食品厂涂抹试验规程

空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准1、目的：检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备 的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以 控制食品成品的质量。2、参照标准 ：中华人民共和国国家标准 《一次性使用卫生用品卫生标准》 GB15979－1995、HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN0169-92/SN0172-92/SN0170-92 、出入境检验检疫局二 000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》 、日本东京冷冻食品检验方 法。3、采样与检测方法 ：3.1空气的采样与测试方法 样品采集：取样频率：车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒情况。全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点,整改后再进行采样检验。d）实验性新产品，按客户规定频率采样检验。e）正常生产状态的采样，每周一次。叮叮小文库（2）采样方法在动态下进行，室内面积不超过 30m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙 1m;室内面积超过30m2，设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1m。采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板 （直径9cm）置采样点（约桌面高度），并避开空调、门窗等空气流通处，打开 平皿盖，使平板在空气中暴露5min。采样后必须尽快对样品进行相应 指标的检测，送检时间不得超过 6h，若样品保存于0?4°C条件时，送检 时间不得超过24h。菌落培养：（1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置 37C±1C培养24h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。（2）将已米集样品的培养基在 6h内送实验室，细菌总数于 37C±1C培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。（3）菌落计算：a） 记录平均菌落数，用“个 /皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用 5?10倍放大镜检查，不可遗漏。b）若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2个或2个以上菌落计数。3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法 : 样品采集：（1）取样频率：a）车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行擦拭检验，以便了解车 间卫生清扫消毒情2叮叮小文库况。b） 全厂统一放长假后，车间生产前，进行全面擦拭检验。c）产品检验结果超内控标准时，应及时对车间可疑处进行擦拭，如有检验不 合格点，整改后再进行擦拭检验。d） 实验新产品，按客户规定擦拭频率擦拭检验。e） 对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验。f）正常生产状态的擦拭，每周一次。（2）采样方法：a）工作台（机械器具） ：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取 与食品直接接触或有一定影响的表面）取 25cm2的面积，在其内涂抹 10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含 10mL灭菌生理盐水 的采样管内送检。b）工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦 10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含 10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。3）采样注意事项：擦拭时棉签要随时转动， 保证擦拭的准确性。 对每个擦拭点应详细记 录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间322细菌?大肠菌群的检测培养：样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。此液为 1：10稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，吸取 1ml1：10样液加 9ml无菌生理盐 水中，混匀，此液为1：100稀释液。 细菌总数：3叮叮小文库(1) 以无菌操作，选择 1?2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿 内，每个稀释度做两个平皿(平行样)，将已融化冷至 45C左右的平 板计数琼脂培养基倾入平皿，每皿约15ml，充分混合。(2)待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36C±C培养48h后计数。「结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数 大肠菌群：(1)平板法 :以无菌操作，选择1?2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿(平行样)，将已融化冷至45C左右的去氧胆酸盐琼脂培养基倾入平皿，每皿约 15ml，充分混合。待琼脂凝固后 ,再覆盖一层培 养基， 约3-5ml。b)待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36C±C培养24h后计数。1结果计算：以平板上出现紫红色菌落的个数乘以稀释倍数得出。结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数(2)试管法 :a)以无菌操作，选择 3个稀释度各取 1ml样液分别接种到 BGLB肉汤培养基中，每个稀释度接种三管。置BGLB肉汤管于36C±1C培养48±2h。记录所有BGLB肉汤管的产气管数。c）结果报告：按 BGLB肉汤管产气管数，查 MPN表报告每 25cm2食品接触面中或每只手的大肠菌群值。金黄色葡萄球菌检测1）定性检测4叮叮小文库a）取1ml稀释液注入灭菌的平皿内，倾注 15-20ml的B-P培养基，（或 是吸取0.1稀释液，用 L棒涂布于表面干燥的 B-P琼脂平板），放进 36±「C的恒温箱内培养48±2小时。b）从每个平板上至少挑取 1个可疑金黄色葡萄球菌的菌落作血浆凝固酶实验。c）结果报告：B-P琼脂平板的可疑菌落作血浆凝固酶实验为阳性， 即报告手（工器具）上有金黄色葡萄球菌存在。2）定量检测a）以无菌操作，选择 3个稀释度各取1ml样液分别接种到含 10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤培养基中，每个稀释度接种三管。b）置肉汤管于36±1C的恒温箱内培养48小时。划线接种于表面干燥的B-P琼脂平板，置36C±1C培养45?48小时。c）从B-P琼脂平板上，挑取典型或可疑金黄色葡萄球菌菌落接种肉汤培 养基，36C±1C培养20?24小时。d）取肉汤培养物做血浆凝固酶试验，记录试验结果。e）报告结果：根据凝固酶试验结果，查 MPN表报告每 25cm2食品接触面中或每只手的金黄色葡萄球菌值。3.3工厂环境中病原体的检测计划与方法检测计划： 为了保证食品安全， 工厂应该对生产环境中的病原微生物进 行检测和评估，检测项目包括李斯特菌，沙门氏菌等病原体微生物，化验 室应该按照一定的计划对生产场所环境中的病原体进行检测，其中包括地 面、下水道、 排水沟、墙壁、天花5叮叮小文库板、设备框架、运输的支架， 冷藏装置、 速冻机、传送带、设备的螺丝、维修工具等部位。当某个点检测到病员微 生物时，应该对环境中的相似点加大检测频率；在把所有的预定点检测完 后，应该对环境中的病原微生物的存在状况进行全面评估，在下一次环境检测循环过程中加强检测容易出现病原体的环境点， 达到持续改进的目的。检测频率 :每月两次 ,每次每个区域至少选取 5个检测点 ,分别进行检 测。环境李斯特菌的检测方法（ 3MTMPetrifilmTM环境李斯特菌的测 试片）用涂抹棒，海绵或者其他采样设备收集环境样本。 将收集的样本添加 10毫升灭菌的缓冲蛋白胨水，将样本与缓冲蛋白胨混合1分钟，将样品置于室温（ 20-30C）1小时，最久不超过 1.5小时，以修复损伤的李斯特菌。 将测试片放在平坦处，掀起上层膜。 用移液器垂直滴加 3毫升样品到下层膜中央， 将上层膜缓慢盖下， 以免产生气泡。 轻轻将塑料压板放在位于接种区上层膜上，不要压，扭转或者滑动压板。提起压板等至少十分钟，以使胶体凝固331.6将测试片透明面朝上，可叠放至十片，在37C±C培养26-30「小时，可以用标准菌落记数器或者其他光学放大器判读， 不要记数圆形轮廓上的菌落，因为他们不受选择性培养基的影响。对于定性检测，根据紫红色菌落是否存在，结果记为检出或者未 检出。环境中沙门氏菌的检测方法采样地点：选取采样点时因尽量选取微生物容易滋生的地方6叮叮小文库冷冻车间 FD车间传递窗口表面、排水沟、 墙壁、墙角、地面、天花板、东区初加工 卸料间排水沟出口、墙壁、地面 物料车表面地面、墙壁、墙角、排水沟、 排水东区精加工 暂存间 墙壁、地面、天花板、墙角、墙缝沟出口、速动机链条、天花板西区初 传递窗口表面、地面、墙壁、挑选间 墙壁、地面、天花板、墙角、垫板加工 排水沟、排水沟出口地面、墙壁、墙角、排水沟、排水