专题二微生物的培养与应用学案

10专题二微生物的培育与应用【学习导航】本专题包含三个方面的内容：课题1.微生物的试验室培育；课题2.土壤中分解尿素的细菌的分别与计数；课题31介绍了最根本的微生物技术，是开展其他两2和课题3要求分别某种特定的微生物，难度较大，探究性也更强。此外，本专题中所强调的无菌操作技术，将有助于“专题3植物组织培育技术”的顺当完成。学生通过本专题的学习，应当把握培育基、消毒灭菌等有关微生物培育的根底学问，应当把握培育基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等根本操作技术，并可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物分别与培育等实际问题。1微生物的试验室培育【导学诱思】培育基的配制原则是 。培育基可以分为和 。培育基一般都含有 、 、 、 四类养分物质，另外还需要满足微生物生长对 、 以及 的要求。思考：为什么大多数培育基都需要含有四类养分物质？获得纯洁培育物的关键是 。避开杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：消毒是指灭菌是指思考：消毒与灭菌的一样点与区分分别是什么？6．试验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进展消毒，如用、等。常用的灭菌方法有、、，此外，试验室里还用或进展消毒。制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的方法步骤是⑴ ⑵ ⑶ ，⑷ ，⑸ 。思考：50⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，假设不留神瘵培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？微生物接种的方法中最常用的是 和 。平板划线法是指。稀释涂布平板法是指。平板划线的操作步骤如下：⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺思考：⑴为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作完毕时，仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？⑵在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进展划线？⑶在作其次次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开头划线？系列稀释操作步骤：⑴⑵⑶涂布平板操作步骤：⑴⑵⑶⑷【疑难点拨】生物的养分养分是指生物摄取、利用养分物质的过程。养分物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。在人及动物，养分物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物，养分物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类；在微生物，则有水、无机盐、碳源、氮源及特别养分物质五类。培育基的制作是否合格假设未接种的培育基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长，说明培育基的制备是成功的，否则需要重制备。无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。4．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会分散水珠，凝固后的培育基外表的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培育基外表的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染。5烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染培育物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线完毕后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目渐渐削减，以便得到菌落。划线完毕后灼烧接种环，能准时杀死接种环上残留的菌种，避开细菌污染环境和感染操作者。【典例解析】1．关微生物养分物质的表达中，正确的选项是A.是碳源的物质不行能同时是氮源 B.凡碳源都供给能量C.除水以外的无机物只供给无机盐 D.无机氮源也能供给能量解析：不同的微生物，所需养分物质有较大差异，要针对微生物的具体状况分析。对于A、B选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而NaCl则只能供给无机盐。对于D选项，无机氮源供给能量的状况还是存在的，如NH3可为硝化细菌供给能量和氮源。答案：D2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的选项是A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌C.培育基和发酵设备都必需灭菌 D.灭菌必需在接种前解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的，由于发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物〔杂菌BC是正确的，由于与发酵有关的全部设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后特地接种的，灭菌必需在接种前，假设接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。答案：B编号①成分粉状硫含量编号①成分粉状硫含量10g②〔NH〕40.4g2 4SO③④⑤⑥⑦KHPO24MgSO4FeSO4CaCl2HO24.0g9.25g0.5g0.5g100ml右表培育基可培育的微生物类型是 。假设不慎将过量NaCl参加培育基中。如不想铺张此培育基，可再参加 ，用于培育 。2假设除去成分②，参加CHO，该培养基可用于培育 。2表中养分成分共有 类。不管何种培育基，在各种成分都溶化后分装前，要进展的是 。右表中各成分重量确定的原则是 。假设右表培育基用于菌种鉴定，应当增加的成分是 。解析：对于一个培育基，它能培育何种微生物，要看它的化学成分。固然这只适用于合成培育基，假设是一个自然培育基就不能从培育基的成分上区分它是培育何种微生物的。分析化学成分要从养分物质的类型动身。右表中的养分物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特别养分物质。对特别养分物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。该培育基中没有碳源，说明培育的微生物是从空气中获得碳源的，即可培育的微生物就是自养型微生物了。该培育基中参加了过量食盐，就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培育基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培育基就还需要参加有机碳源。该培育基假设参加〔CHO，培育基中就有了碳源，但除去成分②，却使培育基中没有了氮源，这时就只能用于培育固氮微生物了。对于菌种鉴定，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要参加常见的凝固剂——琼脂。答案：⑴自养型微生物 ⑵含碳有机物 金黄色葡萄球菌 ⑶固氮微生物⑷3 ⑸调整pH ⑹依微生物的生长需要确定 ⑺琼脂〔或凝固剂〕【课堂演练】一、选择题﹙﹚有可能作为异养微生物碳源的是A．牛肉膏 B．含碳有机物 C．石油 D．含碳无机物2．根瘤菌能利用的养分物质的组别是ANH〔CHO，NaCl ．N〔CHOCaCl3 2 2 2 2C．铵盐，CO，NaCl D．NO，CO，CaCl2配制培育基的表达中正确的选项是

2 2 2A．制作固体培育基必需参加琼脂 B．参加青霉素可得到放线菌C．培育自生固氮菌不需氮源 D．发酵工程一般用半固体培育基4．自养型微生物与异养型微生物的培育基的主要差异是生物硝化细菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒状杆菌A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特别养分物质5．下表是有关生物硝化细菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒状杆菌能源氧化NH3N2分解糖类等有机物光能碳源C02糖类糖类糖类氮源NH3N2NH+、NO-4 3尿素代谢类型自养需氧型异养需氧型异养兼性厌氧型自养需氧型A．根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌 B．硝化细菌、酵母菌C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌 D．硝化细菌、根瘤菌6．甲、乙、丙是三种微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培育微生物的三种培育基。甲、乙、丙都粉状硫10gK粉状硫10gKHPO2 44gFeSO4蔗糖10g〔NH〕SO4 2 40.4g2100MgSO49.25CaCl20.5gⅠ++0.5g++-ml+g++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++A、甲、乙、丙都是异养微生物B、甲、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物7．微生物〔除病毒外〕需要从外界吸取养分物质并通过代谢来维持正常的生长和生殖。以下有关微生物养分的说法正确的选项是A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是一样的B．微生物生长中不行缺少的一些微量的无机物称为生长因子C．培育基中的养分物质浓度越高对微生物的增殖越有利D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的力量往往缺乏。8．某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸〔20种氨基酸中的一种〕才能生长，此菌株对链霉素敏感。试验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。依据试验年目的，选用的培育基类型是〔 〕注：Ｌ—亮氨酸 Ｓ—链霉素 “＋”—参加 “—”—不参加B如：Ｌ—：不加亮氨酸 Ｓ＋：参加链霉素选项株筛选出不需要亮氨酸的菌筛选出抗链霉素的菌株筛选出不需要亮氨酸的抗链霉素的菌株ＡＬ＋ Ｓ＋Ｌ— Ｓ—Ｌ＋ Ｓ－ＢＬ－ Ｓ—Ｌ＋ Ｓ＋Ｌ— Ｓ＋ＣＬ— Ｓ＋Ｌ＋ Ｓ＋Ｌ— Ｓ—ＤＬ＋ Ｓ—ｌ— Ｓ—Ｌ＋ Ｓ＋要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他的细菌分别出来，应将它们接种在A．参加氮源和杀菌剂的培育基上 B．不参加氮源和不加杀菌剂的培育基上C．参加氮源，不加杀菌剂的培育基上 D．不含氮源和杀菌剂的培育基上10．酵母菌培育液中常含有肯定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，缘由是A．碳源供给太充分 B．细胞会发生质壁分别C．转变了酵母菌的pH值 D．葡萄糖不是酵母菌的原料11．含C、H、O、N的某大分子化合物可以作为A.异养微生物的氮源、能源 B.异养微生物的碳源、能源C.自养微生物的碳源、氮源、能源 D.异养微生物的碳源、氮源、能源二、非选择题12．培育蘑菇时常使用的原料为棉花壳、花生粉饼、朽木等，再喷洒适量的水，参加肯定量的尿素等。请答复以下问题：按化学成分分类，该培育基为 培育基，按物理性质分类该培育基为培育基。〕培育过程中觉察培育基上长出了其他杂菌，经鉴定为细菌，细菌与蘑菇的关系为，在培育基上施用适量的即可抑制细菌生长。〔3〕蘑菇的代谢类型为在生态系统的成分中属于。1〔〕自然 固体 〔2〕竞争 青霉素 〔〕异养需氧型 分解者1〔22分〕下表为一种培育液的配方。成分成分NHHCO4 3KHPO2 4CaSO4FeCl2维生素含量0.5g3.0g0.5g0.5g少许21000mL请据表中内容答复：该配方假设用于培育微生物，则该生物的同化作用类型是 ；假设用该配方来培育圆褐固氮菌，则应参加 和 ，并可以除去的成分是 。在培育圆褐固氮菌之前需对培育基进展灭菌，否则会有其他杂菌生长，圆褐固氮菌与其他杂菌的关系为 。假设从自然界分别得到的样品中含有谷氨酸棒状杆菌、圆褐固氮菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌等，现欲筛选出金黄色葡萄球菌，则简便的方案是 。将大肠杆菌的质粒取出连接上人生长激素的基因以后重置入大肠杆菌细胞内然后，用这种带有人生长激素基因的工程菌进展发酵，就能得到大量的人生长激素。在大规模生产中，需要将选育的工程菌菌种经过屡次扩大培育，再进展接种，扩大培育选期的细菌，并通入无菌空气；假设把大肠杆菌接种到葡萄糖和乳糖的培育基中，只有葡萄糖全被消耗后才合成半乳糖苷酶来利用乳糖。这一事实说明半乳糖苷酶属于 ，该调节方式的意义是 ，增加了大肠杆菌对环境的适应力量。13.〔22〕〔1〕〔每空2分，共10分〕自养型 有机碳化合物〔或碳源〕生长因子氮源〔NHHCO〕4 3竞争24分〕配制普遍培育基后参加高浓度食盐〔3〕对数期诱导酶〔2〕既保证微生物代谢的需要，又不铺张物质和能量〔4〕14．谷氨酸是生物体内一种重要的有机小分子，谷氨酸钠是它的钠盐，是味精等调味品的主要成分。目前利用微生物发酵生产的氨基酸中，谷氨酸是产量最大的种类之一。谷氨酸的R基为—CH—CH－COOH，其构造式为 。2 2假设在蛋白质合成过程中，携带谷氨酸的转运 RNA为GAG，可知谷氨酸的密码子为 。我国微生物发酵工程生产谷氨酸常用的菌种有北京棒状杆菌谷氨酸棒状杆菌和黄色短杆菌等，以下生物中与这些菌种在构造上存在明显区分的有 。A．噬菌体 B．人类免疫缺陷病毒〔HIV〕C．禽流感病毒 D．肺炎双球菌E．酵母菌G．硝化细菌 H．乳酸菌可以推断谷氨酸棒状杆菌的陈代谢类型是 型某厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸，结果代谢产物中出现了大量的乳酸，其原因很可能是 。谷氨酸发酵生产过程中需要添加氨水它不仅是细菌生长所需的 ，而且起到调整培育液 的作用，所以应当分次参加。某厂的发酵液曾不慎被噬菌体污染菌群死亡殆尽但人们却幸运从中获得了少数可抵抗噬菌体的菌种，细菌这种性状的产生来自于 。如下图连续培育的方法以肯定的速度不断添加的培育基，同时又以同样的速度放出旧的培育基，此工艺流程可以大大提高生产效率，试阐述其缘由 。1〔22分〕NH2|(1)HOOC—C—CH| H

—CH2

—COOH〔2〕GAG〔2〕ABCE〔2〕异养、需氧通气量缺乏〔4〕氮源pH〔4〕基因突变〔或突变〔2分〕①保证微生物对养分物质的需求②排出局部代谢产物③使微生物保持较长时间的快速〔6〕课题2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数【导学诱思】尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸取利用。以土壤中能分解尿素的细菌为争辩对象，要到达的两个主要目的是：⑴；⑵。3．PCR〔〕是一种在体外将。此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。思考：怎样找耐高温的酶呢？试验室中微生物的筛选应用的原理是：人为供给有利于 生长的条件〔包括等，同时抑制或阻挡其他微生物生长。选择培育基是指 。常用来统计样品中活菌数目的方法是 。即当样品的稀释度足够高时，培育基外表生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进展计数。另外， 也是测定微生物数量的常用方法。需要改进呢？如需要，如何改进？一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是由于。因此，统计结果一般用 而不是活菌数来表示。设置比照试验的主要目的是 ，提高试验结果的可信度。比照试验是。试验设计包括的内容有： 、 、 和 ，具体的试验步骤以准时间安排等的综合考虑和安排。不同种类的微生物往往需要不同的培育 和培育 在试验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以。无菌操作应留意什么问题？⑴⑵⑶在进展多组试验过程中，应留意做好标记，其目的是 。思考：应标记哪些内容？怎样操作更有利于试验的进展？对所需的微生物进展初步筛选，只是分别纯化菌种的第一步，要对分别的菌种进展一步的鉴定，还需要借助 的方法。思考：有哪些方法可以对菌种进展鉴定？【疑难点拨】选择培育基选择培育基的含义是：在培育基中参加某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分别所需要的微生物。在培育基中参加某种化学物质可以做到这一点，如参加青霉素可以分别出酵母菌和霉菌。参加高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的参加是在培育的培育成分的根底上参加的。培育基中的养分成分的转变也可到达分别微生物的目的。如培育基中缺乏氮源时，可以分别固也具有分别效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，到达分别能消退石油污染的微生物的目的。转变微生物的培育条件，也可以到达分离微生物的目的，如将培育基放在高温环境中培育只能得到耐高温的微生物。如何从平板上的菌落数推想出每克样品中的菌落数？统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进展计算。为什么分别不同的微生物要承受不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围一样吗？〔/Kg〕218547723.1万。因此，为获得【典例解析】例1．对细菌群体生长规律测定的正确的表述是A．在液体培育基上进展 B．至少接种一种细菌C．接种一个细菌 D．准时补充消耗的养分物质解析：细菌群体生长规律的测定是人们在肯定条件下进展的。这些条件是：一种细菌、恒定容积的培育基，液体培育基、定时测定细菌总数。在这些条件下，才能测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；恒定容积是给微生物供给肯定的生存环境；液体培育基才能通过样品推想细菌总数。假设接种多种细菌，则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保证肯定的接种量。答案：A例2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最剧烈的时期是A．调整期 B．对数期 C．稳定期 D．衰亡期解析：种内斗争是一种生态因素。种内斗争反响了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕，养分充分的时候，种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加，每个种内斗争就越来越剧烈。由此可知，在稳定期的种内斗争最剧烈。在衰亡期，微生物的数目已经开始削减，pH已经极度不适于微生物的生存，次级代谢产物积存到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。答案：C例32022年江苏〕业经久不衰。其中青霉素的觉察和应用具有划时代的意义。⑴青霉素发酵产生青霉素青霉菌的陈代谢类型是 ，青霉素是青霉菌的 代谢产物。⑵在生产和科研中，常选用处于 期的青霉菌作为菌种或争辩材料，由于此时的青霉菌代谢旺盛， 和 比较稳定。⑶对青霉菌菌体生长状况的测定：取肯定体积的发酵液，经离心分别、反复洗涤后， ，再计算发酵罐中菌体的总重量。解析：青霉菌属于真菌，其代谢类型应为异养需氧型，而青霉素作为它的代谢产物，并不是它生长、生殖所必需的，所以青霉素应属于次级代谢产物。在测定培育基上青霉菌菌体的生长状况时，常用的方法有两种：一种是测量青霉菌的细胞数目，另一种是测重量，取肯定体积的发酵液，经离心分别、反复洗涤后，称菌体的湿重，或烘干后称干重，再由此计算出其中的细胞总重量。在细菌生长的四个主要时期中，由于处于对数期的细菌代谢旺盛，个体的形态和生理特性比较稳定，常作为生产用的菌种和科研的材料。答案：⑴异养需氧型 次级 ⑵对数 个体的形态生理特性 ⑶称菌体的湿重〔称烘干后的重量〕【课堂演练】一、选择题在一个“淀粉—琼脂”培育基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此试验装置放在37℃恒温箱中，保温处理24h5个圆点上，其试验结果记录于下表：〔C〕淀粉圆点①②③④⑤

试验处理方法颖唾液与盐酸混合经过煮沸的颖唾液接种面包霉只有颖的唾液只有肯定浓度的蔗糖溶液

碘液处理后的颜色反响蓝黑色蓝黑色棕黄色？？请指出④和⑤所发生的颜色反响，以及③接种的面包霉的分泌物分别是A．棕黄色、棕黄色、淀粉酶 B.蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C．棕黄色、蓝黑色、淀粉酶 D.棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶33种细菌在事先预备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线3条线均与以下图中的链霉素带接触，将平板置于3℃条件下恒温培育3天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是〔D〕A．链霉素能阻挡结核菌的生长 B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D．链霉素可以用于治疗伤寒病人3.利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌4．以下操作不属于微生物的分别步骤的是A．稀释 B．划线或涂布 C．接斜面 D．培育5．影响微生物生长的主要环境因素是A．阳光、温度、水分 B．温度、水分、PH C．水分、PH、氧 D．温度、PH、氧6.以下微生物的产物中没有菌种特异性的一组是A．氨基酸、核苷酸、多糖、色素 B.多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸C．核苷酸、多糖、维生素、毒素、抗生素D．核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸7．微生物代谢的人工把握是指A.转变微生物的遗传特性 B.把握发酵时的温度C.调整发酵过程中的pH，氧气通入量 D.包括A、B、C三项8．在微生物群体生长规律的测定中，不行能发生的是A.生殖 B.生存斗争 C.种间斗争 D.种内斗争9．与调整期长短有关的因素中，可缩短调整期的一组是①用与菌种一样的培育基 ②养分丰富的培育基 ③稳定期获得的菌种 ④对数期获得的菌种 ⑤接种时间提前 ⑥接种量加大 ⑦接种量减小 ⑧接种种类加大A、①③⑤⑦ B、②③⑤⑦ C、①④⑥ D、②④⑤⑥⑧10．微生物群体生长善的测定方法可以是①测定样品的细胞数目 ②测定次级代谢产物的总产量③测定培育基中细菌的体积 ④测定样品的细胞重量⑤测定初级代谢产物的总产量A.②④ B.①④ C.①③⑤ D.②③④二、非选择题11．以下图示酵母菌细胞的构造模式和生长曲线图，据图答复：从细胞核的构造看酵母菌属于 生物假设觉察一种酵母菌细胞核中17条染色体，该酵母菌是 倍体。图中(1)的构造名称为 。酵母菌细胞分裂的意义是( )A.产生个体 B.增加生产力 C.增加变异性 D.转变遗传性用酵母菌制啤酒时，为保证发酵罐中有较多的酵母菌，必需先通入氧气，到达肯定数量后，则应当密闭，以获得大量的酒精，这充分说明酵母菌的异化作用类型是 。争辩发酵罐中酵母菌的生长状况常用取样统计分析推断取样先后挨次的最简洁的方法是测定发酵罐中的 。A.氧气量B.葡萄糖量C.酒精量D.pH值(6)欲收获酵母菌或其代谢产物，应选择曲线中的 段。(7)自然环境中的酵母菌属于生态系统中的 成分。(15)(1N250C0中连续培育假设干小时，其间每30min测定一次菌数，测得数量变化曲线如以下图所示。请分析并答复以下问题：①乳酸菌以 方式生殖，这代表 类生物普遍具有的生殖方式。②用N表示总菌数，Nt表示增殖世代数，乳酸菌数量增长的数学表达式为0N=N2t30minN=10000 0时，连续培育5h，总菌数可达 个。③在实际培育条件下乳酸菌增长速度与抱负条件下乳酸菌增长速度不同假设5h前的总菌数等于活菌数请在上面的图中将5h后活菌数的变化趋势用曲线表示出来造成菌群密度变化的外界因素是 。④培育基中不断产生的乳酸来自乳酸菌的 作用。⑤试验过程中，为什么要在25℃的条件下进展? 。(2)某同学进展了温度对酶活性影响的争辩，设计了如下试验：试验步骤：①取三支试管，分别参加质量分数为3％的可溶性淀粉溶液。25℃、60℃的水中和冰块中，在三支试管中分别参加质量2％pH=6.8pH=45min。1结论：温度过高或过低都影响酶的活性。请答复：该试验能否得出上述试验结论?。指出步骤中不正确之处并在此根底上加以订正或补充相应的内容。。下面是觉察和争辩青霉素的过程：问题：在培育细菌的培育基中，觉察青霉菌，在其四周没有细菌生长。没有青霉菌的培育基内布满了细菌。问题：在培育细菌的培育基中，觉察青霉菌，在其四周没有细菌生长。没有青霉菌的培育基内布满了细菌。假设：试验：把青霉菌放入培育液内培育，一段时间后除去青霉菌，并用这种培育液培育细菌，观看细菌的生长状况。结果：这种培育液阻挡了细菌的生长和生殖。结论：青霉菌可产生一种阻挡细菌生长生殖的物质。请答复：⑴该试验的假设是 。⑵以上试验还缺乏以论证以上结论，请在以上试验的根底上，补充相应的试验方法。答案：1—5 CDCCD 6—10DDCCB11．(1)真核；单 (2)芽体 (3)A(4)兼性厌氧型(5)D (6)EF (7)分解者12．(1)分裂生殖(或无性生殖)原核(或单细胞)②1024000③如以下图(会绘曲线呈下降趋势给分)养分物质削减④无氧呼吸(或乳酸发酵)⑤25℃时有利于酶的催化功能(或25oC 时酶的催化效率高)(2)[1]按此试验步骤不能得出以上试验结论[2]A、B、C3％2mL．③试验组与比照组未遵循单一变量原则，两组中存在酸碱度和温度两个变量，应只有温度一个变量，酸碱度应全都pH6.8。13．⑴青霉菌可能阻挡了其他细菌的生长和生殖。⑵增加比照试验。具体方法为：将另一组一样的细菌放在未培育过青霉菌的，其他成分完成一样的培育液中，在完全一样的环境中进展培育，观看其生长生殖状况。课题3 分解纤维素的微生物的分别【导学诱思】纤维素是 类物质， 是自然界中纤维素含量最高的自然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 、 和，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长供给养分，同样，也可以为人类所利用。在做纤维素酶分解纤维素的试验过程中，假设没有摇床，可以承受何种方法代替？筛选纤维素分解菌可以用 法，这种方法能够通过 直接对微生物进展筛选。在土壤中取样的方法有：① ；②。刚果红是一种 ，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反响。思考：①怎样利用刚果红的这一特点来筛选纤维素分解菌？②利用刚果红染色的方法有几种？各自的优缺点是什么？分别分解纤维素的微生物的试验流程图如下： → →梯度稀释→- 。思考：⑴此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培育流程图有何异同？⑵为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌？⑶将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？【疑难点拨】分别分解纤维素的微生物的试验流程与稀释液的取样培育流程图有何异同？它们的区分是：稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培育基上，直接分别得到菌落。分别分解纤维素的微生物的试验流程通过选择培育，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培育基上。其他步骤根本一样。将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚拢，实际上是人工设置纤维素分解菌的生存的适宜10cm左右腐殖土壤中。两种刚果红染色法的比较刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，在本课题中我们给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，参加刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反响根本上纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂的问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物消灭假阳性反响。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透亮圈较为模糊，由于培育基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透亮圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的力量，它们在长时间培育过程中会降解刚果红形成明显的透亮圈，与纤维素分解菌不易区分。为什么选择培育能够“浓缩”所需的微生物？在选择培育的条件下，可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速生殖，而那些不适应这种养分条件的微生物的生殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。【典例解析】1．有关谷氨酸发酵的表达中正确的选项是A．发酵中要不断通入空气 B．培育条件不当将不能得到产品C．搅拌的唯一目的是使空气成为小泡 D．冷却水可使酶活性下降解析：进展谷氨酸发酵的菌种是异养需氧型微生物，所以要在培育过程中不断通入空气，但是必需通入的是无菌空气，一般空气是不行的，简洁造成杂菌污染。搅拌不但使空气成为小气泡以增加培育基中的溶氧量，还能使培育基与菌种充分接触，提高原料的利用率。在培育过程中，由于微生物的代谢产热和机械磨擦生热，会使培育基的温度上升，高到肯定程度，就会使酶的构造和核酸的构造遭到破坏，培育会因此而受到影响。降低温度，是保证酶正常活性的条件之一而不会使酶的活性下降。当培育条件不恰当时，不能得到谷氨酸。如pH降低时将得到乙酰谷氨酰胺，溶氧低时将得到乳酸或琥珀酸。答案：B例2．温度对发酵过程的影响，不正确的选项是A．温度过高，发酵周期缩短，产量降低 B．温度不影响生物合成的途径C．温度能影响菌种对养分物质的吸取D．菌体生长和产物合成所需的最适温度不肯定一样解析：解答此题需要从以下几方面入手分析：第一，发酵过程需要适宜的温度，假设温度过高，酶很快失活，菌体年轻，发酵周期就会缩短，产量也会降低；其次，温度能影响生物合成的途径，这是由于生物合成过程需要酶，酶的活性与温度凹凸有关；第三，菌种吸取养分物质一局部是通过主动运输来完成的，需呼吸作用供给能量，这与温度有关；第四，菌体生长和产物合成需体内旺盛答案：B例32022年北京卷〕人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌〔目的菌。试验的主要步骤如以下图所示。请分析答复以下问题：⑴培育基中参加化合物A的目的是筛选 ，这种培育基属于 培育基。⑵“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培育基中的 ，试验需要振荡培育，由此推想“目的菌”的代谢类型是 。⑶培育假设干天后，应选择培育瓶中化合物A含量 的培育液，接入的培育液中连续培育，使“目的菌”的数量 。⑷转为固体培育时，常承受 的方法接种，获得单菌落后连续筛选。⑸假设争辩“目的菌”的生长规律，将单个菌落进展液体培育，可承受 的方法进展计数，以时间为横坐标，以 为纵坐标，绘制生长曲线。⑹试验完毕时，使用过的培育基应当进展 处理后，才能倒掉。解析：题干中首先说明白A是有机物，后来在培育基中双增加了磷酸盐、镁盐以及微量元素，通过比较各培育瓶中AA，是异养型。获得“目的菌”种后，选进展扩大培育，培育过程中及培育完毕后留意灭菌。答案：⑴目的菌 选择 ⑵化合物A 异养需氧型 ⑶削减 增加 ⑷划线 ⑸定期取样“目的菌”数目的对数 ⑹灭菌【课堂演练】1．下面是弗来明对青霉素的早期争辩过程：觉察问题：在培育细菌的器具中觉察一种青霉菌，在这种青霉菌的四周有没有其它细菌生存?为什么会产生这种现象?提出假设：设计试验：在液体中培育青霉菌后，考察这种液体对细菌增殖的影响。试验结果：培育液使细菌的增殖停顿。结论：下面几项最适合作为该试验假设的是A．青霉菌与细菌之间是共生关系 B．青霉菌污染了细菌生存的环境C．青霉菌产生了对人体有益的物质 D．青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质2．培育流感病毒时，应选用A．固体培育基 B．含有多种无机盐的培育液C．活的鸡胚 D．无菌的牛肉汤3．以下关于微生物对氧的需求的表达中正确的选项是A．产甲烷杆菌属厌氧呼吸，但氧的存在不影响其生存B．链球菌进展厌氧呼吸，不能接触空气C．黄色短杆菌在氧气充分时才能产生谷氨酸D．谷氨酸棒培育杆菌是厌氧呼吸4．可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不行逆破坏的环境加素是A．高温 B.养分成分的变化 C.氧含量 D.温度、pH、氧的共同作用5．微生物〔除病毒外〕需要从外界吸取养分物质并通过代谢来维持正常的生长和生殖。以下有关微生物养分的说法正确的选项是A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是一样的B．微生物生长中不行缺少的一些微量的无机物称为生长因子C．培育基中的养分物质浓度越高对微生物的增殖越有利D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的力量往往缺乏6．以下有关味精生产的一些措施的表达，正确的选项是A．常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌和金黄色葡萄球菌B．培育基是含有五种养分成分的合成培育基C．在发酵中要把握的只是温度、pH、通气量D．味精是谷氨酸经NaCO中和后，再经过过滤、浓缩、离心分别而成2 3菌落形成的根本缘由是A．细菌有鞭毛 B．细菌能运动C．培育基有琼脂 D．子细胞成为群体在接种操作的过程中，不正确的选项是A．要将接种环灼烧灭菌 B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D．接种后还要将管口灭菌加塞9．高压蒸气灭菌的原理是A．高压使细菌DNA变性B．高压使细菌蛋白质凝固变性C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性10．某种细菌每30分钟分裂一次，开头接种时为3个细胞，在对数生长期培育5个小时后，问此时有多少细胞？A．15 B．48 C．1024 D．30721〔10分〕面的试验，分别得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。试验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培育条件下生长生殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌的生长生殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长生殖。〔略(3)主要步骤：①制备两种培育基，一种是 培育基，另一种是 培育基，将两种培育基各自分成两份，依次标上A、a和B、b。②分别向A、B3—4③分别从A、B培育基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培育基中，适宜条件下培育3—4(4)请同答：①将题中的空处填充完整： 培育基和 培育基。②本试验中，依据上述原理配制的培育基的类型属于 培育基。③依据所需目的配制上述培育基时除养分要协调外还应留意 。④试验步骤中第③步的目的是 。⑤圆褐固氮菌与酵母菌在构造上的主要差异为 。⑥青霉素抑制圆褐固氮菌的生长生殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推想不影响酵母菌等真菌生长生殖的缘由是 。12．(71取培育皿A假设干(AAAB(BBB)，1 2 3 1 2 3参加含青霉素的细菌培育基。2将适量细菌培育液涂抹在培育皿A的培育基外表，放在适宜的条件下培育一段时间，1培育基的外表会消灭一些细菌菌落。3A上轻轻盖一下，再在B上轻轻盖一1 1下，这样A中的细胞就按肯定的位置准确的“复制”到了B之中。将B培育一段时间1 1 1后，B中肯定部位消灭了少量菌落。14B中菌落消灭的方位，将A中对应位置的菌落取出，均匀涂抹在A外表，培育一1 1 2段时间后，培育基外表又会消灭很多菌落。反复重复步骤3、4，在B2、B3„„中保存下来的菌落越来越多。直到最终，全部“复制”到B中的菌落全都保存下来，都具有对青霉素的抗药性。一般培育基中的养分要素物质有。依据培育基的用途，加人青霉素的培育基属于 。试验过程中为了缩短时间，最好在细菌生长的哪一个时期接种?细菌抗药性的产生是细胞消灭 的结果依据现代进化理论青霉素在细菌抗药性形成过程中起 的作用。试验中所用的细菌的代谢类型属于 。假设B1中没有菌落保存下来试验就无法进展下去假设要使试验进展下去可以承受的方法有 。1〔9分〕别。试验原理：作为运载体的质粒，需有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。有抗性基因的质粒可用做运载体。10接种环、一次性注射器、无菌水、恒温箱方法步骤：第一步其次步第三步预期：1—5DCCAD6—10DDCBD11．(4)①无氮含青霉素的②选择③pH要适宜④分别得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌⑤圆褐固氮菌无成形的细胞核⑥圆褐固氮菌为原核生物，其细胞壁主要为糖类和蛋白质，而酵母菌则不同12．(1)碳源、氮源、生长因子、无机盐和水选择培育基对数期基因突变选择异养需氧型用适量紫外线照耀一段时间(其它引起基因突变的方法也行)931、2、33个培育基中注入1其次步：将接种环在酒精灯上灼烧，并在酒精灯旁取菌种接种于33724预期：1号培育皿中的细菌正常生长，2、3号培育皿的细菌能正常生长的说明有抗性基因。仅232、3活的，说明该质粒上有两种抗性基因〔213分〕专题学问归纳培育基

培育基的类型培育基的养分物质避开杂菌污染的方法微生物的试验室培育

无菌技术 试验室常用的消毒方法试验室常用的灭菌方法计算称量制备牛肉膏蛋白溶化胨固体培育基灭菌倒平板平板划线法纯化大肠杆菌结果分析与评价课题延长

称释涂布法PCR技术筛选菌株 试验室中筛选微生物的原理选择培育基稀释涂布平板法微生物的培

土壤中分解尿素的

统计菌落数目设置比照

显微镜直接计数法设置比照的目的比照试验的概念土壤取样养与应用

细菌的分别与计数

试验设计 样品的稀释微生物的培育与观无菌操作操作提示 做好标记规划时间结果分析与评价课题延长纤维素与纤维素酶纤维素分解菌的筛选

纤维素酶的组成成分纤维素酶分解纤维素的试验刚果红染料筛选纤维素分解菌的依据土壤取样分解纤维素的微生物的分别

试验设计 选择培育刚果红染色法复习微生物技术操作提示结果分析与评价19延长

选择培育的操作方法20一、选择题﹙2550分﹚

专题学问检测将接种了红色细菌的培育皿置于紫外线下几天，结果培育皿中除长了一个白色菌落外，其余菌落都是红色的，据此，试验者应当A.暂不作结论 B.断定是紫外线产生了白色菌落的变异C.假设不连续用紫外线照耀，预期那个白色菌落将转变为红色D.断定白色菌落是一种可遗传的变异〔甲为绿藻，乙为酵母菌。造成这种结果的缘由是培育液中A．缺少无机盐B．氧气含量太高C．缺少有机养分D．不含二氧化碳以下关于细菌代谢的表达中，正确的选项是A．细菌没有细胞器，只能进展无氧呼吸B．细菌的蛋白质合成在自身的核糖体上进展C．细菌的代谢终产物也是CO2和H2OD．细菌的贮存颗粒是蛋白质、淀粉、脂肪等法不包括：A．依据微生物对碳源需要的差异，使用含不同碳源的培育基B．依据微生物缺乏生长因子的种类，在培育基中增减不同的生长因子C．利用高温高压消灭不需要的杂菌D．依据微生物对抗生素敏感性的差异，在培育基中参加不同的抗生素5．要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分别开来，应将它们接种在A．含五大类养分物质的培育基上 B．参加某种指示剂的鉴别培育基上C．含蛋白胨等养分物质的培育基上 D．无氮的选择培育基上6．将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培育基上，经过一段时间培育，就能够得到A．菌丝 B．无肯定形态的群体 C．单个细菌 D．菌落7．在试验室里，从土壤里分别出自生固氮菌所需的培育基属于A．自然培育基 B．鉴别培育基 C．选择培育基 D．液体培育基8．在土壤中含有自生固氮微生物比较多的是A．表层土壤 B．中层土壤 C．底层土壤 D．全部的土层都是一样的9．以下操作与灭菌无关的是A．接种前用火焰烧灼接种环 B．接种前用酒精擦拭双手C．培育基在50℃时搁置斜面 D．接种在酒精灯的火焰旁完成10.某人利用乳酸菌制和泡菜因操作不当泡菜腐烂。以下缘由中正确的选项是①罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长生殖②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长生殖③罐口封闭不严，氧气抑制了其他腐生菌的生长和生殖④罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和生殖A．①③ B．②④ C．②③ D．①④，其缘由是A．温度把握不适 B．通气量过多 C．pH呈酸性 D．溶氧缺乏家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸可以抑制其它微生物的生长．当环境中的乳酸积存到肯定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖．下面对这些现象的描述不正确的选项是A．在乳酸菌的调整期和对数期，种内关系主要表现为互助B．进入乳酸菌增长的稳定期，由于次级代谢产物的积存，种内斗争趋于剧烈C．密闭的发酵环境使乳酸菌在调整期和对数期的种间斗争中占据优势D．进入稳定期，泡菜坛内各种生物的抵抗力稳定性维持在较高的水平13．假设将某种细菌置于有养分的物体上，它会生殖并形成细胞群〔如以下图。有什么适当的试验可以用来检验两种抗生素的杀菌效用？下表表示在不同培育基中细菌的生长生殖状况〔E、F、G、H、I、J、K、M为培育基的成+，请分析以下哪种物质细菌不能合成。培育基成分生长状态A、B、C—A、培育基成分生长状态A、B、C—A、B、CI、M—A、B、CH、K+A、B、CM、J—A、B、CI、K+A、B、CH、J—A、B、C+如以下图是红色面包霉(一种真菌)通过一系列酶将原料合成它所需要的氨基酸。据图分析：以下表达正确的选项是假设基因A被破坏，则向培育基中加人鸟氨酸，面包霉仍能存活假设基因B被破坏，则向培育基中加人鸟氨酸，面包霉仍能存活假设基因B不存在，则瓜氨酸仍可由鸟氨酸合成C不能把握酶C观看右边真菌细胞内有关代谢过程图，选出提高氨基酸B产量的最正确措施〔 〕A．利用CaCl2增大该真菌细胞壁的通透性B．大量投放丙酶C．加大接种量和投料量D．诱变处理该真菌，选育出不能合成乙酶的菌种作为生产菌种17．单细胞蛋白是指A．单个植物细胞培育得到的高纯度蛋白质B．单个动物细胞培育得到的高纯度蛋白质C．单个细菌细胞分泌的蛋白质D．通过发酵获得的大量微生物菌体18．关于灭菌和消毒的不正确的理解是A．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是一样的 C．接种环用烧灼的方法灭菌D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法19．在培育基的配制过程中，具有如下步骤，其正确挨次为①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培育基的分装 ⑥称量A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④ C．⑥①②⑤④③ 20．关于菌种的选育不正确的选项是A．自然选育的菌种不经过人工处理 B．诱变育种原理的根底是基因突变C．通过有性杂交可形成工程细胞 D．承受基因工程的方法可构建工程菌21．用发酵工程生产单细胞蛋白可用来制成“人造肉”供人食用，这种蛋白是A．微生物菌体 B．微生物代谢产物 C．微生物合成物质 D．发酵液22．谷氨酸棒状杆菌扩大培育时，培育基应当是A．C∶N为4∶1 B．C∶N为3∶1 C．隔绝空气 D．加大碳源、氮源比例23．关于微生物代谢的调整正确的一项为哪一项A．环境中存在某种物质时，微生物才能合成分解此物质的酶，该酶肯定是组成酶B．某种代谢产物在细胞内的积存，将直接导致形成此物质的酶活性下降C．只有转变微生物的遗传特性，才能实现对微生物代谢的人工把握D．一般状况下，增大细胞膜的通透性，可解除代谢产物对酶活性的抑制24．科学家通过对黄色短杆菌进展诱变处理，选育出了不能合成高丝氨酸脱氢酶的菌种，从而到达了黄色短杆菌大量积存赖氨酸的目的，这种人工把握的方法实质上利用了以下哪种调整方式？A．酶合成的调整 B．酶活性的调整 C．二者都有 D．二者都无25．以下表达正确的选项是A．酶合成的调整和酶活性的调整不能同时存在B．诱导酶一但产生，其活性将始终保持下去C．与酶合成的调整相比，酶活性的调整是一种快速、精细的调整方式D．次级代谢产物是微生物的生长生殖所必需的二、非选择题211分〕细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞