刘海英-过敏变态反应实验室检查课件

小儿过敏变态反应疾病实验室检查与临床意义刘海英广州市妇女儿童医疗中心免疫实验室变态反应（allergy)过敏反应（anaphylaxis)超敏反应（hypersensitivity)均指机体受同一抗原物质再次刺激后产生的一种异常或病理性免疫反应。机体防御反应的一种特殊表现形式。类型过敏原抗体细胞相关介质发病部位I型食物（鱼、虾、蟹、贝类、蛋白和牛奶等）；植物花粉（法国梧桐、杨、枫柏、蔾、律草、黄篙、雪松、豕草的花粉、人及动物皮屑、动物羽毛、昆虫、真菌、寄生虫、药物（青霉素及其降解产物青霉烯酸）、屋尘和其他化学物质IgE肥大细胞嗜碱细胞嗜酸细胞组胺LTC4、D4PAFPGECP鼻咽扁桃腺支气管胃肠粘膜II型ABO血型抗原、Rh抗原被修饰过的自身抗原血细胞碎片、变性DNAIgGIgMIgA吞噬细胞K细胞中性粒细胞补体Fc受体全身III型变性IgG、肿瘤抗原病原微生物、异种血清IgGIgMIgA肥大细胞嗜碱细胞中性粒细胞补体肾脏关节IV型微生物（TB、病毒、真菌）寄生虫、组织抗原、化学物质TDTHTC淋巴因子皮肤

变态反应类型过敏原检测（一）皮内特异性诊断原理：I型或IV型变态反应适应症：速发型外源性过敏、迟发型中属于接触性过敏；应不在强烈过敏反应发作期；近期内未使用有关治疗药物；无明显的皮肤划痕征；受试皮肤没有没有湿疹、荨麻疹等皮肤损害。1、斑贴试验前臂，24-48h观察，72h报告阴性。I度：皮肤呈轻度红肿、皮疹、皮痒；II度：散在小皮疹出现、明显痒；III度：有成片的皮疹或大泡疹出现；IV度：皮肤渗出、溃疡、坏死。2、划痕试验成人前臂，儿童背心，15-20min。+：皮肤稍隆起，周边轻度红斑；++：丘疹样隆起超出划痕范围，周边明显红斑；+++：丘疹出现伪足，周边呈宽而不规则红斑；++++：丘疹出现2个以上伪足、发痒，周边红肿明显。3、点刺试验划痕试验的改良，因方法简便，近年广泛采用，尤其适用于儿童。国际标准化试剂：德国阿罗格皮肤点刺液方法：患儿前臂内侧皮肤，酒精消毒，间隔2cm,滴点刺液，5min吸去，20min后观察。结果判断变应原与组胺风团直径之比判定结果，如风团出现伪足加一级。

+1：4++1：2+++1：1++++2：1注意事项适应症、强烈反应、延长观察时间三岁以下幼儿不适合设置阴、阳对照4、皮内试验方法同青霉素皮试不同变应原，浓度不同其他注意事项、防范措施同青霉素皮试5、眼结膜试验6、鼻内激发试验7、支气管激发试验8、离子透入试验9、舌下试验10、食物激发（二）、体外特异性诊断放射变应原吸附试验（RAST）Radioallergosorbenttest

为一种检测异性IgE的固相放射免疫测定法。先将食物抗原与溴化氰活化的固相载体结合，加入待检的血清共同孵育。再经洗涤离心后，加入125I标记的抗IgE血清，与结合在变应原上的特异性IgE发生反应。孵育后再次洗涤，测定固相载体的放射活性，以其判断血清中IgE含量。变应原：纯化、标准化载体：试管法、纸片法、CAP提高灵敏度缩短试验时间增强特异性标记二抗：多克隆、单克隆显示方法：放免法、酶标法、荧光酶标法保持灵敏度、特异性，安全性提高RAST商品化检测系统：CAP、Master、DPC、PXUniCAP100荧光酶标法：T-IgE,S-IgE,ECP变应原：单价多价，几种性质相似（真菌、花粉）过筛用变应原：吸入性—Phadiatop

食物性—Fx5E标准CAP：T-IgE—羊抗人IgEECP--羊抗人ECPIgE标准品：6个浓度，WHO75/502荧光酶标二抗：β-半乳糖苷酶标记抗人IgE底物：4-甲基伞桂-β-半乳糖苷标本采集要求：

T-IgE,S-IgE:空腹静脉血3-5毫升，干燥管ECP：2-3毫升，硅化真空管（SST管）严重溶血、脂血标本不可用！荧光酶法分级S-IgE（KU/L）S-IgE水平临床意义0<0.35无或不能检出无过敏1≥0.35低可疑或轻度过敏2≥0.7较低轻度过敏3≥3.5中中度过敏4≥17.5较高中、重度过敏5≥50高重度过敏6≥100特高特重度过敏特异性IgE(S-IgE)定量结果分级标准及临床意义参考范围：T-IgE：<60KU/LECP：<15μg/L（SST管）影响因素：年龄性别种族寄生虫感染建议建立每个试验室的正常参考区间结果分析

1、T-IgE正常，S-IgE升高S-IgE

18KU/LIV级T-IgE18KU/L

结论：T-IgE高不一定是过敏，过敏者T-IgE不一定高，S-IgE检测有重要意义结果分析2、S-IgE与皮试差别区域差别：豚草—国外多，国内少

葎草—国内常见，国外少特殊物质：S-IgE对某些小分子变应原（青霉烯酸）检测灵敏度不高。S-IgE低或正常并不能排除该项过敏的可能性结果分析3、吸入性过筛试验Phadiatop包含多种吸入性变应原，阳性者分为1-6级，为多种S-IgE的总和，浓度越高，表明体内S-IgE越多。可以是某种S-IgE很高，也可能是多种变应原S-IgE累加的结果。未包括我国重要的变应原葎草花粉、蚕丝及真菌，可能会漏检只对这三种过敏的患儿。结果分析4、ECPECP反映了EOS激活的程度及其分泌毒性蛋白能力，其含量与活化EOS数目呈正相关。但是，活化的EOS并非末梢血中EOS的全部。

因而EOS计数不能代替ECP检测。实验特点