外源性ATP对大鼠移植胰腺的作用及机制

1、外源性ATP对大鼠移植胰腺的作用及机制【关键词】胰十二指肠移植；三磷酸腺苷；细胞凋亡；细胞胀亡PrtetiveeffetfexgenusATPntransplantedpanreasinratsanditsehanis【Keyrds】panreatidudenaltransplantatin;adensinetriphsphate;apptsis;nsis【摘要】目的：探究外源性三磷酸腺苷(ATP)对大鼠移植胰腺的作用和机制.要领：创立SD大鼠同种异位全胰十二指肠移植模子，供体胰腺别离用肝素平衡盐液或肝素平衡盐添加ATP液举行低温(04)灌注并保存60in后行移植手术，检测再灌注0,1,6,1

2、2h时血糖、脂肪酶、淀粉酶含量，同时查抄胰腺构造病理学变革，ATP含量及凋亡、胀亡细胞百分数.效果：ATP组胰腺构造布局损伤显着轻于比较组，ATP6,12h组血糖、血清淀粉酶、脂肪酶含量显着低于同时间点比较组(血糖，脂肪酶，P0.05；淀粉酶，P0.01)，ATP0,1h组胰腺构造ATP含量显着高于同时间点比较组P0.01，ATP组各时间点胀亡细胞百分数显着小于同时间点比较组(0,1,6h,P0.01;12h,P0.05)，ATP含量与胀亡细胞百分数显着负相干r=-0.756,P0.01,与凋亡细胞百分数无显着相干.结论：外源性ATP对移植胰腺有庇护作用，淘汰胰腺构造细胞胀亡的产生大概是其紧张

3、的庇护机制.【关键词】胰十二指肠移植；三磷酸腺苷；细胞凋亡；细胞胀亡0弁言进步移植物低温保存质量，淘汰移植物细胞殒命是移植乐成的紧张因素1-2.有资料表现，外源性三磷酸腺苷(ATP)可以或许进入低温保存的胰腺细胞内3.我们通过增补外源性ATP以进步移植器官内ATP的储藏，研究其对胰腺构造中能量代谢以及细胞殒命方法的影响，探究外源性ATP对移植胰腺的作用及机制.1质料和要领2效果2.1构造学变革ATP组再灌注0h时胰腺构造光镜查抄未见显着非常，再灌注1h时胰腺构造布局改变略微，腺泡外表清楚，局部有胰腺小叶间隙增宽，间质无炎性细胞浸润及外渗，6h时胰腺构造光镜下仍可保持根本正常布局，仅有小叶间隙水

4、肿，少量炎性细胞浸润图1A，12h时可见少量出血及炎细胞浸润，偶见腺泡坏死图1B.比较组再灌注0h时胰腺构造光镜查抄未见显着非常，1h时见胰腺构造布局根本完备，可见较多炎性细胞浸润，6，12h时构造粉碎显着，腺泡坏死、出血和炎症细胞浸润严峻图1,D.2.2血生化变革再灌注后6h及12hATP组血糖、血清淀粉酶和脂肪酶含量均较比较组同时间点显着低落表1.A：ATP组再灌注6h；B：ATP组再灌注12h；：比较组再灌注6h；D：比较组再灌注12h.图1构造学变革略表1移植胰腺再灌注后血糖、血清淀粉酶和脂肪酶含量变革略aP0.05,bP0.01vs比较.2.3胰腺构造ATP和各种细胞的变革ATP组再

5、灌注0,1h时胰腺构造ATP含量较比较组显着增高P0.01，ATP组各时间点胀亡细胞百分数较比较组均显着低落P0.05，ATP含量与胀亡细胞百分数显着负相干r=-0.756,P0.01,与凋亡细胞百分数无显着相干表2.表2大鼠移植胰腺再灌注后胰腺构造ATP及各种细胞的变革略aP0.05,bP0.01vs比较.3讨论胀亡细胞与凋亡细胞胞膜上的磷脂酰丝氨酸(PS)表露于细胞膜外，标识表记标帜有FIT的AnnexinV可特异结合PS；胀亡细胞细胞膜通透性改变，PI可以穿过细胞膜结合在DNA双股螺旋链之间.以上2种染料对单细胞悬液举行双染色，那么胀亡细胞可同时结合上述2种染料，凋亡细胞由于细胞膜完备，

6、只能结合AnnexinVFIT，正常细胞那么两种染料均不染色，据此可以应用双染色法通过流式细胞仪盘算3种细胞百分数.本实行效果表白，再灌注后ATP组胰腺构造病理改变显着轻于比较组；再灌注6,12h后ATP组血糖、淀粉酶、脂肪酶比比较组显着低落，以上效果说明在灌注保存液中添加外源性ATP可以或许减轻移植胰腺缺血再灌注损伤.效果同时表现，ATP组保存后胰腺构造中ATP程度比比较组显着升高且再灌注以后ATP程度规复较比较组快；ATP组胀亡细胞百分数显着小于比较组，ATP程度与胀亡细胞百分数显着负相干，提示外源性ATP对大鼠移植胰腺的庇护作用大概在于ATP可以或许淘汰细胞胀亡的产生.诸多研究以为，AT

7、P程度影响细胞殒命方法，细胞凋亡是细胞斲丧ATP的自动殒命，细胞胀亡是细胞缺乏ATP的被动殒命4.我们的效果表白，ATP组保存后的胰腺构造能量状态优于移植比较组，提示ATP富足时构造细胞以凋亡这一自动殒命方法扫除受损细胞，ATP不敷时,凋亡无法完成其步伐,细胞转向胀亡.关于细胞殒命方法，尚有很多未知范畴，有待更深化的研究.本实行仅提示当缺血再灌注损伤不成制止时,起首应淘汰缺血所引起缺氧及能量斲丧这一始动因素，如在术前或术中赐与能量物质临时进步构造细胞能量储藏，有利于淘汰细胞胀亡，减轻炎症反响,防范移植器官缺血/再灌注损伤.【参考文献】1UhlannD,ArannB,LudigS,etal.pa

8、risnfelsirandUslutininexperientalpanreaspreservatinJ.JSurgRes,2002,105(2):173-180.2TrisiR,eesterD,RegaertB,etal.Tleraneftheprinepanreastarandldisheia:parisnbeteenUniversityfisnsinandhistidinetryptphanketglutarateslutinJ.TransplantPr,2002,34(3):820-822.3原春辉，刘永锋，李桂臣,等.外源性腺苷三磷酸对移植胰腺再灌注损伤庇护作用的实行研究J.消化外科,2022,3(4):274-277.4HEinS,ArnnE,KstinS,etal.Prgressi