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文档简介
实验六血钙测定实验目的1掌握甲基麝香草酚蓝比色法测定血清钙的原理。2熟悉总钙和离子钙的关系。血钙概述钙是体内含量最多的无机盐，占体重的1.5%～2%，总量约700～1400g。99%以上的钙沉积于骨骼、牙齿。骨骼是钙的最大储备库。血钙概述细胞外钙指存在于血浆或血清等细胞外的钙，参考范围：成人：2.10~2.55mmol/L儿童:2.25~2.67mmol/L血钙概述存在形式离子钙（游离钙）占总血钙的50%,是起直接生理作用的部分,约1.12~1.34mmol/L。蛋白结合钙约40%总血钙与血浆蛋白结合,主要是结合ALB，不能透过毛细血管壁，又称非扩散结合钙可扩散结合钙约10%为与有机酸根离子结合的钙，如枸橼酸钙，磷酸钙等，可透过毛细血管壁。血钙概述血钙游离钙（50%）结合钙蛋白结合钙（40%）可扩散结合钙（10%）可扩散钙
非扩散钙血钙概述1以上三种钙处于不断交换的动态平衡中。2当pH↓→ALB的氨基酸链带正电荷↑→结合钙↓,游离钙↑。3ALB↓→结合钙部分↓,总钙↓,但游离钙可正常。钙的排泄80%经肠道，20%经肾脏。测定方法项目方法总钙测定
染料结合法、滴定法、荧光法、原子吸收分光光度法、酶法、同位素稀释质谱法等。离子钙测定
离子选择电极法测定方法注：在评价钙的生物学活性方面，以测定离子钙为佳，但从反映机体钙的总体代谢状况，总钙测定更为客观，两者不能完全相互替代。
实验原理（MTB比色法）血清中钙离子在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝(MTB)结合，生成蓝色的络合物。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，以求得血清总钙的含量。甲基麝香草酚蓝线性范围：0-3.75mmol/L（超过时，用生理盐水5或10倍稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。）单位换算：1mmol/L血清钙=4.0mg/dL试剂试剂1（显色剂）甲基麝香草酚蓝0.12mmol/L聚乙烯吡咯烷酮0.10mmol/L8-羟基喹啉13.8mmol/L浓硫酸25.5mmol/L试剂2(缓冲液)二乙胺0.72mmol/L试剂显色应用液临用前,根据样本的多少,将上述的试剂1、2两液等量混合。钙标准液浓度：2.5mmol/L计算:血清钙（mmol/L）=测定管A标准管A×2.5mmol/L临床意义血钙增高见于原发性和继发性甲状旁腺功能亢进，继发性佝偻病，软骨病，慢性肾功能衰歇。代谢性酸中毒，VitD过多。血钙降低可引起神经肌肉应激性增强发生手足抽搐。见于原发性和继发性甲状旁腺功能减退，VitD缺乏引起的佝偻病，软骨病，吸收不良性低钙血症，急性胰腺炎，新生儿低钙血症，术后等。评价4.一般来说总钙测定比离子钙更简便易行，但血浆总钙浓度明显受到总蛋白的影响，尤其是清蛋白的影响。清蛋白下降10g/L将导致总钙减少约0.25mmol/L。此时实际钙含量（mmol/L）＝钙测定量（mmol/L）－0.025血清清蛋白
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