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文档简介

实验6a-淀粉酶的固定化及1．制作固定化α-淀粉酶。2．进行淀粉水解的测定。基本要求：发展要求：通过此实验探讨固定化酶的应用价值。1、酶制剂的概念和种类（一）酶制剂含有酶的制品①定义：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶②种类：A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂

1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；

2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；

3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。(难分离）3、酶制剂的缺点1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。2、固定化酶技术的优点：（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；酶不溶解在催化反应的溶液中，产物更易纯化（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。可较长时间地贮存和使用。（二）固定化酶固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。介质本身不溶于水。固定化的方法：吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等3.固定化酶方法吸附法酶蛋白分子吸附在载体交联法交联法是指通过双功能试剂，将酶和酶联结成网状结构的方法。结合部位也不是酶的活性中心，也不是维持其空间结构的必需基团。实验原理：本实验是用吸附法将α-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成淀粉α-淀粉酶糊精β淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖这里使用的是枯草杆菌的α-淀粉酶，其作用的最适温度为50~75℃；最适PH为5.5~7.5遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色（三）实验固定化装置反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器步骤:1.将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,观察颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器淀粉实验结果12341、2mL水+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍2.实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4℃冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果.课后练习1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。如

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