血细胞分析仪的质量控制

血细胞分析仪的质量控制

ISO15189的技术要要素部分分将医学学实验室室全过程程分为三三部分:分析前质质量管理理分析中质质量管理理分析后质质量管理理2009.10.202zilinglan1227@临床医师师反馈信息息参加室间间质评室内质控控实验用复复检检查仪器器设备血细胞分分析仪的的性能验验证配套试剂剂方法选择择人员五素素质思想、文文化技术术、心理理身体。。人员稳定定性工作环境境安静、整整洁实验室管管理室内复核核保留标本本运送报告告登记填写写报告分析后质质量评估估分析中质质量控制制分析前质质量保证证检查病人人申请化验验病人准备标本采集标本处理标本运送分析测定实验质量量保证系系统实验质量量保证系系统2009.10.203zilinglan1227@1分析前的的质量控控制标本采集集的质量量控制采血试管管：目前多采采用真空空采血管管。抗凝剂及及比例：：EDTA－K2，l.5mg可抗凝0.5~~15ml血液，抗抗凝剂浓浓度过高高，易造造成细胞胞外液高高渗状态态，影响响细胞的的正常形形态。抗抗凝剂浓浓度过低低，起不不到抗凝凝作用，，血液中中易产生生凝块。。采血：采用静脉脉血。采血后标标本的处处理及放放置时间间2009.10.204zilinglan1227@仪器工作作环境无尘无磁场静电干绕绕15~30度2009.10.205zilinglan1227@2分析中的的质量控控制试剂仪器室内质量量控制仪器运行行状态纠正病理理因素对对结果干干扰2009.10.206zilinglan1227@血细胞分分析仪的的校准血液分析析仪校准准的一般般要求血细胞分分析仪的的性能验验证校准物校准方法法多台血细细胞分析析仪校准准多台血细细胞分析析仪比对对2009.10.207zilinglan1227@血液分析析仪校准准的要求求为了保证证检测结结果的准准确性，，要求对对每一台台血液分分析仪进进行校准准。仪器安装装时必须须由厂家家进行校校准并提提供校准准记录，，否则不不能用于于临床标标本的检检测。建立适合合本实验验室使用用的血液液分析校校准程序序并写成成文件。。内容包括括：使用用校准物物的溯源源性、来来源、名名称及其其保存方方法；校校准的具具体方法法和步骤骤；何时时要求进进行校准准、由何何人负责责实施等等。半年内至至少进行行一次校校准。若若仪器发发生故障障，大修修或大保保养后仪仪后、室室间室内内质控超超出范围围提示有有系统误误差时应应及时进进行校准准。2009.10.208zilinglan1227@血细胞分分析仪的的性能验验证精密度指重复测测定中个个次试验验结果彼彼此接近近程度。。常用不精密度度即标准准差（SD）或变异系系数（CV）来表示，评价时应应注意用用高、中中、低新新鲜全血血进行评评价。携带污染染率指含量高高的标本本对含量量低的样样本所产产生的影影响。总重复性性随机取样样本20份，分即即刻、2小时及4小时测定定，统计学分分析。2009.10.209zilinglan1227@线性范围围测定定值与稀稀释倍数数成线性性关系。。范围越越广越理理想，至少涵盖盖正常范范围及常常见的病病理范围围。仪器的参参考范围围验证静脉与手手指血、、自动与与手动模模式验证证2009.10.2010zilinglan1227@白细胞分分类评价价重复性：：多次测定定同一份份血液标标本是否否得到非非常近似似的结果果。取一一份抗凝凝静脉血血，重复复测定11次，弃去去第一次次，计算算CV值。准确性：：即与“金金标准””显微镜镜下分类类结果的的相关程程度。取取静脉血血10份进行仪仪器测定定，重复复2次，取均均值。同同时推4张血片，，选4个素质好好技术水水平高的的技师，，每人每每片油镜镜分类200个细胞，，共计800个白细胞胞，计算算均值，，与仪器器进行相相关性比比较。2009.10.2011zilinglan1227@校准物校准物的的来源来自本仪仪器的配配套校准准物。来自正常常人新鲜鲜血，但但定值要要求直接接或间接接地溯源至国国际标准准。新鲜血作作为校准准物的定定值直接溯源源至国际际标准的的定值方方法：可可使用血血细胞分析的的参考方方法定，，但要求求建立参参考方法法的难度较大大，在临临床实验验室难以以实施。。间接溯源源至国际际标准的的定值方方法：取取新鲜血血用二级标准准检测系系统或规规范操作作的检测测系统。。2009.10.2012zilinglan1227@二级标准准检测系系统：直直接溯源源至参考考方法；；具备较完善善的质量量保证措措施；与与国外具具有权威威性的参考实实验室定定期进行行比对的的检测系系统。规范操作作的检测测系统：：使用配配套试剂剂；用配配套校准物定定期进行行仪器校校准；规规范地开开展室内内质量控制；；参加室室间质量量评价成成绩优良良；人员员经过培训。。2009.10.2013zilinglan1227@校准物的的选择有证标准准物质仪器配套套校准物物新鲜血作作为校准准物无配套校校准物检检测系统统的实验验室必须须使用新新鲜全血进行行仪器校校准2009.10.2014zilinglan1227@校准方法法仪器的准准备清洗仪器器内部各各通道及及测试室室。确认认仪器的的背景计计数、精精密度及及携带污污染在说说明书规规定的范范围内时时，才可可进行校校准，否否则须查查找原因因，必要要时请维维修人员员进行检检修。2009.10.2015zilinglan1227@校准物的的准备配套校准准物①将校准物物从冰箱箱内（2-8℃℃）取出后，，要求在在室温（18-25℃）条件下放放置15分钟，使使其温度度恢复至至室温。。②检查校准准物是否否超出效效期，是是否有变变质或污污染。③轻轻地将将校准物物反复颠颠倒混匀匀，并置置于两手手掌慢慢慢搓动，使使校准物物充分混混匀。④将两瓶校校准物合合一起，，混匀后后再分装装于2个瓶内。。2009.10.2016zilinglan1227@新鲜全血血①用EDTA-K2为抗凝剂剂的真空空采血管管取健康康人新鲜鲜血10ml，每ml血需抗凝凝剂的浓浓度为1.5--2.2mg/ml。要求新新鲜全血血的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt检测结果果在参考考范围内内。将新新鲜血混混匀后分分装于3个管内，，每管的的血量为为3ml。②取其中1管，用二二级标准准检测系系统或规规范操作作的检测测系统连连续检测测11次，计算算第2-11次检测结结果的均均值，以以此均值值为新鲜鲜血的定定值。③其他2管新鲜血血作为定定值的校校准物，，用于仪仪器的校校准。2009.10.2017zilinglan1227@对校准物物进行检检测取1瓶校准物物，连续续检测11次，第1次检测结结果不用用，以防防止携带带污染。。仪器若无无自动校校准的功功能，则则将第2~11次的各项项检测结结果用手手工记录录在工作作表格中中，计算算出均值值，均值值的小数数点后数数字保留留位数较较日常报报告结果果多一位位。有自自动校准准功能的的仪器可可直接得得出均值值。2009.10.2018zilinglan1227@调整仪器器计算各参参数的均均值与定定值相差差的百分分数（不计正负负号），计算公公式：（均值-定值）/定值×100%参数百分数差异一列二列WBC

1.5%

10%RBC1.0%10%Hb1.0%

10%Hct

2.0%10%MCV

1.0%10%Plt3.0%15%2009.10.2019zilinglan1227@各参数均均值与定定值的差差异全部部等于或或小于表表中的第第一列数值值时，不不需对仪仪器进行行调整；；各参数均均值与定定值的差差异大于于表中的的第二列列数值时时，需请维维修人员员核查原原因并进进行处理理；各参数均均值与定定值的差差异在表表中第一一列与第第二列数数值之间时时，需对对仪器进进行调整整；若仪器无无自动校校准功能能，则将将定值除除以所测测均值，，求出校准准系数，，将仪器器原来的的系数乘乘以校准准系数即即为校准后后的系数数，将校校准后的的系数办办事入仪仪器更换换原来的系系数。2009.10.2020zilinglan1227@校准结果果的验证证将第2管未用的的校准物物充分混混匀，在在仪器上上重得检检测11次，去除除第1次结果，，计算第第2-11次检测结结果的均均值，再再次与表表中的数数值对照照。如各各参数的的差异全全部等于于或小于于第一列列数值，，证明校校准合格格。如达达不到要要求，须须请维修修人员进进行检修修。2009.10.2021zilinglan1227@血液分析析仪校准品定值完成比较一致偏倚校准准不一致2009.10.2022zilinglan1227@多台血细细胞分析析仪校准准

标本取健康人人静脉血血，用EDTA-K2抗凝，其其在血液液中的终终浓度为为1.5~~2.0mg//ml全血。将将血液在在一容器器中混匀匀后分装装成三份份。第一份用用于定值第二份用用于校准第三份用用于校准后验验证标本室温温存放并并于四小时内完成。。新鲜全血血的定值值2009.10.2023zilinglan1227@方法参比仪器器血细胞仪仪开机清清洗，本本底通过过后，取取全血质质控品（非校准物物）在各台仪仪器上连连续测定定11次（第一次结结果弃掉掉），计计算仪器器第2-11次WBC、RBC、HGB、MCV、PLT结果的均均值，以以此作为为新鲜全全血WBC、RBC、HGB、MCV、PLT的定值。。2009.10.2024zilinglan1227@新鲜全血血的定值值取第一份份新鲜全全血经充充分混匀匀后参比比血细胞胞仪重复复测定11次，计算算仪器第第2-11次WBC、、RBC、HGB、MCV、、PLT结果的均均值，以以此作为为新鲜全全血WBC、、RBC、HGB、MCV、、PLT的定值。。待校准血血细胞分分析仪的的校准取第二份份新鲜全全血经充充分混匀匀后，在在另外待待校准血血细胞仪仪上重复复测定11次，计算算各仪器器第2-11次WBC、RBC、HGB、MCV、PLT结果的均均值及与与新鲜全全血的定定值的偏偏差。2009.10.2025zilinglan1227@计算公式式为：偏差=（均值-靶值）/靶值×100%。按以下标标准判断断仪器判判断仪器器是否需需要校准准计算需需要校准准参数的的校准系系数，将将新的校校准系数数输入仪仪器替换换旧校准准系数。。校准系数数的计算算公式为为：新校准系系数=原校准系系数×(靶值/仪器检测测值)2009.10.2026zilinglan1227@校准结果果的验证证取第三份份新鲜全全血，在在被定值值校准的的血细胞胞仪上重重复测定定11次，计算算第2-11次结果的的均值及及与定值值的偏差差，检查查结果其其结果是是否在允允许范围围内。判别仪器器校准的的标准参数WBCRBCHGBHCTMCVPLT百分数差异一列(%)1.5%1.0%1.0%2.0%1.0%3.0%二列(%)10%10%10%10%10%15%2009.10.2027zilinglan1227@多台血细细胞分析析仪比对对仪器比对对的目的的是通过多多台仪器器同时检检测一批批患者样样本，用用统计学学方法对对测定结结果进行行统计分分析，了了解仪器器对患者者样本检检测结果果误差（（偏倚）），并判判断误差差是否在在临床允允许范围围内。2009.10.2028zilinglan1227@仪器比对对的基本本要求选择一台台性能最最好的仪仪器作为为本室的的“参比比仪器”确定比对对频率（（至少半半年一次次）确定选择择新鲜全全血要求求确定比对对测定方方法确定误差差（偏倚倚）的允允许范围围对比对数数据做统统计处理理2009.10.2029zilinglan1227@简易比对对方法：：首先选择择一台本本实验室室内技术术性能较较好的血血球仪，该仪器器应使用用配套的的校准物物定期校校准，每每天有配套质量量控制系系统监控控，并参参加室间间质评活活动，各项目均均在可接接受性能能范围之之内。其其他仪器器分别与该仪器器比较。。随机选择择一份新新鲜全血血样同时时用各仪仪器按常常规样本测定定的方法法，测定定其各项项参数，，每份样样本测定2次。2009.10.2030zilinglan1227@计算(按PT计算方法法计算偏偏倚)PT计算公式式：（参比测测定值-比对测定定值）/参比测定定值×100%统计做图图做散点图图，转换换成线性性图，得得出斜率率b；截距a。并计算算比对仪仪器对于于确定仪仪器预期期偏差估估计值（Bc）。2009.10.2031zilinglan1227@Bc=a+(b-1))Xc。Xc临床参考考范围的的上、下下限水平平处斜率b表示两仪仪器间测测定标本本时的比比例误差差截距a表示两仪仪器间测测定标本本时的恒恒定误差差b逾接近1、a逾接近０逾好2009.10.2032zilinglan1227@标准比对对方法（（按EP-9文件）选择一台台本实验验室内技技术性能能较好的的血球仪仪，该仪器应使使用配套套的校准准物定期期校准，，每天有有配套质量控制制系统监监控，并并参加室室间质评评活动，，各项目均在可可接受性性能范围围之内。。其他仪仪器分别别与该仪器比较较。2009.10.2033zilinglan1227@每日随机机选取8份样品（（其中应应包括高高、中、、低值），同同时用各各台仪器器按常规规样本测测定的方方法，测定顺序序为...。以上步连续续测定5天。共40个样本。。记录与统统计将每日结结果记录录，分别别统计两两台仪器器40份样本双份测定定的平均均值、绝绝对值、、两台仪仪器测定定的平均值。2009.10.2034zilinglan1227@制图（线线性相关关的目测测检查））通过以上上所作的的图分析析，如果果两方法法间的线线性关系良好，，则可以以进行以以下的分分析；如如果线性性关系不好，则则需重新新进行分分析。方法间离离群点的的检查参照EP9--A的方法计计算方法法间绝对对差值（Eij）、平均绝对差差值（E）和相对的的绝对差差值（Eij’）、相对的平均绝绝对差值值（E‘）。如果同同时超过过E、E’值的四倍即绝对对偏差界界限值和和相对偏偏差界限限值称为为离群点。大于于界限2.5%%的数据应应从数据据系列中中取消。。2009.10.2035zilinglan1227@线性回归归EP9--A文件提供供了成对对数据系系列（Yij--Xij）斜率b、截距a的计算。。本室在在实际计计算时将将数据录录入EXCEL软件进行行自动处处理计算算。计算预期期偏差2009.10.2036zilinglan1227@结果分析析如果两仪仪器间的的结果比比对符合合要求则则可以正正常的发出出实验结结果，如果比对结果果不符合合，则应应采取相相应的措措施来调整。。2009.10.2037zilinglan1227@血细胞分分析仪的的室内质质控室内质控控的目的的维持校准准后仪器器的准确确性控制仪器器的精密密度适时监控控判断常常规结果果能否发发出2009.10.2038zilinglan1227@室内质控控的要求求确定所用用质控物物；质控物保保存和处处理方法法；确定质控控物使用用频率；；确定质控控物的靶靶值和允允许范围围；记录质控控数据并并绘制质质控图；；分析失控控原因采采取纠正正措施；；回顾性分分析；记录和保保存质控控数据。。2009.10.2039zilinglan1227@质控物的的选择最好选择择配套质质控物。。无配套质质控物的的可用国国产质控控物。有多台仪仪器实验验室可选选择一台台仪器用用配套质质控品进进行质控控，其他他仪器通通过每天天新鲜血血比对达达到质量量控制的的目的。。利用临床床样本开开展浮动动均值法法的质控控。2009.10.2040zilinglan1227@质控物的的保存和和处理方方法质控物应应置2~8℃℃保存（冰箱温度度应监控控）。用时从冰冰箱中取取出，在在室温下下放置15分钟。测定前用用正确手手法充分分混匀。。测定后尽尽快放回回冰箱冷冷藏。均值的确确定质控物的的厂家定定值不可可以作为为靶值，，使用新新批号质质控物时时，应在在3天内的不不同时间间与现批批号质控控物平行行3天对质控控物测定定20次，在旧旧批号质质控物每每日测定定均在控控情况下下，计算算测定结结果的均均值作为为靶值。。2009.10.2041zilinglan1227@允许范围围的确定定允许范围围的确定定根据使使用的质质控物不不同而略略有不同同。配套质控控物开展展室内质质控初期期，实验验室可暂暂定允许许范围。。第2个月用第第1个月相应应水平的的CV值乘以质质控物的的靶值，，可得出出SD值；以后后用几个个月相应应水平的的平均CV乘以质控控物的靶靶值，则则可得出出平均SD，以此来来确定质质控的允允许范围围。2009.10.2042zilinglan1227@国产质控控物，第第1个月用定定靶值测测定的SD，以后用前前1月SD或前2月平均SD。以±2SD作为警告告限，±3SD为失控限限。不能用说说明书上上的质控控物测定定范围。。2009.10.2043zilinglan1227@失控结果果的判定定如果测定定结果在在失控线线（±3SD）以外，则则为失控控，应立立即查找找原因，，必要时时复查标标本方可可发出报报告。如果测定定结果在在警告线线（±2SD）外，提示示警告，，应引起起注意继继续观察察。如5个测定结结果在X的一侧，，提示存存在系统统误差，，应积极极查找原原因，但但当天报报告一般般可以发发出。2009.10.2044zilinglan1227@失控后的的处理措措施当得到失失控信号号时首先先应分析析造成失失控的误误差类型型是随机机误差还还是系统统误差，，然后再再找出误误差产生生的原因因，造成成系统误误差的因因素如更换试剂剂批号，，环境温温度影响响，仪器器半堵孔孔，Hb灯电压低低等等；造造成随机机误差的的因素如如气泡产生生、电压压不稳、、质控物物未混匀匀等。不是所有有失控都都具有相相同的误误差原因因，有些些问题在在某系统统上常见见，在其其他系统统上很少少出现，，每个实实验室应应依据不不同仪器器的特性性和使用用经验按按照由常常见至少少见，由由易至难难的原则则制定出出失控处处理程序序，并不不断修改改完善。。2009.10.2045zilinglan1227@找出问题题并纠正正后重新新测定质质控品确确认问题题是否解解决，必必要时重重新测定定病人标标本。填写失控控报告并并存档。。2009.10.2046zilinglan1227@室内质控控的回顾顾性分析析室内质控控数据的的回顾分分析可以以帮助我我们判断断误差的的来源，，然后根根据它们们不同的的特点采采取相应应的措施施加以纠纠正。。通过质控控图形分分析误差差原因正常质控控图形总总是呈正正态或近近似正态态分布，，观察质质控图，，若出现现规律性性变化，，如漂移移、趋势势性变化化、周期期变化时时，提示示有系统统误差。。2009.10.2047zilinglan1227@通过质控控数据对对比分析析误差原原因每月底对对当月的的质控数数据做汇汇总统计计，求出出本月的的均数、、标准差差、变异异系数等等，与过过去的数数据进行行比较。。当本月月的X与靶值发发生了偏偏离，或或者X呈逐月上上升或下下降的趋趋势，说说明可能能准确度度发生改改变或与与初始状状态发生生了偏离离，也可可能质控控物稳定定性欠佳佳，应积积极查找找原因，，必要时时重新校校准仪器器或重新新确定靶靶值；如如本月的的SD发生改变变，表明检检测的精密度