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辅助生殖技术138黄子维第1页人工授精(ArtificialInsemination,AI)体外受精-胚胎移植(InVitroFertilizationandEmbryoTransfer,IVF-ET)及其衍生技术两大类。定义第2页(AI)是以非性交方式将精子置入女性生殖道内,使精子与卵子自然结合,实现受孕方法。因为精液起源不一样,AI分夫精人工授精(AIH)和供精(非配偶)人工授精(AID)。人类最早一例成功AI治疗是JohnHunter于1790年为严重尿道下裂患者妻子进行配偶间人工受精。至今虽已200多年,但仍是惯用有效有助孕技术人工授精ArtificialInsemination第3页AIH适应证:(1)性交障碍;(2)精子在女性生殖道内运行障碍;(3)少、弱精症。AID适应证:(1)无精症;(2)男方有遗传疾病;(3)夫妻间特殊性血型或免疫不相容。实施AID治疗时,供精者须选择身体健康,智力发育好,无遗传病家族史青壮年。还须排除染色体变异、乙肝、丙肝、淋病、梅毒,HIV。血型要与受者丈夫相同。供精精子应冷冻6个月,复查HIV阴性方可使用

。因HIV感染有6个月左右潜伏期,此时诊疗不易确定,所以供精精子普通应从精子库获取第4页不论实施AIH还是AID治疗,受精前精子都须进行优选诱导获能处理,这对宫腔内授精或体外授精,更是一项主要常规技术。其作用是去除含有抑制与影响受精成份精浆,激活诱导精子获能。自然受精中,精子是在穿过宫颈粘液及在输卵管内停留等候卵子过程中实习上述改变。临床处理,则采取离子洗涤与用成份相同于输卵管液授精培养液培养相结合方法完成,详细有精子上游法和Percoll梯度离心法。授精时间应依据术前对女方排卵监测、选在排卵前48h至排卵后12h之间进行。授精部位当前惯用是将精子注入宫颈,或在严格无菌办法下注入宫腔。第5页体外受精-胚胎移植InVitroFertilizationandEmbryoTransferIVF-ET该技术是将从母体取出卵子置于培养皿内,加入经优选诱导获能处理精子,使精卵在体外受精,并发育成前期胚胎后移植回母体子宫内,经妊娠后分娩婴儿。因为胚胎最初2天在试管内发育,所以又叫试管婴儿技术。(1)输卵管堵塞。(2)子宫内膜异位伴盆腔内粘连或输卵管异常,使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬。(3)男性轻度少精、弱精症。(4)免疫性不育、抗精子抗体阳性。(5)原因不明不育。第6页控制性超排卵与卵泡监测按自然周期取卵,一次周期只能得到一个卵。为了提升妊娠率,当前在IVF-ET技术中,多采取控制性超排卵法,即选取人类促性腺激素,增强与改进卵巢功效,使一次周期能有多个卵泡发育,回收多个卵供受精。以取得较多供移植胚胎。取卵B超引导经阴道穿刺取卵术取卵。此法不需麻醉切口,也不经过膀胱,防止了尿液对精子伤害,优于用腹腔镜或B超引导经腹取卵方法。体外授精将取到卵泡液注入培养皿,肉眼快速识别含卵细胞及其外周透明带、放射冠卵冠丘复合物。在解剖镜下确认有卵细胞存在后,置入CO2培养箱培养4~8h,再依据复合物形态改变判断选择成熟卵细胞,按每卵配10~20万个精子百分比,投入经过洗涤优选已诱导获能精子,授精后16~18h观察情况,将受精卵移入培养试管/皿内培养。第7页胚胎移植

于取卵后48h,胚胎发育成2~8个细胞阶段或在取卵后72h胚胎发育至8~16个细胞时植入子宫。后者较符合自然受精胚胎进入子宫时间,且在传统体外培养条件下,只有最健康胚胎才能活到3天,故移植成功率高。胚胎冻融不但AID治疗精子需要冻融,在IVF-ET中因为促超排卵应用,一次周期回收卵泡,经受精发育胚胎,移植后会有剩下也需要冷冻储存,如移植失败,就可在下个自然周期或HRT周期移植,以提升一次取卵妊娠率。另外碰到患者因促超排卵引发卵巢刺激综合征,为了预防妊娠加重病情,也可将胚胎冻存,留待以后移植用。超低温可抑制细胞新陈代谢,使生命进入休眠状态而保留下来。保留温度为-196℃,保留装置为以液氮作致冷源液氮罐。第8页胚胎移植后监测移植后14天验晨尿HCG阳性为生化妊娠,显示胚胎植入和发育正常。移植4~6周腹部B超查到胎囊、胚胎和心管搏动为临床妊娠。

胚胎移植合并症主要有流产、宫外孕、多胎妊娠、卵巢过分刺激综合征(OHSS)。

妊娠率当前为25%~35%。伴随对影响妊娠成功原因深入研究和对应技术步骤改进,预期IVF-ET妊娠率还会提升。第9页卵巢过分刺激综合征(OHSS)体外受孕辅助生育主要并发症之一,是一个人体对促排卵药品产生过分反应,以双侧卵巢多个卵泡发育、卵巢增大、毛细血管通透性异常、异常体液和蛋白外渗进入人体第三间隙为特征而引发一系列临床症状并发症。第10页1.依据病史和临床表现体重增加、口渴腹部不适、下腹稍肿胀、轻度恶心及呕吐等。2.B超显示卵巢增大(直径>5厘米),有多个黄体,可见腹腔少许积液。3.血细胞容积和白细胞计数升高,低钠、低蛋白血症重度OHSS可出现肝功效不全(表现为肝细胞损害)和胆汁淤积,碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、胆红素、肌酸激酶增高。4.疑诊OHSS者应作全血细胞分析、肝肾功效检验、水电解质测定、盆腔超声检验、体重测量、E2水平测定等。第11页OHSS是一种自限性疾病,多发生于注射HCG后3~7天。如未妊娠,其病程约14天;如妊娠,将继续持续一段时间,且病情可能加重。1.轻度一般不需特殊处理,鼓励病人多进水,大多数病人可在1周内恢复。2.中度

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