唐氏筛查医学知识培训课件

1、唐氏筛查医学知识唐氏筛查医学知识出生缺陷遗传（40%）、环境（5-10%）、共同作用或原因不明（50%）；胚胎发育异常；器官结构、功能代谢和精神行为；先天性异常；遗传咨询、产前筛查和产前诊断是防治的重要方法。概 念2唐氏筛查医学知识出生缺陷遗传（40%）、环境（5-10%）、共同作用或原因不我国出生缺陷现状唐氏筛查医学知识 出生后3年出生后1年出生后7天孕20w-28w我国每年约有90万个缺陷儿出生 70%的出生缺陷可以预防3我国出生缺陷现状唐氏筛查医学知识 1/1000)的孕妇 （Wald et al. Lancet, 2003,361:835-6)18唐氏筛查医学知识 血清标志物筛查值得注

2、意的是： 筛查高危者产前诊断率应当 80% 强调对所有筛查对象进行随访，随访率应 90%，随访时限产后1-6月胎儿常见染色体异常与开放神经管缺陷的产前筛查与诊断技术标准现状不容乐观：孕妇数量 （万/年）产前筛查数（万/年）筛查率（%）高危数（万/年）羊水穿刺数（万/年）羊水穿刺率（%）全国1380.0 276.0 20.3044.2 15.535数据来源2010中国卫生统计年鉴19唐氏筛查医学知识 血清标系统超声筛查 内容唐氏综合征概述血清标志物筛查无创产前基因检测123420唐氏筛查医学知识系统超声筛查 NT增厚 超声最重要的指标为胎儿颈项透明带(nuchal translucency,NT

3、)，筛查时间为孕11-13+6周，NT厚度3mm定义为NT增厚。胎儿非整倍体的风险增加；常规建议行CVS查绒毛染色体核型和间期FISH；FISH未见异常，建议 16周行超声检查，注意心脏、羊水、骨骼 妊娠20周时进行详细的超声扫描 重点不仅仅是主要畸形 要重视微小的异常胎儿超声心动图检查。21唐氏筛查医学知识NT增厚 超声最重要的指标为胎儿颈项透明带(n在21-三体胎儿中，有60-70%在11-13+6w超声中无法观察到鼻骨；而在染色正常的胎儿中，仅有1.4%缺乏鼻骨。 胎儿鼻骨NB22唐氏筛查医学知识在21-三体胎儿中，有60-70%在11-13+6w超声中无 上颌骨长度 超过50%的21-

4、三体患者有上颌发育不全； 其它染色体异常胎儿，上颌长度与正常无显著差异。23唐氏筛查医学知识 在11-13+6w，静脉导管“a波缺失”或“返流”存在于80%的21-三体胎儿及5%的正常胎儿中与NT无密切相关性，因此可用于与NT联合筛查技术难度高，在NT及血清筛查模棱两可时，静脉导管检查可用于风险重估 静脉导管血流24唐氏筛查医学知识在11-13+6w，静脉导管“a波缺失”或“返流”存在于80 早孕期其它超声指标 长骨长度：在11-13+6 w时，21-三体胎儿的股骨及肱骨中位长度显著较头臀长特异的正常均值低，但差距不足以用于筛查。 （Longo et al. Ultrasound Obstet

5、 Gynecol 2004; 23:143-7) 耳朵长度：耳朵短小是21-三体最一致的临床特征，可轻易在11-13+6 w 利用超声度量，但差距不足以用于筛查。 （Sacchini C et al. Ultrasound Obstet Gynecol 2003; 22:460-37) 单脐动脉、巨大膀胱症、胎心过缓、胎盘体积小：18-三体风险增高，与21-三体无明显关系 （英国伦敦胎儿医学基金会，2004）25唐氏筛查医学知识 早孕期其它超声指标 长骨长度：在11-13+6 w时，2 中孕期超声筛查26唐氏筛查医学知识 中孕期筛查方法检出率（%）年龄30年龄+中孕血清筛查50-70年龄+NT

6、70-80年龄+早孕血清筛查+NT85-90年龄+NT+鼻骨90年龄+NT+鼻骨+早孕血清筛查95产前筛查血清学联合超声筛查27唐氏筛查医学知识筛查方法检出率（%）年龄30年龄+中孕血清筛查50-70年龄遗传学超声筛查 内容唐氏综合征概述血清标志物筛查无创产前基因检测123428唐氏筛查医学知识遗传学超声筛查 (Lo et al, Lancet, 1997) 无创产前基因检测29唐氏筛查医学知识(Lo et al, Lancet, 1997) 胎儿DNA特点 主要来源于胎盘 浓度随孕周的增加而升高，12w以后较为稳定 胎盘娩出后2小时即检测不到，再次妊娠不影响检测结果30唐氏筛查医学知识 无创

7、产前基因检测无创基因检测胎儿染色体非整倍体： 通过采集5 ml孕妇外周血，提取其中游离DNA并采用第二代高通量测序技术进行测序，通过生物信息分析，得出胎儿患“染色体非整倍体”的风险率。技术定位： 一种用于21-三体、18-三体及13-三体的,可供选择的高精度产前筛查方法31唐氏筛查医学知识 无创产前基因 母亲Chr 21：952=190母体外周血中Chr 21=190+10=200Chr 3 =190+10=200以21-三体为例：100 DNA单位 /毫升血浆。其中，95个单位来源于母亲， 5个单位来源于胎儿 通过大规模并行测序，获得分布在每条染色体上的真实的核酸片段数量，经过计数与比较：

8、正常胎儿 或者 21-三体胎儿 正常胎儿 Chr 21：52=10 母亲Chr 21：952=190 21-三体胎儿 Chr 21：53=15母体外周血中Chr 21=190+15=205Chr 3 =190+10=200 理论模型32唐氏筛查医学知识以21-三体为例：100 DNA单位 /毫升血浆。其中，95文献21-三体综合征18-三体综合征灵敏度假阳性率灵敏度假阳性率Chiu et al.,2011(2-plex)100% (89/89)2.1% (3/146)N/AN/AChen et al., 2011N/AN/A91.9% (34/37)2.0% (5/252)Ehrich et

9、al., 2011100% (39/39)0.2% (1/410)N/AN/APalomaki et al.,201198.6% (209/212)0.2% (3/1471)N/AN/APalomaki et al., 2012N/AN/A100% (59/59)0.28% (5/1971)Bianchi et al.,2012100% (89/89)0.0% (0/410)97.2% (35/36)0.0% (0/463)Ashoor et al.,2012100% (50/50)0.0% (0/297)98% (49/50)0.0% (0/297)Lau et al., 2012100%

10、(11/11)0.0% (0/97)100% (10/10)0.0% (0/98)合计99.4 %(487/490)0.2% (7/2831)97.4% (187/192)0.5% (15/3081)无创产前基因检测综合灵敏度及假阳性率国际上，该技术的综合检出率远远高于现有各种唐氏筛查技术，且假阳性率极低33唐氏筛查医学知识文献21-三体综合征18-三体综合征灵敏度假阳性率灵敏度假阳 技术优势 对于目标疾病（21、18、13-三体），检出率极高，假阳性率极低； 筛查孕周范围大，可以应用于12w-26w，在棘手病例，甚至可以应用至30w； 所需信息少，取材便捷，只需5ml母体外周血，流程较简单；

11、 技术有进一步发展的空间（双胎、重复/缺失等结构异常）； 可有效降低后续侵入性产前诊断的数量，解决产前诊断技术力量不足 问题，减少有创操作合并症的发病率，减少纠纷产生。34唐氏筛查医学知识 唐氏筛查医学知识培训课件中国日本（JOSG）加拿大（SOGC）澳大利亚美国（NSGC)英国（ROCG）ACOG美国（ISPD）美国（ACMG）意大利行业协会指导意见应该为每名孕妇提供可选择最佳检测胎儿染色体非整倍体方法的机会NIPT是一种极具潜力的胎儿染色体非整倍体筛查方法将NIPT应用于临床检测，对所有孕妇来说，将极大改变的产前诊断和筛查系统格局。全国产前诊断专家组定位为“是一种近似于诊断水平的产前筛查新

12、技术”无创产前基因检测指南36唐氏筛查医学知识中国日本（JOSG）加拿大（SOGC）澳大利亚美国（NSGC无创基因检测新进展双胎 从累积的数据看，双胎的胎儿游离DNA浓度跟单胎比较略高。若该检测结果为高风险，显示至少有一个胎儿怀疑有非整倍性，建议两个胎儿都进行产前诊断；若该检测结果低风险，显示99%可能双胎均正常，建议常规产前检查。试管婴儿双胎孕妇和自然妊娠双胎孕妇无创检测准确性无显著差异。 截至 2015年5月31日，双胎共检测10749例，阳性情况如下：例数阳性结果阴性结果T21T18T13无创基因检测8457161110665Huang et al., Prenat Diagn. 201

13、4 Apr;34(4):335-40.唐氏筛查医学知识无创基因检测新进展双胎 低覆盖度全基因组测序 (0.01x), 检测 10Mb 胎儿缺失/重复；1311例临床样本检测：3例样本样本完全检出，检出率100%；1例假阳性，特异性99.92%；无假阴性结果加大测序深度可以对更小的缺失/重复检测检测疾病位置 发病率Cri-du-chat (5p-)综合征5p15.2-p15.331/20,0001p36微缺失综合征1pter-p36.311/5,0002q33.1缺失综合征2q33.1N/A无创基因检测新进展染色体缺失/重复唐氏筛查医学知识38低覆盖度全基因组测序 (0.01x), 检测 10M

14、b 胎目前已开始 6 种单基因疾病（地贫、先天性耳聋、枫糖尿病、肾上腺皮质增生、鱼鳞病、DMD）的无创产前基因检测通过单个基因位点检测结果对本方法进行评估，父源性位点准确率高达98%以上，母源性位点检测准确率达95%以上可对单胎妊娠及同卵双胎妊娠情况进行检测对于常染色体遗传性单基因病和X染色体连锁性单基因病检测准确率无差异无创基因检测新进展单基因唐氏筛查医学知识39目前已开始 6 种单基因疾病（地贫、先天性耳聋、枫糖尿病、肾适用目标疾病：常见非整倍体，21、13、18三体综合征。适用时间：12-26+6周，最佳12-22+6周。适用人群：血清学筛查、影像学检查显示常见染色体非整倍体临界风险 （

15、即1/100021三体1/270； 1/100018三体1/350）； 有介入性产前诊断检查禁忌症； 错过血清学检查时间。产前筛查无创性筛查NIPT (non-invasive prenatal test) 40唐氏筛查医学知识适用目标疾病：常见非整倍体，21、13、18三体综合征。产前慎用人群：产前筛查高风险，预产期年龄35岁，及有其他直接产前诊断指征的孕妇；孕周100千克）孕妇； IVF-ET 方式受孕的孕妇； 双胎、合并恶性肿瘤孕妇。不适用人群：染色体异常胎儿分娩史，夫妇一方有明确染色体异常的孕妇；孕妇一年内接受过异体输血、移植手术、细胞治疗、免疫治疗；影像学检查怀疑胎儿有微缺失微重复综

16、合征；各种基因病的高风险人群。无创性筛查NIPT(non-invasive prenatal test ) 产前筛查41唐氏筛查医学知识慎用人群：产前筛查41唐氏筛查医学知识2012 ACOGSMFM cfDNA：对高危孕妇进行筛查，针对常见非整倍体异常2015 ACOGSMFM： 取消了NIPT仅能针对高风险孕妇的说法 NIPT仍不能代替现有一线筛查2015 ISPD： NIPT可以用于中风险人群 首次提出尽管失败风险高于单胎检测，但NIPT仍可拓展至双胎的检测 明确指出NIPT可以针对研究清楚的染色体微缺失微重复综合征进行检测2016 ACOGSMFM： NIPT作为非整倍体筛查方法可以不

17、考虑孕妇年龄NIPT国际临床指南NIPT作为非整倍体筛查方法可不考虑孕妇年龄42唐氏筛查医学知识2012 ACOGSMFMNIPT国际临床指南NIPT作为NIPT仅适合于传统筛查高危的孕妇吗？T21T18T13高危VS低危低危高危低危高危低危高危检出率95.9%97%86.5%93%77.5%95%假阳性率0.1%0.3%0.2%0.3%0.1%0.1%阳性预测值82%91%37%84%49%87%阴性漏检率1:55701:10541:71941:9301:85061:4265Sian Taylor-Phillps et al. BMJ Open 201643唐氏筛查医学知识NIPT仅适合于传

18、统筛查高危的孕妇吗？T21T18T13高危NT增厚的孕妇适合NIPT筛查吗？Srebniak et al. Molecular Cytogenetics, 2016, 9: 6944唐氏筛查医学知识NT增厚的孕妇适合NIPT筛查吗？Srebniak et aNT增厚的孕妇适合NIPT筛查吗？染色体异常类型病例数需要NIPT检测的检测类型相应NIPT技术漏诊率常染色体非整倍体T2163（17%）T1828（7.7%）常规NIPT，同时有3例CPM有漏诊可能27%（37/137）T139（2.5%）性染色体非整倍体45，XO20（5.5%）XXX2（0.5%）需要有扩展至性染色体异常筛查10.2%

19、（14/137）XXY1（0.3%）的NIPT方法XXY嵌合型2（0.5%）三倍体3（0.8%）需要结合有SNP分析的NIPT方法8%（11/137）病理性的染色体片段异常6（1.6%）需要扩展至其他染色体检测的NIPT方法5%（7/137）染色体微重复缺失3（0.8%）针对微重复微缺失的NIPT筛查Srebniak et al. Molecular Cytogenetics, 2016, 9: 69NT增厚超过3.5mm的孕妇应该建议产前诊断CMA检测，而不是NIPT检测45唐氏筛查医学知识NT增厚的孕妇适合NIPT筛查吗？染色体异常类型病例数需要NNIPT适合胎儿超声异常的孕妇吗？Ultrasonographic examinationIndication for genetic testingDiagnostic YieldYield NIPTYield QF-PCR and microarray多发胎儿超声异常53.8%（7/13）61.5%（8/13）单发胎儿超声异常7.0%（4/57）8.8%（5/57）胎儿NT增厚15.5%（9/58）17.2%（10/58）超声软指标异常2.8%（2/73）2.8%（2/73）宫