微生物遗传学MG第六章、1,节

第一节细菌转座子的类型和结构转座子——可移动的遗传因子（mobilegeneticelements）转座子插入引起极性突变发现和证明第一页，共二十三页。第二页，共二十三页。第三页，共二十三页。一、插入序列（insertionsequence,IS）1、两端含有反向重复序列（IR）2、含有转座酶基因，启动子和终止区位于IR中3、转座时需要靶序列（targetsequence），转座后靶序列重复成为DR4、IS可独立存在，也常常作为其它转座子的一部分第四页，共二十三页。图10－2p.244表10－1p.243第五页，共二十三页。第六页，共二十三页。第七页，共二十三页。二、转座子（transposon,Tn）1、复合转座子（compositetransposon）结构特点：两侧为相同或相似的IS,IS可以同向排列或反向排列IS可以单独转座也可以带动整个Tn转座第八页，共二十三页。P.245图10－3P.245表10－2第九页，共二十三页。第十页，共二十三页。第十一页，共二十三页。2、复杂转座子（complextransposon）也称为TnA类转座子，结构特点：两侧为重复序列IR或DR共同的基因：A,R,和res图示：Tn3的结构与功能（Fig.Tn2）第十二页，共二十三页。Fig.Tn2表10－3p.246第十三页，共二十三页。第十四页，共二十三页。第十五页，共二十三页。三、噬菌体Mu

指一类可以引起突变的溶源性噬菌体，结构复杂，分子量大，插入位点的专一性不高。一般大小为3－5x104bp。游离的Mu与插入的Mu在基因顺序上完全相同，证明其整合方式与溶源性噬菌体整合方式不同，更像转座子的转座。转座是Mu的一种生活方式，其插入基本无靶序列的要求。第十六页，共二十三页。四、转座子插入的符号用“::”表示各类转座子的插入，如：galT::IS1,

galE::IS4,

galOP::IS1第十七页，共二十三页。第二节细菌转座子的插入机制

和转座模型

一、插入机制1．插入步骤靶序列DNA双链被交错切割转座因子插入到切口处，两条链的各一端共价相连靶序列的单链部分通过复制修补上，原来的靶序列转座后变为转座子两侧的正向重复序列，其长度与Tn种类有关，有的4bp有的9bp。2．插入位点的专一程度IS4表现绝对专一，要求11－13bp靶序列，Mn只要求2bp,而Tn则在2者之间。第十八页，共二十三页。二、转座模型：复制型转座——Tn3转座模型转座子DNA双链被切开，切点在每一条链的3’一端。转座酶交错切割靶序列的每一条单链。转座子与靶序列的切口相连，产生交叉结构，同时形成假复制叉（pseudo-replicationfork）。DNA链沿假复制叉延伸，合成出2个拷贝的转座子和靶序列。形成共整合体（cointegrate）,是2个复制子共价连接在一起的特殊结构。2个拷贝的转座子之间通过解离位点进行的特异重组而分开，完成转座过程。第十九页，共二十三页。图9。10图示Tn3转座机制Fig.7-9第二十页，共二十三页。第二十一页，共二十三页。第二十二页，共二十三页。三、转座因子的遗传学效应：引起插入突变插入结构基因，引起钝化或失活，插入位点出现新基因。如：lac+lac::T