最高。尿中γ-GT浓度较高,原尿无需预先浓缩。用γ-谷氨酰对硝基苯胺做底物,测定游历的对硝基苯胺量。临床意义:
γ-GT常作为药物性肾损害的诊断指标。γ-GT在急性肾炎、肾盂肾炎、肾结石时升高γ-GT在慢性肾衰、肾癌时降低。第十八页,共十九页。内容(nèirón
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