5微生物学试验大纲

《微生物学实验》教学大纲课程类别:专业核心课总学时：36总学分：3开设学期:第二学期适用专业:生物技术及应用先修课程:有机化学实验，无机及分析化学实验、本课程的性质与任务《微生物学实验》是生物技术及应用专业学生的实验类专业必修课，通过本课程的教学可使学生完整、全面的了解和掌握微生物学的基本理论和研究方法，使学生得到有关微生物实验技能的基本训练，进一步加深对微生物基础理论的理解，并力求达到系统地培养学生分析问题、解决问题的能力和实际动手能力，在实验中进一步提高学生的科学素质修养。二、 教学目的与要求通过教师示范、讲解与学生实际操作相结合方法，使学生牢固树立无菌概念，掌握显微镜的使用、生物染色技术、形态学观察的方法、微生物计数、培养基的配置和灭菌方法、微生物分离、纯化等基本操作技能，基本了解常用的仪器设备的基本原理、构造、使用方法及使用中的注意事项，树立严谨求实的科学态度，提高观察、分析问题和解决问题的能力，培养勤俭节约、爱护公物和相互协作的优良作风。本实验课内容包括验证性实验、综合性实验两个部分。验证性实验主要通过光学显微镜镜检观察方法进行教学，综合实验在教师指导下学生根据所掌握的理论基础和实验技能，由学生自己动手完成。实验过程要求学生仔细观察实验现象，完整记录原始实验数据、结果，分析实验现象并认真填写实验报告。三、 教学时数分配总学时：36学时。学时分配表早节实验内容实验性质学时实验一显微镜油镜的使用，与细菌形态观察验证3实验二培养基的制备、分装和灭菌验证4实验三环境和人体表面微生物的检查验证3实验四细菌的简单染色法验证3实验五细菌的革兰氏染色验证3实验六微生物纯种分离和接种技术综合3实验七微生物培养特征观察综合2实验八细菌的生理生化试验综合5实验九细菌总数的测定综合5实验十菌种常用简易保存方法综合3实验十一玻璃器皿的清洗和包装其它2总计36四、实验内容和课时分配实验一显微镜油镜的使用，与细菌形态观察（ 3课时）实验目的和要求：（一） 知识要求了解普通光学显微镜油镜的原理；熟练掌握普通光学显微镜油镜的使用和保养方法；掌握各种微生物的主要形态特征。（二） 技能要求掌握微生物绘图的基本技法；显微镜油镜的使用。实验内容：球菌的形态观察杆菌的形态观察；主要仪器设备：普通光学显微镜实验二培养基的配制、分装和灭菌（4课时）实验目的和要求:（一）知识要求明确培养基的配制原理；掌握几种培养基成分、状态、用途；了解各种灭菌方法的原理及应用范围；熟练掌握高压蒸汽灭菌的原理及应用范围。（二）技能要求掌握培养基的配制方法；掌握高压蒸汽灭菌锅加压蒸汽灭菌的操作方法。实验内容：牛肉膏蛋白胨培养基的配制；高压蒸汽灭菌锅加压蒸汽灭菌。主要仪器设备：高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌器、电子天平实验三环境和人体表面微生物的检查（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求初步了解周围环境中微生物的分布概况；懂得无菌操作在微生物学实验中的重要性；学会用无菌操作倒平板培养基的方法；掌握环境中不同样本的接种方法；会识别不同种类微生物的菌落。（二）技能要求掌握环境样本采集的方法；掌握无菌操作倒平板培养基的方法；掌握环境中不同样本的接种方法；菌落识别技能。实验内容：平板培养基的制备；环境中不同样本的采集与处理；样本的接种；培养：37C18~24h;结果观察：微生物的生长情况、菌落识别与描述。主要仪器设备：采土铲、各种灭菌的玻璃器皿、恒温培养箱等实验四细菌的简单染色法（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求掌握简单染色法的基本原理;掌握简单染色法的操作步骤及注意事项。（二）技能要求掌握细菌涂片技术;掌握细菌涂片单染色技术;熟练镜检的方法。实验内容：细菌涂片的制备;固定：火焰固定染色：美兰染色、沙黄染色等水洗;干燥;镜检;清洗。主要仪器设备：普通光学显微镜实验五细菌的革兰氏染色（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求掌握革兰氏染色法的基本原理;掌握革兰氏染色法的操作步骤及注意事项。（二）技能要求掌握革兰氏染色制片的方法;掌握革兰氏染色初染的方法；掌握革兰氏染色媒染的方法；掌握革兰氏染色脱色的方法；掌握革兰氏染色复染的方法；熟练镜检的方法。实验内容：制片；初染；媒染；脱色；复染；镜检；混合涂片染色。主要仪器设备：普通光学显微镜实验六细菌的纯种分离和接种技术（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求掌握无菌操作技术；掌握平板划线法分离纯化微生物的原理与方法；学会几种接种技术。（二）技能要求掌握平板划线法分离纯化微生物的步骤与方法；学会几种接种技术。实验内容：平板划线法分离纯化微生物的步骤与方法；琼脂斜面移植技术；肉膏汤增菌技术。主要仪器设备：各种灭菌的玻璃器皿、恒温培养箱等实验七微生物培养特征观察（2课时）实验目的和要求：（一）知识要求了解不同的微生物在琼脂平板、斜面上、和液体培养基中的生长特点。懂得微生物接种技术的重要性与应用面。（二）技能要求1.培养性状的观察；2.能描述微生物在琼脂平板、斜面上、和液体培养基中的培养特征。实验内容：1.细菌在琼脂斜面培养特征与描述2.细菌在琼脂平板培养特征与描述液体培养基中培养特征的观察与描述；培养；主要仪器设备：各种灭菌的玻璃器皿；高压蒸汽灭菌锅、实验八细菌生理生化实验（5课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.掌握细菌生理生化实验的原理；2.掌握细菌鉴定中生理生化实验的常规方法。（二）技能要求1.掌握糖类发酵实验的方法；2.掌握过氧化氢酶实验的方法；掌握细菌淀粉酶实验的方法。实验内容：1.糖类发酵实验；2.过氧化氢酶实验；细菌淀粉酶实验。主要仪器设备：高压蒸汽灭菌器、干热灭菌器、电子天平、恒温培养箱实验九细菌总数的测定（5课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.了解水中细菌总数测定的原理；2.了解水源水平板菌落计数的原则懂得无菌操作在微生物实验中的重要性。（二）技能要求1.掌握水样的采集方法；2.掌握水样梯度稀释方法；掌握菌落计数的方法；学会用无菌操作倒平板培养基的方法。实验内容：1.待测菌液的制备2.琼脂平板的制备菌液的稀释主要仪器设备：各种灭菌的玻璃器皿、恒温培养箱实验十常用的简易保藏法（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.了解几种常用的简易保藏法保藏菌种的原理；（二）技能要求几种常用的简易保藏法菌种保藏的操作步骤和方法。实验内容：1.斜面传代保藏法；2.半固体穿刺保藏法；石蜡油封藏法。主要仪器设备：各种灭菌的玻璃器皿、手提式高压蒸汽灭菌锅和恒温培养箱等。实验十一学生自主设计实验（6课时）

实验目的和要求：1.训练学生查阅资料，发现问题，灵活运用所学知识和技能设计实验、完成实验，以培养学生验证或解决某一实际问题的能力，培养创新意识及能力；2.检验全学年教与学两方面的教学质量。实验内容：1.查阅资料，选题；2.查阅资料，灵活运用所学知识和技能设计实验；实施并完成自行设计的实验；小结实验，写出实验报告。对教师的要求：1.教师要讲解开展设计实验的目的和意义，介绍实验所具备的实验条件，明确选题范围，指导学生选题；2.教师要讲解设计实验的基本原则；教师要加强实验过程的指导和监督。五、本课程与其它课程的关系本课程以先导课程：植物生物