新癌胚抗原CEA方法学验证报告

癌胚抗原CEA方法学验证方法学验证的内容：正确度、精密度、线性范围的确认、临床可报告范围的验证、及参考区间的确认验证人员：王爱林马力张卫李琳一、检测系统信息项目：CEA仪器名称全自动电化学发光免疫分析仪仪器型号Cobase601试剂及厂商：罗氏诊断有限公司检测方法：双抗体夹心法二、厂商提供的相关参数需验证参数厂商参数验证结果分析灵敏度0.20ng/ml沿用厂家说明书线性范围0.200-1000ng/ml3.35-966.8ng/ml临床可报告范围0.600-50000ng/ml1.68-1063.48ng/ml参考区间0-3.4ng/ml已验证三、验证过程1、正确度：目的：评价仪器测量结果与真值的一致程度。通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评正确度验证试验数据记录表

项目名称/单位癌胚抗原(CEA)/ng/ml检测设备/编号RocheE601/103检测试剂/批号Roche试剂/162341校准品/批号Roche校准品/159181质控品/批号Roche质控品(PCTM)/158274检测方法双抗体夹心法最近一次参加的卫生部室间质评回报日期：2011-07-15样本编号我室结果靶值PT允许范围PT得分与靶值偏倚VIS允许范围VIS得分2011113.63.72.8-4.6100%-2.7--20111215.716.712.5-20.9100%-5.9820111315.816.712.5-20.9100%-5.39--2011142.72.92.2-3.6100%-6.902011155861.245.9-76.5100%-5.23--判断标准：＜1/2CV”：12.5%总误差正确度验证结果： ■满足要求 口不满足要求结论：罗氏E601免疫分析仪所检测项目CEA正确度在允许范围内统计者：李琳王爱林 统计日期：审核者： 审核日期：2精密度(Precision)批内精密度目的：考察仪器检测方法的随机误差原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到批内精密度。标本来源：高、低值标本均为混合血清结果：本室CEA批内精密度低值CV为：0.26%高值CV为：0.9%结果判断方式：依据卫生部临床检验中心室间质量评价标准的总误差（cv总误差为评判标准重复性精密度验证试验数据记录表项目名称/单位癌胚抗原（CEA）/ng/ml检测设备/编号RocheE601/103检测试剂/批号Roche试剂/162341校准品/批号Roche校准品/159181质控品/批号Roche质控品(PCTM)/158274检测方法双抗体夹心法重复性精密度数据低值样本条码号：混合样本高值样本条码号：混合样本测定次数测定结果测定次数测定结果测定次数测定结果测定次数测定结果14.52114.52151.181150.1524.50124.50253.111250.1134.51134.51351.071350.2144.52144.52452.751450.6454.50154.53548.061549.364.53164.52652.721651.2474.54174.51751.091750.19

84.50184.50852.451850.8694.51194.51948.881950.09104.53204.521049.092050.89低浓度均值：1.51 标准差：0.01 变异系数：0.26%高浓度均值：50.7 标准差：1.35 变异系数：2.7%判断标准：＜1/4CV ：6.25%总误差重复性精密度验证结果： ■满足要求 口不满足要求结论：本室所检测项目CEA低值、高值重复性精密度均在允许范围内，可接受。检测者：王爱林、李琳 检测日期：2011-07审核者： 审核日期：日间精密度：目的：考察目前实验室检测方法批间精密度原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。方法：新鲜混合血清（高值、低值）分装20份冷冻，每天取两份随标本连续测定10天，测定前定标做质控，计算CV，SD，得到日间精密度。结果：本室CEA日间精密度平均低值CV：3.6%平均高值CV：3.1%结果判断方式：依据卫生部临床检验中心室间质量评价标准的总误差（CV总误差）为评判标准日间精密度验证试验数据记录表项目名称/单位癌胚抗原（CEA）/免疫激素检测设备/编号RocheE601/103检测试剂/批号Roche试剂/162341校准品/批号Roche校准品/159181

质控品/批号Roche质控品(PCTM)/158274检测方法双抗体夹心发日间精密度数据低值样本：混合样本高值样本：混合样本测定天数测定结果测定天数测定结果测定天数测定结果测定天数测定结果11.60111.601149.411150.421.67121.672152.712151.431.65131.643152.913154.841.63141.604148.714156.951.59151.645147.615145.961.62161.596138.316146.871.60171.427149.217158.981.59181.678150.11815791.60191.669154.319155.3101.65201.7110153.520154.7低浓度均值：1.62 标准差：0.058 变异系数：3.6%高浓度均值：151.44 标准差：4.75 变异系数：3.1%判断标准：＜1/3CV限口：8.33%总误差日间精密度验证结果： ■满足要求 口不满足要求结论：本室所检测项目CEA低值、高值日间精密度均在允许范围内。检测者：王爱林、李琳 检测日期：审核者： 审核日期：3线性范围(Linearityrange,AMR)目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。标本要求：高值标本可使用病人混合血清。一般地样本的高值推荐在AMR上限的90%,低值推荐在AMR下限的10%,但这不是绝对的规则。最好有5个或以上的系列浓度的实验样品，数据点数不得低于4个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。方法：a）以50ul为一个体积单位，将高值标本与低值标本以3：1、2：2、1：3的体积比例混合，加上高低值标本共5个标本按照由低到高测定，记录结果。b）线性统计：以直接测定结果计算得出的相应浓度为X,以通过稀释测定结果为Y,回归方法学统计，得到a、b及r值。c）结果判断：若b在0.97-1.03范围内，r2>0.95,作a与0有无显著性差异的t检验，如果P>0.05,则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度。若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。线性范围验证试验数据记录表项目名称/单位癌胚抗原（CEA）/ng/ml检测设备/编号RocheE601/103检测试剂/批号Roche试剂/162341

质控品/批号Roche质控品(PCTM)/158274检测方法双抗体夹心法厂家声明线性范围：0.200-1000ng/ml,线性方程:Y=bX+a,R2>0.95样本编号配制比例测定值1测定值2测定均值预期值差值14L3.333.363.353.35023L+1H240.60240.80240.70244.213.5132L+2H486.20486.60486.40485.08-1.324L+3H736.7736.6737.7726.04-11.6654H965.80965.70966.80966.80平均斜率b1.0063校准品/批号Roche校准品/159181采用线性回归，以预期值为乂，以按比例稀释的实测均值为Y,得线性方程：Y=1.0063X-1.1618线性回归散点图:线性回归计算每一稀释度测定均值和预期值的差值。以预期值为横轴，差值为纵轴，制作线性差异图。线性差异图111 1♦,0 20040060080010001200X预期值2值1差0-1-2回归方程：y=1.0063x-1.16180.97-1.03范围内■b在0.97-1.03范围内Db不在a的P值：0.8204著性差异■a与0无显著性差异 Da与0有显R2：0.9998■R2三0.95 DR2<0.95直线回归方程是否可接受线性范围延伸：■可.接受 口不可接受在直线回归方程可接受基础上，如果验证的线性范围小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为（上限+上限*10%），验证下限扩展为（下限-下限*50%)；若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准；扩展后的线性范围：1.68-1063.48ng/ml结论：在标本状态良好无干扰的情况下，已验证CEA测定结果在3.35-966.8ng/mL范围内呈线性，进行线性范围延伸后，可使用的线性范围为1.68-1063.48ng/ml检测者：李琳王爱林 检测日期：审核者： 审核日期：临床可报告范围(Clinicalreportablerange,CRR)目的：分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数，从而确保高值样本报告的准确性。原理：未经过任何处理的病人检验标本，通过检测系统检测得到的可靠结果范围。方法；本实验室制定的CEA的临床可报告范围结合临床的需求，其检出限范围已能满足临床，因此将检出限范围作为临床可报告范围。1结论：低于低检出限的值报告＜0.200ng/ml超过高检出限的值报告＞1000ng/ml。(见临床咨询记录)分析灵敏度(AnalyticalSensitivity):直接引用罗氏试剂说明书上提供的分析灵敏度：0.600U/ml6干扰物质干扰物质对本项目的影响大小沿用厂商参数，详细内容见本项目作业指导书。7参考区间(Referenceintervals):目的：选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。原理：收集20例正常健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立参考范围。验证范围：0-3.4ng/ml方法：CEA标本的要求体检合格健康的筛选者（见调查表）脂血、溶血均勿用结果：统计方式 R=测定的结果在参考范围例数三90%即合格总测定例数生物参考区间数据及验证记录表JDYY/LAB-JL-TY-28-03项目名称/单位癌胚抗原（CEA）/ng/ml检测设备/编号RocheE601/103检测试剂/批号Roche试剂/159299校准品/批号Roche校准品/161204质控品/批号Roche质控品(PCTM)/158274检测方法双抗体夹心法试剂说明书提供参考范围：0-3.4ng/ml各编号样本测定情况序号条形码号性别年龄（岁）测定结果11004139105女371.0221004139690女501.7031004140218女301.2041004139311女520.9851004139368女511.4961004139762女463.29

71004139349男501.7181004139353男282.5891004139302女368.11101004139530男271.52111004139364男254.79121004139198女581.83131004139085男302.13141004139259女451.04151004139109男612.14161004139114男313.14171004140049男241.71181004139120男471.31191004139058男463.03201004139518男553.20结果判断：R二测定的结果在参考范围例数三90%即合格总测定例数R值：底■满足要求 口不满足要求结论：厂家提供的CEA