动物细胞工程

动物细胞工程1（08上海生物）.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植A.①② B.①③ C.②③ D.③④2.（浙江卷）6.实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）的基本过程如图所示。下列叙述错误的是A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D.T过程得到的细胞具有异质性（15届海淀高三上期中11）下列有关胚胎干细胞的叙述，不正确的是A.能分化为多种细胞B.不具有发育的全能性C.保持细胞分类能力 D.分化过程一般不可逆（15届海淀高三上期中15）下列叙述不正确的是A.植物组织培养的再分化过程不需要添加植物生长调节剂B.原代培养的动物细胞基因型一般发不发生改变C.转基因植物的培育一般需要借助于植物组织培养技术D.单克隆抗体制备以细胞融合和细胞培养技术为基础（15届海淀高三上期中16）用于动物细胞培养的组织和细胞大都来自胚胎或出生不久的幼龄动物，其主要原因是这样的组织细胞A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性C.取材十分方便 D.具有更强的分裂能力（15届海淀高三上期中17）科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下。细胞核供体细胞类型妊娠数/受体母羊数乳腺上皮细胞1/13胚胎成纤维细胞4/10早期胚胎细胞14/27据此分析并不正确的是A.早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高B.克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全不同C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植D.重组细胞的发育与去核卵细胞的细胞质有关（15届海淀高三上期末6）动物细胞培养中存在“接触抑制”现象，如果清除一部分贴壁细胞，邻近细胞又迅速分裂重新填满这一区域，然后再次停止分裂。据此作出假设，不合理的是A.清除部分细胞，邻近细胞释放某种信号分子重新启动细胞周期B.细胞接触后，为动物细胞停止分裂离开细胞周期提供了信号C.细胞周期是有其内在节律性的，不受环境因素的干扰D.细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体（15届海淀高三上期末18）关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒（15届朝阳高三上期末29）某实验室做了下图所示的实验研究。下列相关叙述中正确的是甲小鼠的纤维母细胞造呈母诱导干细胞❷肝细胞、神经细胞、上皮细胞等'一细艮③ ④细胞当单克隆抗体将H1N1病毒外壳蛋白注入乙小鼠一AY细胞A.与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低B.单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外C.每个丫细胞只产生一种抗体，故过程④不需进行筛选

D.过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程10（2015四川卷.6.）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育'三亲婴儿〃。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是・・A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D.三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术.（江苏卷）22.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞.（重庆卷）2.题2图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是小晶腹腔体外培养小晶腹腔体外培养单克隆抗体题2网A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群.（全国大纲卷）2.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒.（丰台2）下列过程不属于克隆的是•••A.单个大肠杆菌形成单菌落 B.壁虎断尾后长出新尾巴C.PCR扩增抗除草剂基因 D.利用柳树枝条繁殖植株15.（08理综I）5.下列关于细胞工程的叙述，错误的是（）••A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制务单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同

16（2015年江苏卷.3.）下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是A.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行C.采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质（2012江苏卷）22.下列事实能体现细胞全能性的是A.棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B.单细胞的DNA在体外大量扩增C.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D.小鼠体细胞经诱导培育成小鼠（2015年天津，6）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（）A、该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B、捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C、三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D、三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术（2015年江苏，3）下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是A.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行C.采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质（15届海淀高三上期中36）（8分）抗体的结构如右图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。（1）抗体结构中肽键数目为p,氨基酸数目为a,二者的关系式为（2）取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和 检测以获得具有特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内或放入培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科研人员制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的 区和人抗体的 区组合而成。（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于 工程的产物。答案：（1）p=a-4（或“a=p+4”）（2）抗体能无限增殖并产生专一（特定）抗体CO2（恒温）（3）VC（4）氨基酸蛋白质（丰台31）为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如下工作。I输入重组细胞A选择具有正常胰岛B细胞

功能的胰岛样细胞I输入重组细胞A选择具有正常胰岛B细胞

功能的胰岛样细胞X胰岛样细胞，定向诱导图1利用现代生物技术治疗遗传性糖尿病的流程示意图（1）图1中①是取自患者体细胞的 ，过程②表示技术。TOC\o"1-5"\h\z（2）图1中过程③表示技术，需要用到的两类酶是 。（3）重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、等必需的营养成分，并在含5%CO2的无菌、恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。（4）定向诱导使重组细胞B发生 ，从而形成功能专一的胰岛样细胞。为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，研究人员分别控制甲、乙两组培养液中 的浓度，将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中，保温相同时间后检测胰岛素的分泌量。若诱导成功，则图2中甲组应为情况下测得的胰岛素分泌量，理由是 。（1）细胞核（1分） 核移植（1分） （2）转基因（或：基因工程） 限制酶和DNA连接酶（3）动物血清（1分） 调节细胞培养液的pH（1分）（4）细胞分化（基因选择性表达）葡萄糖葡萄糖浓度较高胰岛素有降低血糖的功能，血糖浓度高时分泌量增多22.（15届东城高三上期末31）科研人员为了解胰岛素样生长因子1（IGF1）对体外培养的兔关节软骨细胞增殖以及细胞超微结构的影响，进行了相关实验。（1）取动物的软骨，切碎后用处理使之分散成单个细胞，加入细胞培养液制成细胞悬液进行培养。将配制好的一定浓度的第2代软骨细胞接种到七块细胞培养板上，待细胞贴壁生长后，将每块细胞培养板上的一半细胞加入浓度为100Hg・L-的IGF1,另一半用培养。每24h取出一块培养板进行细胞的计数，绘制曲线如下图。根据曲线分析，加入IGF1后可使缩短。（2）取第4代生长良好的软骨细胞两瓶，弃去原培养液，实验组加入含IGF1的细胞培养液，与对照组一起继续培养48h。电镜下观察细胞的超微结构发现，实验组细胞中线粒体变丰富，表明IGF1处理后，细胞内供能充足，活跃；粗面内质网增多，核糖体数量懒丁”表明IGF1处理后细胞内 .旺盛；细胞核体积增大，说明在IGF1作用下细胞持续增殖，细胞核中均合成旺盛。答案：（1）胰蛋白酶；不添加IGF1的细胞培养液；细胞周期（2）细胞代谢；蛋白质合成DNA、RNA23.（15届西城高三上期末22）为探究两种抗癌药物A和B联合作用的效果，用A和B单独及联合处理体外培养的肝癌细胞，测定细胞周期各阶段细胞所占比例及细胞凋亡率，结果如下表所示。请分析回答：组另IJ细胞周期细胞凋亡率（%）G,(%)S(%)Gc+分裂期（％）对照组132.7122.01245.285.29仅用药物A34.1263.152.7318.14仅用药物B90.276.543.1931.86药物A.B联合使用45.4648.386.1652.46（1）体外培养肝癌细胞时，培养基中除水、糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子外，通常还需要加入;传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用 等处理后分瓶继续也关培养。（2）结果显示，药物A主要使肝癌细胞的细胞周期阻滞于 期，推测其作用机理是：（3）细胞内ERK蛋白被磷酸化为pERK,可导致细胞增殖。用药物B处理肝癌细胞后，与对照组相比，ERK蛋白含量无显著变化，pERK的含量明显下降，由此推测，药物B可能通过 影响人肝癌细胞的增殖。（4）细胞凋亡是 控制的细胞编程性死亡。上述四组实验结果，说明联合用药对肝癌细胞凋亡的作用是 ，两种药物在治疗癌症的效果上表现为 作用。答案：（1）血清、抗生素胰蛋白酶（2）S期阻断DNA的复制（3）抑制ERK的磷酸化过程（4）基因促进凋亡作用强于单处理组协同24.（2014新课标卷I,40）［生物一一选修3：现代生物科技专题］（15分）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z）,每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

32000280002400020000160001200080004000若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的3淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：TOC\o"1-5"\h\z（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是 小鼠，理由是 。（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有 ，体系中出现多种类型细胞的原因是 。（3）杂交瘤细胞中有 个细胞核，染色体数目最多是 条。（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是 。【答案】（1）四YY小鼠的抗体效价最高（2）B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%（3）1 100（4）不能无限增殖25.（2015重庆卷.7.）（10分）2014年埃博拉病在非洲蔓延，我国派出医疗队首次在境外组建医院，帮助非洲防控埃博拉疫情。（1）研究表明，埃博拉病毒侵入机体后，通过靶向感染、破坏吞噬细胞等，使其不能暴露该病毒的，以致感染信息不能呈递给 ，从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程，导致机体对该病毒的 免疫功能下降。因此病毒在体内快速增殖、致病。（2）对志愿者接种埃博拉试验疫苗后，机体免疫系统能产生相应的抗体，还能产生的免疫细胞有 。（3）用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠，通过 技术获得杂交瘤细胞，用于生产单克隆抗体治疗该病。【答案】特有抗原或抗原肽-MHC；T细胞；特异性记忆细胞、效应T细胞细胞融合或细胞杂交26.（新课标I卷）40【生物一一选修3现代生物科技专题】（15分）阅读如下材料：材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠〃；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。材料乙：T4溶菌酶在翁度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎课在不同个体的体内发育。回答下列问题：（1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基因表达载体常用的工具酶有 和。在培育转基因植物是，常用农杆菌转化发，农杆菌的作用是 。（2）材料乙属于工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对进行改造，或制造制造一种的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。（4）材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到 种的，生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为体，兔乙称为体。【答案】（1）显微注射法 限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中（2） 蛋白质现有蛋白质 新蛋白质 氨基酸（3）同供体受体27.（2014山东卷，36）（12分）【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

（1）htPA基因与载体用切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用技术。（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其。采集的精子需要经过，才具备受精能力。（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到，说明目的基因成功表达。【答案】⑴同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）； DNA分子杂交（或核酸探针）（2）超数排卵； 获能（处理）（3）显微注射法； 性别鉴定；全能性（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）.（福建卷）33.［生物-现代生物科技专题］必答题（10分）克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Be/-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。不同发育时期不同发育时期（1）图中重组细胞的细胞核来自细胞，早期胚胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和 胚最终发育为克隆猪。（2）在PCR过程中可检测出cDNA中Bel-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bel-2mRNA的分子数，从而反映出Bel-2基因的转录水平。①图中X表示过程。②从基因组数据库中查询Bel-2mRNA的核甘酸序列，以便根据这一序列设计合成用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是。【答案】（1）体原肠（2）①反转录②引物Bel-2cDNA.（海南卷）31.【生物一一选修3：现代生物科技专题】（15分）单纯疱疹病毒I型e551）可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题：（1）在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗―的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了—反应，再从小鼠的—中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的—细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是—。（2）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的—中使其增殖，再从—中提取、纯化获得。（3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白，其原因是该抗体具有—和—等特性。【参考答案】（1）HSV-1蛋白（1分） 体液免疫（1分，其他合理答案也给分）脾脏（1分，其他合理答案也给分） 骨髓瘤（1分）无限增值且产生专一抗体（3分，其他合理答案也给分）⑵腹腔腹水（每空2分，共4分）⑶纯度高（2分）特异性强（2分，其他合理答案也给分）30（2012山东卷）35.（8分）【生物一现代生物科技专题】毛角蛋白^型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。转基四城山羊成年年绿山单建人目前第成好雉竭胞因的生胤\羊股儿丧程如图。转基四城山羊成年年绿山单建人目前第成好雉竭胞因的生胤\羊股儿丧②.㈱蛆蟆央0-重施衮述蚊体（1）过程①中最常用的运载工具是 ，所需要的酶是限制酶和。（2）在过程②中，用处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是 。（3）在过成③中，用处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行 处理。（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。答案：（1）质粒 DNA连接酶（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 维持培养基（液）的pH（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清） 去核（4）（早期）胚胎培养 胚胎分割（16分）（丰台1模）研究发现，胰腺癌的发生及恶性发展与端粒酶活性高有关。为寻找抑制胰腺癌细胞增殖存活的有效途径，研究人员针对人端粒酶RNA（hTR）序列（5,-CCUAAC-3,）合成3种寡核甘酸：PS-ODN1、PS-ODN2和PS-ODN3。分别将3种寡核甘酸加入胰腺癌P3细胞和人成纤维细胞培养液中，在相同且适宜条件下培养一段时间后，测定细胞存活率和P3细胞端粒酶活性，结果如下表。序列成纤维细胞存活率/%P3细胞存活率/%P3细胞端粒酶相对活性PS-ODN15‘-GTTAGG-3;103.0433.340.28PS-ODN25,-CCTAAC-3,95.3681.370.97PS-ODN35,-AACTCG-3/106.491.540.95表PS-ODN处理后细胞存活率和端粒酶活性请回答问题：（1）癌细胞表面 减少，导致其极易在体内扩散。部分胰腺癌患者出现血糖升高的症状，其原因是 O（2）将胰腺癌P3细胞和人皮肤成纤维细胞培养在含有 等营养物质（答出两种即可）的培养液中，培养过程中需充入5%CO2其目的是—（3）测定细胞存活率时以 的培养液中的细胞数量为100%o由表中数据可知，可引起P3细胞存活率明显下降，其原因是该寡核甘酸序列可以与hTR序列，从而降低端粒酶的活性。（4）PS-ODN序列对成纤维细胞的存活率无显著影响，是因为 o答案：31.（16分，每空2分）（1）糖蛋白胰岛素分泌不足（2）葡萄糖、无机盐、血清等 调节细胞培养液的pH值（3）不含PS-ODN PS-ODN1 碱基互补配对（4）成纤维细胞的端粒酶活性低32.（2016全国卷II）［生物——选修3：现代生物科技专题］（15分）下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n,则其性染色体的组成可为。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用的方法。②代表的过程是。（2）经过多次传代后，供体细胞中的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是 。（4）与克隆羊”多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了。【答案】（15分）（1）XX或XY 显微操作（去核法） 胚胎移植（2）遗传物质 （3）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响（4）已经分化的动物体细胞核具有全能性。33（08江苏生物）B题。下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。（1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是 。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎期开始的标志。（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 O（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于O答案：（1）促进排卵（或超数排卵）使精子获能囊胚（2）容易获得纯合子并缩短育种时间（3）小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因（4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达34.（08宁夏）［生物一选修3现代生物科技专题］（15分）回答下列有关动物细胞培养的问题：⑴在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的O此时，瓶壁上形成的细胞层数是 O要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性 ,细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 O⑶现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 O⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。⑸在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞 的速率降低。⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击答案：38、［生物一选修3现代生物科技专题］（15分）⑴相互接触 接触抑制 单层（或一层）胰蛋白酶⑵衰老甚至死亡不死性降低 减少⑶由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）⑷中⑸冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢 ⑹抗原35.（2011山东卷）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传（3）子代大鼠如果，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表和切割后连接成重组载体，35.（2011山东卷）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传（3）子代大鼠如果，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表和切割后连接成重组载体，达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是、早期胚胎培养和胚胎移植。答案：卵巢（2）目的基因运载体同一种限制酣 限制S5识别位点（3）检测到相应蛋白质出现高血压 （4）体■外受精35（07高考宁夏）39.B.［生物一一选修3现代生物科技专题］现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出注入B品种牛的卵母细胞，经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为,将该胚胎移入代孕母牛的中，通过培育可达到目的。（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量 ，为解决这一问题，可以用激素处理B品种母牛。（3）克隆牛的产生说明具有全能性。克隆牛的性状主要表现—品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自个亲本，细胞质来自性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成（相同，不同）答案：（1）细胞核去核重组胚胎子宫（2）不足促性腺⑶动物体细胞核A两雌不同36（2011福建卷）一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如右图。炎帝事子河抽取工分禺请回答：（1）过程①是指在体外进行的（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程②称为 。口症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③进行PCR扩增。然后用旅/II对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。据此判断， 族/I