不同预处理方法对朝鲜蓟中绿原酸提取的影响

PAGEword文档可自由复制I编辑本科生毕业论文(设计)题目:不同预处理方法对朝鲜蓟中绿原酸提取的影响word文档可自由复制I编辑目录TOC\o"1-3"\h\u11439摘要 130406Abstract 163971前言 2184511.1朝鲜蓟简介 2297091.2朝鲜蓟中主要功能性成分 254041.2.1绿原酸 243341.2.2洋蓟素 3221851.2.3多酚类化合物 459751.3朝鲜蓟预处理方法的比较与分析 5100821.3.1预处理方法种类 5107361.3.2预处理方法原理 5203261.3.3预处理方法分析 6184501.4绿原酸的检测方法 636651.5本课题的研究目的与意义 6287902材料与方法 7216432.1材料 736922.1.1原料与试剂 7239002.1.2主要设备与仪器 7117792.2方法 8107772.2.1试验流程 8144382.2.2样品的提取 8245172.2.3测定方法 894772.2.4具体操作步骤 8196182.2.5问题与解决方案 9131553结果与分析 10233673.1试验结果的比较 10123753.2标准曲线与线性方程 12264643.3绿原酸含量数据整合 1326283.4加标前后绿原酸含量比较及回收率 15188274结论 1721520参考文献 1723269致谢 20word文档可自由复制I编辑不同预处理方法对朝鲜蓟中绿原酸提取的影响摘要朝鲜蓟是由国外引进的一种多年生草本植物，其主要食用部分为花托的嫩苞片及肉质花托，含有绿原酸、洋蓟素、黄酮类物质等功能性成分，本课题建立了四种预处理方法对朝鲜蓟中绿原酸进行提取，并采用高效液相色谱法进行了朝鲜蓟中绿原酸含量的检测与鉴定。提取溶剂是甲醇，预处理方法分别是浸提法和超声波法，每种预处理方法有两种浓度,通过试验，确定提取率最高的预处理方案参数为：朝鲜蓟10g、纯甲醇40ml、浸提处理，试验所得绿原酸最高含量为12.36804mg/kg。此方法操作简单，成本较低，可为常德本地区对朝鲜蓟中功能性成分的研究及对朝鲜蓟的深加工提供一定的理论基础。关键词：绿原酸；超声波；浸提；高效液相色谱AbstractArtichokeisaperennialherbimportedfromabroad,themainedibleportionarethetenderfleshytoriandbractsoftori,itcontainsfunctionalingredientslikechlorogenicacids,cynarin,andflavonoids.Setupfourkindsofpretreatmentmethodanduseahighperformanceliquidchromatographmethodtoextractthecontentofthechlorogenicacidfromartichoke.Usemethanoltoextract;Pretreatmentmethodsareethanolextractionandultrasonicmethod.Therearetwoconcentrationsofeachpretreatment,afterexperiment,thehighestrateofextractprojectare10gartichoke,40ml100%methanol,ultrasonictreatment,Chlorogenicacidcontentisderivedfromtest12.36804mg/kgThisprojectissimpleandcheap.It’satheoreticalbasisontheresearchoffunctionalingredientsinartichokesandartichokeprovideforthefurtherprocessing.demandtion.inChangDe.KEYWORDS:chlorogenicacid;ultrasonictreatment;ethanolextraction;highperformanceliquidchromatographmethod1前言随着经济的快速发展，人们生活水平的提高、保健意识的增强，保健品受到越来越多消费者的喜爱。保健品的种类有很多，越来越多的保健系列产品相继面世。1.1朝鲜蓟简介朝鲜蓟，别名菊蓟、菜蓟、法国百合、荷花百合，学名Cynarascolymusl，为菊科（Comopsite）菜蓟属多年生草本植物。原产地中海沿岸，是由菜蓟（C.cardunculusL.）演变而成。以法国栽培最多。19世纪由法国传入我国上海。目前我国主要在上海、浙江、湖南、云南等地有少量栽培[1]。朝鲜蓟花球可观赏亦可食用，其主要食用部分为花托的嫩苞片(状如百合鳞片)及肉质花托，营养价值比较高，维生素和矿物质的含量较为丰富。可食部含有多种营养成分,蛋白质、钙磷含量较高,此外还含有较多的菊糖(根中含量较高)、洋蓟酸、绿原酸等多酚、黄酮类等功能性化合物，不仅存在于花球中,叶片中含量更高。营养价值在蔬菜、水果中名列前茅。茂盛的叶片可制开胃酒，叶柄软化栽培后食用味道清淡[2]。朝鲜蓟的营养价值主要有：治疗消化不良、降血脂及动脉粥样硬化、保肝及抗氧化功能、抗微生物作用、朝鲜蓟叶提取物特别是其中的黄酮化合物能调节人体上皮细胞内NO酶的基因表达,促进NO的合成,从而预防心血管疾病的发生。朝鲜蓟中所含的菜蓟苦素有抗痉挛的作用。此外,朝鲜蓟还能提高肠蠕动,促进肠壁收缩,使肠中物质能较快运送,从而可以预防便秘[3]。1.2朝鲜蓟中主要功能性成分1.2.1绿原酸物理特性：绿原酸（chlorogenicacid）半水合物为针状结晶（水）。110℃变为无水化合物，熔点208℃，[α]24D-35.2℃（c=2.8）。25℃水中溶解度为4%，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。生物活性：绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茴香醚（BHA）和生育酚[4]。绿原酸之所以有抗氧化作用，是因为它含有一定量的R-OH基，能形成具有抗氧化作用的氢自由基，以消除羟基自由基和超氧阴离子等自由基的活性，从而保护组织免受氧化作用的的损害。绿原酸及其衍生物具有比抗坏血酸、咖啡酸和生育酚（维生素E）更强的自由基清除效果，可有效清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，还可抑制低密度脂蛋白的氧化。绿原酸对有效地清除体内自由基、维持机体细胞正常的结构和功能、防止和延缓肿瘤突变和衰老等现象的发生具有重要作用。绿原酸含有一种可促进人体的皮肤、骨骼、肌肉中胶蛋白的合成与分解的特殊成分，具有促进代谢、防止衰退的功能，可用来预防宇航员因太空失重而引起的骨骼和肌肉衰退。由于绿原酸对透明质酸（HAase）及葡萄糖-6-磷酸酶（Gl-6-Pase）有特殊的抑制作用，所以绿原酸对于创伤的治愈、皮肤健康湿润、润滑关节、防止炎症以及体内血糖的平衡调控等都有一定的疗效。绿原酸是由咖啡酸（Caffeicacid）与奎尼酸（Quinicacid,1-羟基六氢没食子酸）生成的缩酚酸，是植物有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物[5]。绿原酸具有增加胃肠蠕动、促进胃液分泌、利胆、消炎、抗菌、降压、增加白血球、兴奋中枢神经系统及防止癌细胞扩散等多种药用功能[5]。临床上用于治疗急性细菌感染引起的疾病。其作为茵陈、银花等中药的有效成分得到广泛应用，因而明确朝鲜蓟中的绿原酸含量，对于朝鲜蓟的食用、药用成分等的综合开发有着重要的意义。通过查阅文献资料，对几种中成药、中草药、茶叶及烟草等中的绿原酸含量的测定可见报道，其方法有阻抑一催化褪色光度法、薄层色谱法和液相色谱法等[6、7]，但很少有关于朝鲜蓟中绿原酸含量分析的报道。绿原酸的化学分子式如下图所示。1.2.2洋蓟素物理特性：在760mmHg时沸点为819.9℃，熔点225~227℃，闪光点278.1℃，密度1.64g生物活性：具有利胆、保肝、降胆固醇作用。临床用于治疗肝功能不足引起的各种疾病。还可作为利胆药。能增强胆汁降低脂肪，肝脏解毒，预防脂肪肝；能有效抑制LDL胆固醇氧化，降低胆固醇；有护肝作用，能修复受损肝细胞。国外用于减肥降脂配方，护肝及解酒药等[8]。其化学分子式如下图所示：1.2.3多酚类化合物物理特性：多酚类是指一组植物中化学物质的统称，因具有多个酚基团而得名。多酚在一些植物中起到了呈现颜色的作用，如秋天的叶子。生物活性：又称黄酮类，由40多种化学成分组成，具有抗氧化、强化血管壁、促进肠胃消化、降低血脂肪、与增加身体抵抗力，并防止动脉硬化、血栓形成的作用；还能利尿、降血压、抑制细菌与癌细胞生长，及帮助消化[9]。多酚化合物的共同特点是具有良好的抗氧化活性，能与维生素C、E和胡萝卜素等其他抗氧化物在体内一起发挥抗氧化功效，清除有害人体健康的坏分子——自由基[9]。通过查阅与朝鲜蓟相关文献资料，我国对朝鲜蓟研究多集中在引种栽培方面，对提取物及其活性化合物的提取分离提纯的研究较少。朝鲜蓟提取物的主要成分是绿原酸与洋蓟素，本课题就常德市引进栽培的朝鲜蓟中绿原酸的提取方法和检测分析进行了初步的研究。以下两图为新鲜朝鲜蓟的图样：1.3朝鲜蓟预处理方法的比较与分析1.3.1预处理方法种类绿原酸具有酚羟基，在酸性溶液中稳定。同时它易溶于水和一定浓度的醇溶液中，采用水提取和甲醇提取都能达到较好的提取效果[15]。朝鲜蓟鲜叶中平均含水量为88％，因而鲜叶提取和干燥叶片提取的不同提取剂选择要将叶片中的水分考虑进去。本试验采用的是对干制的朝鲜蓟叶中绿原酸的提取与检测鉴定。通过查阅相关文献，对朝鲜蓟进行预处理的方法主要有如下几种：醇浸提法、超声波法、热回流法、树脂吸附法等。本文采用的预处理方法有两种，每一种有两种浓度：处理方法一为醇浸提法，处理方法二为超声波法。1.3.2预处理方法原理醇浸提法原理：绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸形成的酯，其分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分。在从植物提取过程中，往往通过水解和分子内酯基迁移而发生异构化。由于绿原酸的特殊结构，决定了其可以利用乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂从植物中提取出来，但是由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热[10]。建议保存时避光密封低温保存。超声波法原理：超声波是指频率高于20000赫兹(Hz)的一种人无法听见的声波超声波是一种机械波，机械振动与波动是超声波探伤的物理基础。超声波提取是利用超声波的空化效应增加溶剂穿透力，提高药物溶出速度和溶出次数，从而增加物质成分的扩散，缩短提取时间，加速提取过程。热回流法原理：将需回流提取的物质与溶媒按一定比例放入提取罐内，设置好相关的操作指标数据，通过使提取液加热至沸腾20-30分钟后，用抽滤管将1/3提取液抽入浓缩器。关闭提取罐直通和夹套蒸汽，开启加热器阀门使液料进行浓缩。这时产生二次蒸汽，通过蒸发器上升管送入提取罐作提取的热源和溶液，维持提取罐内沸腾。二次蒸汽继续上升，经冷凝器冷凝成热冷凝液，回落到提取罐内作新溶剂加到药面上，新溶剂由上而下调整通过药材层到提取罐底部，药材中的可溶性有效成份溶解于提取罐内溶剂。提取液经抽滤管抽入浓缩器、浓缩产生的二次蒸汽又送到提取罐作热源和新溶剂，从而进行抽提。大孔吸附树脂法原理：吸附是指一种物质借助某种作用使另一种物质集中分布在两相界面的过程。大孔吸附树脂是以苯乙烯和丙酸酯为单体，加入乙烯苯为交联剂，甲苯、二甲苯为制孔剂，它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。树脂一般为白色的球状颗粒。粒度为20～60目,是一类含离子交换集团的交联聚合物，它的理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响。树脂吸附作用是靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。1.3.3预处理方法分析据1.3.2所述的四种方法均可对朝鲜蓟进行预处理，并能得到本课题所需的物质，即绿原酸。热回流法操作复杂且绿原酸的获得率低，容易造成原材料的浪费；大孔吸附树脂法得率高，但操作要求非常严格，实验室条件不允许，故本课题采取的是浸提法和超声波法这两种方法对常德市本地区引进栽种的朝鲜蓟进行预处理，以便为后续的提取及检测分析做准备。1.4绿原酸的检测方法通过查阅相关文献，检测朝鲜蓟中绿原酸的含量的方法一般是高效液相色谱法，但检测朝鲜蓟中其他物质，如多酚类物质时有微波处理、紫外分光等方法[11]。考虑到试验结果的精确性，本课题采用的是高效液相色谱法。1.5本课题的研究目的与意义朝鲜蓟是由国外引进的一种多年生草本植物，在我国也只有少数地区有引种，其中云南有大面积种植，在湖南只有一定面积的引种，本课题的样品取自湖南省常德市汇美食品有限公司。朝鲜蓟的营养价值很高，其中体现在朝鲜蓟中几种功能性成分的作用上，本课题1.2中提到的几种功能性成分及其它们的生物活性，通过对朝鲜蓟中绿原酸的提取与检测分析，以期为今后对朝鲜蓟中功能性物质的检测提供一定的理论基础。2材料与方法2.1材料2.1.1原料与试剂表1试验材料原料名称产地干制朝鲜蓟常德市汇美食品有限公司甲醇（AR级）湖南汇虹试剂有限公司冰醋酸（AR级）湖南汇虹试剂有限公司甲醇（HPLC级）天津市科密欧化学试剂有限公司乙腈（HPLC级）天津市科密欧化学试剂有限公司硝酸（AR级）湖南汇虹试剂有限公司绿原酸标准品上海源叶生物有限公司超纯水湖南文理学院生命科学学院实验室蒸馏水湖南文理学院生命科学学院实验室2.1.2主要设备与仪器表2试验仪器仪器名称产地P680高效液相色谱仪美国戴安UVD170UDionexAT-330色谱柱恒温箱天津奥特赛恩斯仪器有限公司MTN-2800D氮气吹干仪天津奥特赛恩斯仪器有限公司XW-80A旋涡混合器上海沪西分析仪器厂有限公司DHG-9140型电热恒温鼓风干燥箱金坛市荣华仪器制造有限公司AUX120全自动电子天平SHIMADZUCORPORALONJAPANFW100型高速万能粉碎机天津市泰斯特仪器有限公司2.2方法2.2.1试验流程粉碎干制朝鲜蓟→称量→预处理→离心→取上清液10ml→氮吹浓缩→定容→高效液相色谱检测→数据分析→记录→打扫卫生2.2.2样品的提取提取方法分四种：方法一：将干制朝鲜蓟样品在常温下粉碎，过4号筛，精密称取10g，加入纯甲醇40ml，称总量，浸泡10h，超声波震荡30min，待室温后补齐差重，滤去残渣，进样前在经0.45µm微孔滤膜过滤，滤液直接进入高效液相色谱仪进行检测。方法二：将干制朝鲜蓟样品在常温下粉碎，过4号筛，精密称取4g，加入纯甲醇40ml，称总量，浸泡10h，超声波震荡30min，待室温后补齐差重，滤去残渣，进样前在经0.45µm微孔滤膜过滤，滤液直接进入高效液相色谱仪进行检测。方法三：取10g的已粉碎的朝鲜蓟样品粉末，加入纯甲醇40ml，浸泡10h，然后进入氮气吹扫仪进行浓缩处理，然后再配制成所需要的浓度的溶液再进入高效液相色谱仪进行朝鲜蓟中绿原酸含量的检测。方法四：取4g的已粉碎的朝鲜蓟样品粉末，加入纯甲醇40ml，浸泡10h，然后进入氮气吹扫仪进行浓缩处理，然后再配制成所需要的浓度的溶液再进入高效液相色谱仪进行朝鲜蓟中绿原酸含量的检测。2.2.3测定方法通过标准曲线的绘制，得出绿原酸具体出峰时间→在进液相之前设置好所有参数→排气泡→清洗进样针→清洗色谱柱→进样→检测→保存结果→清洗色谱柱→清洗进样针→关闭进样器、检测器、高压泵、柱温箱、电源开关→清理实验台面，盖上防尘罩→打扫卫生2.2.4具体操作步骤①根据2.2.2中设计方案，粉碎朝鲜蓟，分别称取10g、10g、4g、4g朝鲜蓟粉末于四个干净的锥形瓶中，贴上标签（A、B、C、D），等待预处理。②按照设计方案，A瓶进行的处理是：10g朝鲜蓟粉末、40ml纯甲醇、超声波处理；B瓶进行的处理是：4g朝鲜蓟粉末、40ml纯甲醇、超声波处理；C瓶进行的处理是：10g朝鲜蓟粉末、40ml纯甲醇、浸提处理；D瓶进行的处理是：4g朝鲜蓟粉末、40ml纯甲醇、浸提处理。③制备标准母液：准确称量绿原酸标准品0.0025g，用纯甲醇定容成25ml,储备液浓度为1mg/ml，稀释成六个不同浓度的标准品溶液，浓度分别是：10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml、200μg/ml,用纯甲醇稀释。④制备加标回收样品：相对应2.2.4②中的A、B、C、D四个样品液，将每种样品的溶剂（40ml纯甲醇）改成39.74ml纯甲醇和0.26ml储备母液的混合溶液，进行相应的编号（加标A、B、C、D）。⑤将预处理好的样品以及加标回收样品离心处理，4000r/min,离心10min。⑥取上清液各10ml，分别注入相应编号的试管内，密封管口。⑦用氮气吹扫仪将样品液吹干浓缩，然后，用HPLC级乙腈进行溶解定容成1ml溶液，使用旋涡混合器将粘在试管内壁的物质进行处理，使之尽可能的融进溶液中，最后，用0.45μm的滤膜过滤。⑧进入高效液相色谱仪进行检测[12]，液相条件是：采集时间：0-30min;进样体积：20μl;流速：1.2ml/min；柱温：30℃；流动相：乙腈-超纯水-冰醋酸（23:230:1.2PH3.0）波长设置有四个通道，分别为：327nm、325nm、330nm、335nm⑨结果分析。2.2.5问题与解决方案试验过程中，预处理的方案中将绿原酸进行提取之后，采用旋转蒸发器将其进行浓缩提取[13]，经试验后发现，这种提取绿原酸的方案提取出来的绿原酸损失量会比较大，并且浓缩后的量无法轻易控制，解决方案是采用氮气吹扫仪进行浓缩处理，氮气吹扫的方案对之前提到的那些问题都能有一个好的处理指标。高效液相色谱设置测定平均值时的一切指标都已设定好，但是在测定检测过程中出现终止检测的情况，无法进行一次性的批量检测，解决方案采取的是先将那些能检测完的样品检测完，最后在将那些不能检测出来的样品重新设置在一个新的文件夹中，进行另一批次的批量检测[14]。3结果与分析3.1试验结果的比较经试验，得出以上每一种预处理方法都能检测出绿原酸，绿原酸含量最高的方案对应的预处理是C组（10g朝鲜蓟粉末、40ml纯甲醇、浸提处理）其色谱图见图1、图2、图3（图1为绿原酸标准品的色谱图，图2为样品的色谱图，图3为对应加标回收样品色谱图）。图1绿原酸标准品色谱图注：此图为标准液浓度为120μg/ml的色谱图，由图可看出，绿原酸的保留时间在15min左右，峰形独立，无杂峰，峰形对称。图2C组样品色谱图图3C组对应加标回收样品图以下图4-9为其他三组所得绿原酸的液相色谱图及其对应的加标回收样品色谱图。图4A组样品色谱图图5A组样品加标色谱图图6B组样品色谱图图7B组样品加标色谱图图8D组样品色谱图图9D组样品加标色谱图由上述图可看出，绿原酸的保留时间在15分钟左右，可确定为绿原酸的峰形图，峰形均较好，比较对称，但单从色谱图看，无法确切的看出哪一组的绿原酸的提取率最高，仍需进一步的比较。样品色谱图和加标回收样品图中绿原酸的峰旁边都有一定的杂峰，杂峰虽相互独立存在，不影响目标峰的生成，但说明对朝鲜蓟的预处理方法仍有待改进。3.2标准曲线与线性方程将绿原酸保准品储备液用纯甲醇稀释稀释成六个不同浓度的标准品溶液，浓度分别是：10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml、200μg/ml。制作标准曲线，如图4所示：图4绿原酸标准曲线将“2.2.4”下制好的系列标准品溶液分别进样20μl，以其分峰面积Y与质量浓度X（mg/ml）进行线性回归，得回归方程Y=0.6659X-6.3919；线性相关系数为：R23.3绿原酸含量数据整合表3数据通道一样品绿原酸含量（mg/kg）A组17.1600B组17.8325C组30.9201D组11.6414A组加标62.3432B组加标20.2738C组加标63.8140D组加标17.8737注：表3为波长327nm时所测得的绿原酸的含量，由于每个样品都进行了三次平行试验，因此表内绿原酸含量取的是每组的平均数。表4数据通道二样品绿原酸含量（mg/kg）A组19.9141B组18.8282C组34.1795D组11.5952A组加标61.9227B组加标22.8083C组加标63.7239D组加标17.9069注：表4为波长325nm时所测得的绿原酸的含量，由于每个样品都进行了三次平行试验，因此表内绿原酸含量取的是每组的平均数。表5数据通道三样品绿原酸含量（mg/kg）A组20.0811B组18.6601C组34.2456D组11.6832A组加标62.3486B组加标23.4738C组加标64.0572D组加标18.0925注：表5为波长330nm时所测得的绿原酸的含量，由于每个样品都进行了三次平行试验，因此表内绿原酸含量取的是每组的平均数。表6数据通道四样品绿原酸含量（mg/kg）A组19.7183B组18.8472C组34.0704D组11.6734A组加标63.0156B组加标22.8177C组加标64.6288D组加标18.1333注：表6为波长335nm时所测得的绿原酸的含量，由于每个样品都进行了三次平行试验，因此表内绿原酸含量取的是每组的平均数。3.4加标前后绿原酸含量比较及回收率回收率的算法[16]如下：加标回收率=(加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%下表即各数据通道所测得的绿原酸回收率表7各数据通道所测得的绿原酸回收率组别回收率（%）通道一A组69.51通道一B组9.39通道一C组50.60通道一D组24.00通道二A组64.63通道二B组64.63通道二C组15.31通道二D组45.45通道三A组65.03通道三B组18.51通道三C组45.86通道三D组24.65通道四A组66.61通道四B组15.27通道四C组47.01通道四D组24.85加标前后绿原酸含量及回收率如表7所示，据相关文献记载，朝鲜蓟中绿原酸的回收率比较高，有达到100%[15]，本课题试验中最高的回收率为69.51%，说明本课题的试验方法及试验操作精确度有待提高。4结论朝鲜蓟的主要食用部分为花托的嫩苞片(状如百合鳞片)及肉质花托，营养价值比较高，在蔬菜、水果中名列前茅。维生素和矿物质的含量较为丰富。茂盛的叶片可制开胃酒，叶柄软化栽培后食用味道清淡。朝鲜蓟中含有绿原酸、菜蓟素、黄酮类化合物和天门冬酞胺等对人体有益的成分[18]，可增强人体胆汁分泌，促进氨基酸代谢，对增强肝、肾功能，治疗慢性肝炎，降低胆固醇有一定疗效[3]。绿原酸分子具有邻苯二酚的羧基结构，能溶于水、乙醇、乙酸乙脂等溶剂中。根据文献报道，其在甲醇中有较高的提取率[17]。本试验对朝鲜蓟采用不同的预处理方法进行HPLC含量测定，实验体现了样品的回收率及重现性[11]，试验证明，称取10g朝鲜蓟粉末、然后量取40ml的纯甲醇对朝鲜蓟粉末进行浸提处理的这个方案对绿原酸的提取率是所有方案中最高的，试验所得绿原酸最高含量为12.36804mg/kg。参考文献[1]宋曙辉,张宝海,王文琪,等.朝鲜蓟叶中绿原酸提取技术的研究[J].中国农学通报,2010,26(20):98-101.[2]姜淑敏.朝鲜蓟的开发利用及其栽培[J].中国蔬菜,1987,13(3):44-45.[3]白雪,张建丽,何洪巨.朝鲜蓟的营养与保健功能[J].中国食物与