实验三网织红细胞计数血沉测定培训课件

1、实验三网织红细胞计数血沉测定一、网织红细胞计数目的 掌握网织红细胞（Ret)试管法计数的原理及操作方法。原理 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后，呈蓝色网状或点状结构，可与成熟红细胞相区别。2实验三网织红细胞计数血沉测定操作步骤1.加染液 将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记。2.加血 在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴，立即混匀。3.染色 室温下染色10-15min。4.涂片制备 取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥5.观察 低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。6.计数 常规法：在油镜下计数至少1000

2、个红细胞中的网织红细胞。7.计算 Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）100%8.结果报告 网织红细胞百分数：X.X%4实验三网织红细胞计数血沉测定血涂片制备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 35实验三网织红细胞计数血沉测定参考区间成人、儿童：0.5%-1.5%新 生 儿：2.0%-6.0%6实验三网织红细胞计数血沉测定注意事项1.试剂准备 推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。2.染色 染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试

3、剂用后及时盖好盖子，以免挥发。3.标本 应及时染色，及时测定。4.计数 选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。7实验三网织红细胞计数血沉测定目的 掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。原理 将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数，即为红细胞沉降率。器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）试剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液。标本 外周血。二、血液沉降率测定（魏氏法）8实验三网织红细胞计数血沉测定1.采血 采静脉血1.6ml加入含0.4ml 109mmol/L枸橼

4、酸钠溶液抗凝剂的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度线处） ，混匀。2.吸血 混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处，拭去管外残余血。3.立血沉管 将血沉管直立于血沉架上。4.读数 1h末准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度。5.报告方式 XX mm/h操作步骤9实验三网织红细胞计数血沉测定参考值 50岁：男性 15mm/h 女性 20mm/h 50岁：男性 20mm/h 女性 30mm/h 85岁：男性 30mm/h 女性 42mm/h 儿童: 10mm/h二、血液沉降率测定（魏氏法）10实验三网织红细胞计数血沉测定注意事项 1.严格控制采血量，使抗凝剂与血液比例为1：4。 2.血沉管应垂直放置，不

5、得倾斜。 3.测量时，血沉架应避免直接光照、移动和振动。 4.本实验最适宜温度为1825，并要求在采血后 2h内完成。 5.红细胞沉降率在1h沉降过程中，并不是均衡等速度的沉降，绝不可以只观察30min沉降率，将结果乘以2作为1h血沉结果。11实验三网织红细胞计数血沉测定二、血液沉降率测定（自动血沉仪法）12实验三网织红细胞计数血沉测定白细胞计数一、目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。二、原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。13实验三网织红细胞计数血沉测定三、器材 显微镜、改良计

6、数板、血盖片、试管、微量 吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布四、试剂 白细胞稀释液五、标本 EDTA盐抗凝血14实验三网织红细胞计数血沉测定六、操作1. 加稀释液 用加样枪吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2. 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管23次，混匀。3. 充池 混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池，室温下平放35分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。4. 计数 用低倍镜依次计数四角4个大方格内的白细胞数。5. 计算 白细胞/L=N/41020106=N/20109/L6. 报告方式 X.X109/L。15实验三网织红细胞计数血沉测定七、注意事项 1. 充池前应将白细胞悬液充分混匀。 2.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。 3. 白细胞在计数池中若分布不均，各大方格间细胞计数不得相差8个以上，应重新计数。 4. 白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方法。 5. 白细胞稀释液不能破坏有