免疫防治(医学免疫学)课件

免疫学检测

免疫学治疗

免疫学预防

免疫学检测

免疫学治疗

免疫学预防1免疫学检测

抗原或抗体检测淋巴细胞测定免疫学检测方法的应用免疫学检测抗原或抗体检测2抗原或抗体检测

原理检测类型与方法抗原或抗体检测原理3原理

适宜条件抗原＋抗体－－－－－可见反应（肉眼可见）凝集、沉淀等现象特性：特异性：亲和力：一个Fab与表位间的结合亲合力：一个Ab分子与整个Ag的结合可见性：条件：适宜的PH、温度、离子强度、抗原与抗体的比例原理

4

抗原抗体复合物的形成抗原多于抗体

抗原与抗体数量相当抗原少于抗体2：11：11：2抗原抗体复合5Ag小鼠抗体（小鼠Ig):第一抗体（一抗）家兔抗体(兔抗鼠Ig)：第二抗体（二抗）Ag6检测类型与方法

凝集反应

沉淀反应免疫标记技术检测类型与方法凝集反应7凝集反应

定义：颗粒性抗原（RBC、细菌等）与相应的抗体结合后形成肉眼可见的凝集现象。类型：直接凝集

间接凝集凝集反应定义：颗粒性抗原（RBC、细菌等）与8直接凝集将颗粒性抗原与相应抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集的现象。类型：玻片凝集试验：ABO血型鉴定细菌鉴定（用标准的抗体测抗原）试管凝集试验：肥达氏试验（用标准的抗原测抗体）直接凝集将颗粒性抗原与相应抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞9间接凝集

将可溶性抗原包被在载体（红细胞或乳胶颗粒）表面，与相应抗体反应出现凝集颗粒的现象。载体：动物红细胞人O型红细胞乳胶颗粒等间接凝集将可溶性抗原包被在载体（红细胞或乳10类风湿因子检测：

r球蛋白＋乳胶颗粒－致敏颗粒＋抗人r球蛋白抗体

（抗原）抗Rh抗体检测（Coomb’stest）

Rh抗体（IgG）＋Rh+红细胞－－抗人IgG抗体

（抗体）

间接凝集抑制试验

间接凝集类风湿因子检测：间接凝集11间接凝集抑制试验抗原（抗体）＋载体－－致敏颗粒+抗体（抗原）－－凝集现象抗原＋抗体－－致敏颗粒－－－无凝集现象（间接凝集抑制试验）间接凝集抑制试验12免疫防治(医学免疫学)课件13沉淀反应沉淀反应：可溶性抗原（血清蛋白、细胞裂解液、组织浸液等）与相应抗体结合后出现沉淀物的反应。琼脂扩散（免疫扩散）：可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中扩散并在比例合适处形成白色沉淀线。类型单向免疫扩散

双向免疫扩散

免疫电泳沉淀反应沉淀反应：14单向免疫扩散抗体加入琼脂凝胶中，制成琼脂板，打孔后加入抗原，抗原在扩散过程中与抗体相遇，形成沉淀环的试验。用途：检测血清免疫球蛋白和补体的含量（IgG、IgM、IgA、C3)火箭电泳：单扩＋电泳单向免疫扩散抗体加入琼脂凝胶中，制成琼脂板，打孔后加入抗原15免疫防治(医学免疫学)课件16免疫防治(医学免疫学)课件17双向免疫扩散分别将抗原与抗体加入琼脂凝胶的小孔中，两者自由扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线的试验用途：用于抗原或抗体的定性分析血清AFP定性分析对流免疫电泳：双扩＋电泳抗原－阴极、抗体－阳极双向免疫扩散分别将抗原与抗体加入琼脂凝胶的小孔中，18免疫防治(医学免疫学)课件19免疫防治(医学免疫学)课件20免疫电泳免疫电泳21免疫标记技术用荧光素、酶或放射性同位素等标记物，标记抗体或抗原，进行的抗原抗体反应优点：敏感、快速、可定性或定量，甚至定位。类型：免疫荧光法（immunofluorescence）酶免疫测定(enzymeimmunoassay,EIA)放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)

免疫标记技术用荧光素、酶或放射性同位素等标记物，标记抗体或抗22免疫荧光法用荧光素标记抗体，再与待检标本中的抗原反应，借助荧光显微镜观察，对标本中的抗原鉴定或定位常用的荧光素：异硫氰酸荧光素（FITC）－－黄绿色藻红蛋白－－红色用途：病原微生物（细菌、病毒、螺旋体等）抗原抗体的检测类型：直接荧光法间接荧光法免疫荧光法用荧光素标记抗体，再与待检标本中的抗原反应，23直接荧光法荧光素直接标记抗体，进行检测优点：特异性强缺点：必须制备每一种抗原的荧光素抗体直接荧光法荧光素直接标记抗体，进行检测24间接荧光法荧光素标记二抗，当一抗与标本中的抗原结合后，再用标记二抗进行检测优点：敏感性高只需制备一种标记二抗，可用于多种抗原的检测缺点：特异性较直接荧光法低间接荧光法荧光素标记二抗，当一抗与标本中的抗原结合后，再用标25免疫防治(医学免疫学)课件26酶免疫测定用酶标记的抗体进行的抗原抗体反应，通过酶作用于底物后显色来判断结果。常用的酶：辣根过氧化物酶（HRP)碱性磷酸酶（AP）类型：酶联免疫吸附试验－－检测可溶性抗原、抗体酶免疫组化法－－检测组织中细胞表面的抗原

酶免疫测定用酶标记的抗体进行的抗原抗体反应，通过酶作用于底物27酶联免疫吸附试验

（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）ELISA：将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，再用酶标抗体进行检测的抗原抗体反应。特点：敏感性高（ng-pg），操作简便用途：检测病原体的抗原，抗体定量分析微量蛋白成分，细胞因子等类型：双抗体夹心法:Ab+Ag+Ab*间接法:Ag+Ab+Ab*酶联免疫吸附试验

（enzymelinkedimmuno28免疫防治(医学免疫学)课件29放射免疫测定法用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术常用的放射性核素：

125I123I优点：敏感性高（pg）用途：用于微量物质的测定（激素、药物等）放射免疫测定法用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检30淋巴细胞测定类型鉴定：免疫荧光法－表面标志－淋巴细胞群与亚群流式细胞术－检测免疫细胞功能测定：

T细胞功能测定

B细胞功能测定淋巴细胞测定类型鉴定：31T细胞功能测定T细胞增殖试验：T细胞经丝裂原刺激后，分裂增殖，检测淋巴母细胞的数量细胞毒试验：51Cr释放法调亡细胞检查法细胞因子检测：ELISA生物活性测定法PCR皮肤试验:OT试验（IV型超敏反应）T细胞功能测定T细胞增殖试验：T细胞经丝裂原刺激后，分裂增32B细胞功能测定B细胞增殖试验：B细胞经丝裂原刺激后，分裂增殖，检测抗体形成细胞的数量抗体形成细胞测定：溶血空斑试验B细胞功能测定B细胞增殖试验：33免疫学检测方法的应用感染性疾病：诊断，免疫力的确定免疫缺陷病：诊断免疫学监测：判断感染性疾病的转归与预后药物治疗的疗效判断免疫学检测方法的应用感染性疾病：诊断，免疫力的确定34免疫学治疗

（immunotherapy)概述抗体为基础的免疫治疗抗原为基础的免疫治疗细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗细胞为基础的免疫治疗免疫增强剂和免疫抑制剂免疫学治疗

（immunotherapy)概述35概述

免疫治疗：针对机体免疫低下或亢进的免疫状态，人为地增强或抑制机体的免疫功能以达到治疗疾病的治疗方法分类：特异性免疫治疗主动免疫治疗

被动免疫治疗非特异性免疫治疗细胞因子免疫制剂概述

免疫治疗：针对机体免疫低下或亢进的免疫状态，人为地增强36主动免疫治疗给免疫应答健全的机体输入具有抗原性的疫苗或免疫佐剂，以激活或增强机体的自身抵抗疾病的能力。瘤苗、卡介苗、短小棒状杆菌狂犬病毒疫苗主动免疫治疗给免疫应答健全的机体输入具有抗原性的疫37被动免疫治疗将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个体，或自体细胞体外经过处理后回输的免疫治疗方法。抗体小分子免疫肽：转移因子、胸腺肽免疫效应细胞被动免疫治疗将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个38抗体为基础的免疫治疗

免疫血清单克隆抗体基因工程抗体抗体为基础的免疫治疗免疫血清39免疫血清免疫血清：指用抗原免疫动物后获得的免疫血清或者从机体组织中提取制备的免疫球蛋白。类别：抗毒素血清：白喉、破伤风抗毒素治疗、紧急预防胎盘球蛋白：预防急性传染病，丙种球蛋白缺乏者抗菌免疫血清：防治效果不显著抗病毒免疫血清：预防效果显著缺点：特异性差、易致超敏反应免疫血清免疫血清：指用抗原免疫动物后获得的免疫血清或者40单克隆抗体抗细胞表面分子的单抗CD3单抗：急性移植排斥反应CD4单抗：移植排斥反应类风湿关节炎、多发性硬化抗细胞因子单抗：IL-1单抗、TNF单抗－－中和IL-1、TNF－－减轻炎症反应抗体导向药物治疗单克隆抗体抗细胞表面分子的单抗41抗体导向药物治疗

单抗

放射性同位素化学药物毒素（131I/125I/111I）（氨甲蝶呤MTX（植物毒素长春新碱、阿霉素）细菌毒素）放射免疫治疗抗体导向化学疗法免疫毒素疗法抗体导向药物治疗42基因工程抗体嵌合抗体人源化抗体完全人源抗体:人Ig基因转染小鼠单链抗体基因工程抗体嵌合抗体43人IgV区鼠IgC区嵌合抗体鼠CDR区人Ig人源化抗体VH连接物VL

单链抗体人IgV区鼠IgC区嵌合抗体鼠CDR区人Ig人源化抗44抗原为基础的免疫治疗增强免疫应答：治疗感染、肿瘤诱导免疫耐受：治疗自身免疫病超敏反应、移植排斥反应抗原为基础的免疫治疗45细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗补充和添加疗法阻断和拮抗疗法基因治疗细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗补充和添加疗法46免疫防治(医学免疫学)课件47细胞为基础的免疫治疗骨髓移植：自体、异体、造血干细胞免疫效应细胞：LAK、TILDC:肿瘤多肽、抗原多肽负载的DC肿瘤疫苗：活瘤苗、减毒活灭活瘤苗基因修饰瘤苗分子瘤苗细胞为基础的免疫治疗骨髓移植：自体、异体、造血干细胞48免疫学预防疫苗的基本要求人工免疫新型疫苗疫苗的应用免疫学预防疫苗的基本要求49疫苗的基本要求安全有效实用疫苗的基本要求安全50人工免疫

人工自动免疫(artificalactiveimmunization)人工被动免疫(artificalpassiveimmunization)计划免疫(planedimmunization)人工免疫人工自动免疫51人工自动免疫概念:给人体接种疫苗等抗原性制剂，使机体产生特异性免疫，从而预防感染的措施。疫苗：用于人工自动免疫的生物制品（细菌、病毒、螺旋体、类毒素等）类型：灭活疫苗（死疫苗）、减毒活疫苗、类毒素人工自动免疫概念:给人体接种疫苗等抗原性制剂，使52类别经典疫苗：灭活疫苗（死疫苗）；减毒活疫苗类毒素新型疫苗：亚单位疫苗结合疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗：重组抗原疫苗DNA疫苗

类别经典疫苗：灭活疫苗（死疫苗）；减毒活疫苗53免疫防治(医学免疫学)课件54人工被动免疫

概念：给人体注射含特异性抗体的免疫血清活细胞因子等制剂，以治疗或紧急预防感染的措施。制剂：抗毒素人免疫球蛋白制剂细胞因子制剂单抗制剂人工被动免疫

概念：给人体注射含特异性抗体的免疫血清活55免疫防治(医学免疫学)课件56计划免疫概念：根据某些特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析，按照规定的免疫程序有计划地进行人群预防接种，以提高人群免疫力，达到控制直至消灭传染病地措施。免疫程序：儿童基础免疫特殊人群免疫计划免疫概念：根据某些特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析57免疫防治(医学免疫学)课件58新型疫苗亚单位疫苗（subunitvaccine）:提取病原体中能激发保护性免疫地有效免疫成分制作的疫苗。合成肽疫苗：根据有效免疫原的氨基酸序列，人工合成免疫原性肽作为疫苗。基因工程疫苗：利用DNA重组技术制备的，含病原体有效免疫原的疫苗。DNA疫苗：将病原体有效免疫原的基因与细菌质粒构建的重组体，在宿主细胞中表达保护性抗原，从而诱导机体产生特异性免疫的疫苗转基因植物疫苗新型疫苗亚单位疫苗（subunitvaccine）:提取59疫苗的应用抗感染抗肿瘤计划免疫防止免疫病理损伤疫苗的应用抗感染60

免疫学检测

免疫学治疗

免疫学预防

免疫学检测

免疫学治疗

免疫学预防61免疫学检测

抗原或抗体检测淋巴细胞测定免疫学检测方法的应用免疫学检测抗原或抗体检测62抗原或抗体检测

原理检测类型与方法抗原或抗体检测原理63原理

适宜条件抗原＋抗体－－－－－可见反应（肉眼可见）凝集、沉淀等现象特性：特异性：亲和力：一个Fab与表位间的结合亲合力：一个Ab分子与整个Ag的结合可见性：条件：适宜的PH、温度、离子强度、抗原与抗体的比例原理

64

抗原抗体复合物的形成抗原多于抗体

抗原与抗体数量相当抗原少于抗体2：11：11：2抗原抗体复合65Ag小鼠抗体（小鼠Ig):第一抗体（一抗）家兔抗体(兔抗鼠Ig)：第二抗体（二抗）Ag66检测类型与方法

凝集反应

沉淀反应免疫标记技术检测类型与方法凝集反应67凝集反应

定义：颗粒性抗原（RBC、细菌等）与相应的抗体结合后形成肉眼可见的凝集现象。类型：直接凝集

间接凝集凝集反应定义：颗粒性抗原（RBC、细菌等）与68直接凝集将颗粒性抗原与相应抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集的现象。类型：玻片凝集试验：ABO血型鉴定细菌鉴定（用标准的抗体测抗原）试管凝集试验：肥达氏试验（用标准的抗原测抗体）直接凝集将颗粒性抗原与相应抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞69间接凝集

将可溶性抗原包被在载体（红细胞或乳胶颗粒）表面，与相应抗体反应出现凝集颗粒的现象。载体：动物红细胞人O型红细胞乳胶颗粒等间接凝集将可溶性抗原包被在载体（红细胞或乳70类风湿因子检测：

r球蛋白＋乳胶颗粒－致敏颗粒＋抗人r球蛋白抗体

（抗原）抗Rh抗体检测（Coomb’stest）

Rh抗体（IgG）＋Rh+红细胞－－抗人IgG抗体

（抗体）

间接凝集抑制试验

间接凝集类风湿因子检测：间接凝集71间接凝集抑制试验抗原（抗体）＋载体－－致敏颗粒+抗体（抗原）－－凝集现象抗原＋抗体－－致敏颗粒－－－无凝集现象（间接凝集抑制试验）间接凝集抑制试验72免疫防治(医学免疫学)课件73沉淀反应沉淀反应：可溶性抗原（血清蛋白、细胞裂解液、组织浸液等）与相应抗体结合后出现沉淀物的反应。琼脂扩散（免疫扩散）：可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中扩散并在比例合适处形成白色沉淀线。类型单向免疫扩散

双向免疫扩散

免疫电泳沉淀反应沉淀反应：74单向免疫扩散抗体加入琼脂凝胶中，制成琼脂板，打孔后加入抗原，抗原在扩散过程中与抗体相遇，形成沉淀环的试验。用途：检测血清免疫球蛋白和补体的含量（IgG、IgM、IgA、C3)火箭电泳：单扩＋电泳单向免疫扩散抗体加入琼脂凝胶中，制成琼脂板，打孔后加入抗原75免疫防治(医学免疫学)课件76免疫防治(医学免疫学)课件77双向免疫扩散分别将抗原与抗体加入琼脂凝胶的小孔中，两者自由扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线的试验用途：用于抗原或抗体的定性分析血清AFP定性分析对流免疫电泳：双扩＋电泳抗原－阴极、抗体－阳极双向免疫扩散分别将抗原与抗体加入琼脂凝胶的小孔中，78免疫防治(医学免疫学)课件79免疫防治(医学免疫学)课件80免疫电泳免疫电泳81免疫标记技术用荧光素、酶或放射性同位素等标记物，标记抗体或抗原，进行的抗原抗体反应优点：敏感、快速、可定性或定量，甚至定位。类型：免疫荧光法（immunofluorescence）酶免疫测定(enzymeimmunoassay,EIA)放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)

免疫标记技术用荧光素、酶或放射性同位素等标记物，标记抗体或抗82免疫荧光法用荧光素标记抗体，再与待检标本中的抗原反应，借助荧光显微镜观察，对标本中的抗原鉴定或定位常用的荧光素：异硫氰酸荧光素（FITC）－－黄绿色藻红蛋白－－红色用途：病原微生物（细菌、病毒、螺旋体等）抗原抗体的检测类型：直接荧光法间接荧光法免疫荧光法用荧光素标记抗体，再与待检标本中的抗原反应，83直接荧光法荧光素直接标记抗体，进行检测优点：特异性强缺点：必须制备每一种抗原的荧光素抗体直接荧光法荧光素直接标记抗体，进行检测84间接荧光法荧光素标记二抗，当一抗与标本中的抗原结合后，再用标记二抗进行检测优点：敏感性高只需制备一种标记二抗，可用于多种抗原的检测缺点：特异性较直接荧光法低间接荧光法荧光素标记二抗，当一抗与标本中的抗原结合后，再用标85免疫防治(医学免疫学)课件86酶免疫测定用酶标记的抗体进行的抗原抗体反应，通过酶作用于底物后显色来判断结果。常用的酶：辣根过氧化物酶（HRP)碱性磷酸酶（AP）类型：酶联免疫吸附试验－－检测可溶性抗原、抗体酶免疫组化法－－检测组织中细胞表面的抗原

酶免疫测定用酶标记的抗体进行的抗原抗体反应，通过酶作用于底物87酶联免疫吸附试验

（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）ELISA：将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，再用酶标抗体进行检测的抗原抗体反应。特点：敏感性高（ng-pg），操作简便用途：检测病原体的抗原，抗体定量分析微量蛋白成分，细胞因子等类型：双抗体夹心法:Ab+Ag+Ab*间接法:Ag+Ab+Ab*酶联免疫吸附试验

（enzymelinkedimmuno88免疫防治(医学免疫学)课件89放射免疫测定法用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术常用的放射性核素：

125I123I优点：敏感性高（pg）用途：用于微量物质的测定（激素、药物等）放射免疫测定法用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检90淋巴细胞测定类型鉴定：免疫荧光法－表面标志－淋巴细胞群与亚群流式细胞术－检测免疫细胞功能测定：

T细胞功能测定

B细胞功能测定淋巴细胞测定类型鉴定：91T细胞功能测定T细胞增殖试验：T细胞经丝裂原刺激后，分裂增殖，检测淋巴母细胞的数量细胞毒试验：51Cr释放法调亡细胞检查法细胞因子检测：ELISA生物活性测定法PCR皮肤试验:OT试验（IV型超敏反应）T细胞功能测定T细胞增殖试验：T细胞经丝裂原刺激后，分裂增92B细胞功能测定B细胞增殖试验：B细胞经丝裂原刺激后，分裂增殖，检测抗体形成细胞的数量抗体形成细胞测定：溶血空斑试验B细胞功能测定B细胞增殖试验：93免疫学检测方法的应用感染性疾病：诊断，免疫力的确定免疫缺陷病：诊断免疫学监测：判断感染性疾病的转归与预后药物治疗的疗效判断免疫学检测方法的应用感染性疾病：诊断，免疫力的确定94免疫学治疗

（immunotherapy)概述抗体为基础的免疫治疗抗原为基础的免疫治疗细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治疗细胞为基础的免疫治疗免疫增强剂和免疫抑制剂免疫学治疗

（immunotherapy)概述95概述

免疫治疗：针对机体免疫低下或亢进的免疫状态，人为地增强或抑制机体的免疫功能以达到治疗疾病的治疗方法分类：特异性免疫治疗主动免疫治疗

被动免疫治疗非特异性免疫治疗细胞因子免疫制剂概述

免疫治疗：针对机体免疫低下或亢进的免疫状态，人为地增强96主动免疫治疗给免疫应答健全的机体输入具有抗原性的疫苗或免疫佐剂，以激活或增强机体的自身抵抗疾病的能力。瘤苗、卡介苗、短小棒状杆菌狂犬病毒疫苗主动免疫治疗给免疫应答健全的机体输入具有抗原性的疫97被动免疫治疗将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个体，或自体细胞体外经过处理后回输的免疫治疗方法。抗体小分子免疫肽：转移因子、胸腺肽免疫效应细胞被动免疫治疗将对疾病有免疫力的供者的免疫应答产物转移给其他个98抗体为基础的免疫治疗

免疫血清单克隆抗体基因工程抗体抗体为基础的免疫治疗免疫血清99免疫血清免疫血清：指用抗原免疫动物后获得的免疫血清或者从机体组织中提取制备的免疫球蛋白。类别：抗毒素血清：白喉、破伤风抗毒素治疗、紧急预防胎盘球蛋白：预防急性传染病，丙种球蛋白缺乏者抗菌免疫血清：防治效果不显著抗病毒免疫血清：预防效果显著缺点：特异性差、易致超敏反应免疫血清免疫血清：指用抗原免疫动物后获得的免疫血清或者100单克隆抗体抗细胞表面分子的单抗CD3单抗：急性移植排斥反应CD4单抗：移植排斥反应类风湿关节炎、多发性硬化抗细胞因子单抗：IL-1单抗、TNF单抗－－中和IL-1、TNF－－减轻炎症反应抗体导向药物治疗单克隆抗体抗细胞表面分子的单抗101抗体导向药物治疗

单抗

放射性同位素化学药物毒素（131I/125I/111I）（氨甲蝶呤MTX（植物毒素长春新碱、阿霉素）细菌毒素）放射免疫治疗抗体导向化学疗法免疫毒素疗法抗体导向药物治疗102基因工程抗体嵌合抗体人源化抗体完全人源抗体:人Ig基因转染小鼠单链抗体基因工程抗体嵌合抗体103人IgV区鼠IgC区嵌合抗体鼠CDR区人Ig人源化抗体VH连接物VL

单链抗体人IgV区鼠IgC区嵌合抗体鼠CDR区人Ig人源化抗104抗原为基础的免疫治疗增强免疫应答：治疗感染、肿瘤诱导免疫耐受：治疗自身免疫病超敏反应、移植排斥反应抗原为基础的免疫治疗105细胞因子及其拮抗剂为基础的免疫治