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耐酸耐热菌的测定(企业内控法)耐酸耐热菌的测定(企业内控法)耐酸耐热菌的测定(企业内控法)资料仅供参考文件编号:2022年4月耐酸耐热菌的测定(企业内控法)版本号:A修改号:1页次:1.0审核:批准:发布日期:耐酸耐热菌的测定(企业内控法)适用范围本方法仅适用于浓缩苹果清汁中耐酸耐热菌的测定。2、设备和材料2.1、广口三角瓶,250mL、1000mL。2.2水浴箱:80℃2.3、冰箱。2.4、量筒:50mL。2.5、灭菌镊子。2.6、酒精灯。2.7、培养箱:50±1℃2.8、玻璃铅笔。2.9、溶剂过滤器。2.10、µm滤膜:Ø50mm。2.11、真空泵。2.12、温度计。2.13、培养皿。2.14、高压蒸汽灭菌锅。3、培养基和试剂3.1、K氏培养基3.1.1、组成A:酵母浸膏1.25g蛋白胨2.50g葡萄糖0.5g琼脂7.5g吐温80将上述各种试剂放入1L的三角瓶中,加入500mL的蒸馏水,在电炉上加热溶解后,在121℃3.1.2、组成B:苹果酸1.25g将苹果酸用10mL的蒸馏水溶解,通过一次性无菌注射器和针头式过滤器连接,将苹果酸溶液过滤到已灭菌的培养基中,混匀。3.1.3、平板制作当已酸化的K氏培养基温度降至50℃3.2、蒸馏水。4、检验程序:检样适当稀释80℃无菌水膜过滤检样膜过滤膜放入平板培养基培养50±1℃菌落计数报告5、操作步骤5.1、将装有150mL蒸馏水的三角瓶、µm的滤膜、50mL量筒、过滤装置于121℃5.2、用已灭菌的50mL量筒取待检浓缩果汁50mL,加入已灭菌的盛有150mL灭菌蒸馏水的三角瓶中,混匀。5.3将稀释的样品放入80℃的水浴中,同时放置一个带有温度计的控制样,做为温度控制。观察温度计,待温度升至805.4、用已灭菌的µm的滤膜及真空抽滤装置过滤热处理后的果汁,移取抽滤装置的上部,将镊子在酒精灯上灭菌后,用镊子将滤膜移置于预先准备好的K氏培养基上,轻敲滤膜几次,使其与滤膜充分接触。同时还必须做空白对照(即用灭菌水代
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