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文档简介
课题3
分解纤维素的微生物的分离1、纤维素
纤维素是一种多糖。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素,其中,棉花是纤维素含量最高的植物。纤维素2、微生物分解纤维素的原因
土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解成葡萄糖后再利用。纤维素酶
纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种组分:C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维素酶分解纤维素的实验1.取两支试管甲和乙,各加入一张滤纸条(纤维素);2.各加入醋酸—醋酸钠缓冲液11ml和10ml;3.在乙试管中加入1ml纤维素酶4.两只试管固定在锥形瓶中,震荡反应;5.结果:乙试管的滤纸条消失实验组对照组纤维素酶分解菌的筛选刚果红染色法
刚果红与纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。纤维素分解菌思考:筛选高效目的菌的方法?透明圈越大,分解力越强。
㈠.土壤取样
选择纤维素丰富的环境取样,如腐殖土。因为富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对多。㈡.选择培养先用纤维素分解菌的选择培养基(P29页)培养,
目的:实验设计增加纤维素分解菌的浓度。讨论1.这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何选择的?2.你能否设计一个对照试验,说明选择培养的作用?3.为什么选择培养基能够“浓缩”所需的微生物?
纤维素为唯一碳源,只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。
可以将纤维素换成葡萄糖。
在选择培养的条件下,可以让能够适应这种营养条件的微生物迅速繁殖,而不适应的就会被抑制。[三]梯度稀释
将选择培养后的培养基进行稀释101—106倍。[四]涂布培养
将稀释度为104—106倍的菌悬液各取0.1ml涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基(P29页)上,倒置培养。[五]挑选透明圈
用刚果红染色法,挑选产生透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。
方法一:先——————————,再加入刚果红进行颜色反应。
方法二:在———————时就加入刚果红。培养微生物倒平板染色法优点缺点方法一颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐;加入刚果红会使菌落间发生混杂。方法二操作简便;不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈;有些微生物能降解色素形成透明圈。两种染色法比较课题延伸
为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行—————————————实验,纤维素分解菌的发酵方法有—————发酵和———发酵。
纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的——————含量进行定量测定。发酵产纤维素酶液体固体葡萄糖比较项目分解尿素的细菌纤维素分解菌选择培养基原理培养基类型目的鉴别培养基比较项目分解尿素的细菌纤维素分解菌选择培养基原理尿素为唯一氮源,只有能分解尿素的微生物才能生活。纤维素为唯一碳源,只有能分解纤维素的微生物才能生活。培养基类型固体培养基液体培养基目的筛选菌株选择培养鉴别培养基原理现象方法比较项目分解尿素的细菌纤维素分解菌选择培养基原理尿素为唯一氮源,只有能分解尿素的微生物才能生活。纤维素为唯一碳源,只有能分解纤维素的微生物才能生活。培养基类型固体培养基液体培养基目的筛选菌株选择培养鉴别培养基原理细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨,氨使培养基的碱性增强,加入酚红指示剂变红。刚果红与纤维素形成红色复合物,培养基中会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。现象观察菌落周围是否出现红色环带观察菌落周围是否出现透明圈方法
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