兔实验技术操作

兔实验技术操作兔实验技术操作兔实验技术操作资料仅供参考文件编号：2022年4月兔实验技术操作版本号：A修改号：1页次：1.0审核：批准:发布日期：一、兔的抓取及保定1.准备的物品、器械：固定器2.简要：（1）徒手抓取（2）保定3.解说操作：徒手抓取用一只手将颈部的被毛和皮肤一起抓住提起，另一只手托住臀部。（如图1）。也可一手抓住兔肩胛部的皮肤，另一手托住其臀部并将兔的头部放置于臂弯中，再用前臂支撑兔体。保定将兔放在操作台上，用一只手抓住颈背部皮肤（包括兔耳），另一只手压住腰部（或后肢）加以保定，可用于肌肉注射、灌胃等操作。将兔放在操作台上，用左手抓住颈背部皮肤，使兔下半身固定在操作者左臂下方，用右手环抱兔前肢，适用于孕兔灌胃等操作。如图2。盒式保定法：将兔放入兔保定盒内，盖上盖，使兔头露在盒外，便可进行采血或注射给药等操作。保定板保定：将兔仰卧或俯卧在保定板上，用布带保定，四肢和头部也用布带保定，即可进行心电图检查、注射给药、采血等操作。4.注意事项盖兔盒时必须要轻，不能用力压，否则兔脊椎骨很容易骨折，造成下肢瘫痪。将家兔放回兔笼时，先将臀部及后肢放入笼内。抓取时禁止抓提兔耳。抓取要稳、准、柔、快，不可过分用力抓捏腰腹部。二、兔的采血方法1.准备的物品、器械：注射器、采血管、止血带、酒精棉球、干棉球、保定架等2.简要：耳静脉采血、耳动脉采血、后肢静脉采血、心脏采血3.解说操作耳缘静脉或耳动脉采血将兔保定于保定器内，用酒精棉球擦拭消毒。助手固定兔耳，并压迫耳缘静脉根部，使血管充盈；操作者手持注射器，针头沿耳缘静脉平行刺入血管，慢慢抽取血液。助手固定兔耳，操作者手持注射器，在耳中央动脉末端，使针头沿血管平行方向刺入动脉，血液即可流入注射器内。采血完毕后立即用消毒干棉球压迫止血。后肢静脉采血

兔固定于兔保定架上，剪去胫部被毛，股部扎上止血带，使胫外侧皮下静脉充盈。固定静脉，用左手两指固定好静脉，右手取带有针头的注射器内皮下静脉平行方向刺入血管，抽一下针栓，如血进入注射器，表示针头已刺入血管，即可取血。取血后要长时间压迫止血，一般取血量为2~5mL。取完后必须用棉球压迫取血部位止血，时间要略长些，因此处不易止血。如止血不妥，可造成皮下血肿，影响连续多次取血。心脏采血将兔仰卧保定在保定台上，胸左侧心脏部位剪毛、酒精棉球或碘伏消毒。在第3、4肋间胸骨左缘3mm处穿刺，针头刺入心脏后，持针手可感觉到兔心脏有节律的跳动，血液会自然进入注射器。此时如果抽不到血，可以前后进退调节针头位置，切不可使针头在胸腔内乱探，以防刺伤兔的心、肺，可以拔出重新穿刺。采血完毕后立即用干棉球按压止血。4.注意事项采血前应充分扩张血管，可使用酒精棉球反复擦拭或使用温水扩张或用手指轻弹扩张血管。采血时应先从远心端开始进针，然后逐渐朝近心端推进，进针角度一般0~45°。采血时应注意血液流出是否顺畅，若不顺畅可用棉球沿血管轻擦，以扩张血管。采血结束后应用干棉球按压进针部位进行止血。三、兔给药方法1.准备的物品、器械：剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、酒精棉球、干棉球、生理盐水、注射器等2.简要：皮肤给药、皮下给药、肌肉给药、灌胃、静脉给药等3.解说操作皮肤给药给药前准备相关物品，包括剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、注射器等。核对动物编号及组别，抓取和保定动物。给药部位：一般选择脊柱两侧背部皮肤，试验有特别要求除外。给药前去除背部约3cm×3cm大小的被毛，注意不要损伤皮肤。取相应剂量的受试物均匀涂抹在去毛处约×大小的皮肤上，先用一层玻璃纸覆盖给药部位，再用纱布覆盖，然后用无刺激性胶布或弹性绷带固定。给药时胶布的固定的松紧程度应合理，应确保能将药物固定于兔皮肤而又不导致动物窒息。固定数小时后，除去受试物，并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位皮肤。如果实验需要破损皮肤，则在给药前，用消毒针在敷药部位皮肤划一“井”字，或用砂纸在敷药部位皮肤摩擦，以皮肤表层损伤为限。记录操作时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。如果受试物为固体/粉剂，敷药前先用适量水或其它赋形剂调成糊状，以保证药物与皮肤充分接触。经皮给药前须将动物给药部位的毛发去除干净，根据实验的要求可使用剃毛器或脱毛药品进行除毛。皮下给药注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉球等。核对动物编号及组别，抓取和保定动物。根据实验要求，可选择肩胛间的颈背部或腹部等部位皮肤注射。注射前除去被毛，再用酒精棉球消毒注射部位皮肤。抽取相应量的药液，排尽针管内的空气；操作者一手提起家兔的注射部位皮肤，使其皱折成三角体，另一手持注射器自皱折下方刺入皮下，平行进针一段距离，刺入后针头可左右摆动，表示已进入皮下，便可缓慢推注，根据试验需要进行下一只动物的给药操作。注射给药完毕，及时记录给药时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。当针头刺入皮下时应回抽注射器，避免注射入皮下血管内。注射完毕后为避免药物流出，可用干棉球按压注射部位数秒。给药量：每个注射点常用给药体积为mL/kg，每个注射点最大给药体积为kg。肌肉给药注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉球等。核对动物编号及组别，抓取和保定动物。由助手一手固定兔两前肢，另一手固定两后肢。或用固定器固定。剪去注射部位被毛，用酒精棉球消毒皮肤。抽取相应量的药液，排尽针管内的空气，一次一侧注入量≤1mL/只。股四头肌注射给药：操作者一手固定给药部位，另一手持注射器垂直刺入肌肉内，回抽无血，即可进行注射，如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新进针，避免误将药物注射入血液中。臀部肌肉注射给药：操作者一手绷紧注射部位附近皮肤，另一手持注射器与皮肤表面成约60o角刺入肌肉，针头刺入深度约1cm，如果回抽无血，即可缓慢进行注射；如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新进针。注射完毕，迅速拔出针头，用干棉球按住注射部位片刻，以防止药液漏出。记录注射时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。多次肌肉注射给药时，除试验特殊要求外，应在左右两侧后肢肌肉轮流注射。应注意避免伤及坐骨神经。如果进行局部刺激性试验，注射部位应相对固定灌胃灌胃前准备相关物品，包括注射器、导管、药液、开口器及装有清水的烧杯等。核对动物编号及组别，按SOP-T-Ad-02抓取和保定动物，使食道伸直。抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。操作者将开口器由兔嘴角插入，由前向后旋转，横放在兔子上下颌之间，固定在舌面上；将导管经开口器中央的小孔插入，慢慢沿上腭壁插入食道约15cm~18cm达胃内；插入过程要随时观察兔的反应，防止导管插入气管或盘旋于咽部；导管通过咽部时，兔会有轻微吞咽动作，但不会剧烈挣扎。将导管外口端放入清水中片刻，如水中无气泡逸出，即可套上注射器，开始缓慢注入药液，观察兔若无挣扎，可以迅速注入余下药液；如清水中有气泡逸出，表明可能插入气管内，应拔出重新插入。注完药液后，捏住导管外口，拔下注射器，抽3mL~5mL纯净水，然后重新套入导管，注入纯净水，将导管内残留的药液全部冲入胃内。药液注完后，先迅速拔出导管，然后取出开口器。记录给药相关内容，根据试验需要进行下一只动物的给药。一次给药量：最大给药体积15mL/kg。给药先从溶媒对照组开始，再从低剂量至高剂量，最后再进行市售品/阳性对照组。静脉给药注射前准备相关物品，包括保定器、注射器、注射针头或头皮针、酒精棉球、干棉球等。核对动物编号及组别，抓取和保定动物。抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。后肢小隐静脉给药：用酒精棉球消毒注射部位皮肤，左手压迫后肢注射部位上方近心端血管，使血管充盈；右手持注射器，将针头插入静脉，回抽若有回血，左手即放松，缓慢推注药液。耳缘静脉给药：用酒精棉球轻轻擦拭耳缘静脉注射部位，使静脉清晰可见；一手固定耳廓边缘部位，另一手持头皮针或注射器，针头斜面朝上，将针头由耳尖部刺入静脉，见回血后缓慢注入药液。注射进针应尽可能从耳缘静脉远心端开始，如果推注困难、滴注不畅或注射部位发白或局部组织