乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案

1、乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案报告人：时间：批准人：时间：宿迁市中医院检验科目录一、系统信息二、验证目的三、检测原理四、验证过程五、验证结果六、验证结论七、参考文献八、附件一、系统信息项目名称：乙型肝炎病毒表面抗原（酶联免疫法）设备名称及型号：AutoBio phomo酶标仪/Anthos fluido洗扳机试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）批号：201610402 有效期：20171024 厂商：上海科华生物工程股份有 限公司质控品名称：康彻思坦HBsAg质控品0.2IU/ml批号：201611007有效期：20181121厂商：北京康彻思坦生物技术有限公司 二、验证目的验

2、证HBsAg检测性能是否满足临床要求。三、检测原理采用抗一HBs包被反应板，加入待测样本，经孵育后，加入抗一HBs-HRP,当 样本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗一HBs结合并与抗一HBs-HRP结合形成抗 一HBs-HBsAg-抗一HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反 应。四、验证过程批内精密度选择康彻思坦HBsAg 0.2IU/ml浓度质控品，在一批检测内，重复检测10次 （孔），计算所得S/CO值的均值和SD,计算批内CV%。判断结论：批内精密度变异CV%应W15%。检测结果符合率按要求选择样品进行验证选取至少40例样本，结果为阴性和阳性的样品各20

3、例，按常规样本检测程序 进行检测，结果按下列公式进行计算，得到阴/阳结果符合率： 敏感性：被测试剂盒测定真阳性数/（真阳性数+假阴性数）*100%特异性：被测试剂盒测定真阴性数/ （真阴性数+假阳性数）*100%符合率：被测试剂盒测定（真阳性数+真阴性数）/ （真阳性数+假阴性数+真阴性数 +假阳性数）*100%结果判断：敏感性=100%；特异性=100%；符合率=100%检出限验证选取一个已知浓度的定值质控，按原倍、1:1、1:2、1:3、1： 4、1：5等稀释倍数进行稀释，将稀释后的系列样本按常规样本的检测程序进行检测，寻求S/CO最接近1但大于1的稀释度。如果稀释样本S/CO结果大于1，

4、则继 续增加稀释倍数做检测。将S/CO结果接近1的稀释度的样本作20次重复测试，如 果95%以上的结果都大于1，则可将该稀释度对应样本的浓度当做检出限浓度。、根据上述系列样本中结果为阳性时最大稀释倍数计算其检出限，具体公式 如下：检出限二原始样本浓度/结果为阳性时的最大稀释倍数五、验证结果验证指标验证结果判断标准/ 厂商声明判定结果 （Y/N）精密度（CV）11.13%15%Y敏感性100%100%Y特异性100%100%Y符合率100%100%Y检出限0.1IU/ml0.1IU/mlY六、验证结论本室HBsAg检测项目精密度、敏感性、特异性、符合率、检出限均可接受，符 合临床需求。七、参考文

5、献CNAS-CL39：医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学定性检验领域的 应用说明。八、附件1、HBsAg定性项目性能验证记录2、实验原始数据HBsAg定性项目性能验证记录检验科免疫组-感染检测依据CNAS-CL39：医学实验室质量和能力认可准则 在临床免疫学定性检验领域的应用说明对医学实验室检测系统性能评价的相关要 求，对HBsAg定性项目的性能评价主要从以下几个方面进行：精密度、敏感性、特 异性、符合率、检出限等。具体结果如下：1精密度精密度，以康彻思坦0.2IU/ml质控品进行评价，在一个批次内连续检测10 次。计算其均值、标准差及变异系数，以不超过15%为判断依据。精密度验证试验数

6、据记录表项目名称HBsAg检测设备/编号AutoBio phomo 酶标仪/Anthos fluido 洗扳机检测试剂/批号科华试剂/201610402样品/批号康彻思坦0.2IU/ml质控品/201611007检测方法酶联免疫吸附法样品：康彻思坦0.2IU/ml质控品测定次数测定结果（S/CO 值）测定次数测定结果（S/CO 值）12.14062.32022.05072.01032.04082.04042.02091.98052.040101.940均值：2.058SD ：0.105CV： 5.10%判断标准：CVW15%重复性精密度验证结果：满足要求口不满足要求结论：本室所检测项目出5人8

7、重复性精密度均在允许范围内，可接 受。2敏感性敏感性以用雅培化学发光确认的20份阳性样品进行评价，记录其结果，以阳 性结果的百分比作为评价标准。样品编号雅培化学发光 测定结果 （IU/ml）科华测定结 果 （S/CO 值）样品编号雅培化学发光测 定结果 （IU/ml）科华测定结果（S/CO 值）160.9325.066117567.6225.5542173.0925.44612637.5124.826328579.420.6781311.4620.81842902.2523.628149396414.48858611.1524.033153537.8828.2406412.6625.99216

8、11011.5925.14978403.3423.1071749.1125.61282399.8526.074182370.7526.917919148.7422.893193180.9426.868102466.625.843202262.1128.760敏感性：被测试剂盒测定真阳性数/（真阳性数+假阴性数）*100%=100%敏感性验证结果：满足要求口不满足要求3特异性特异性以用雅培化学发光确认的20份阴性样品进行评价，记录其结果，以阴 性结果的百分比作为评价标准。样品编号雅培化学发光测 定结果 （IU/ml）科华测定结果（S/CO 值）样品编号雅培化学发光测 定结果 （IU/ml）科华测

9、定结果（S/CO 值）10.0000.091110.0000.10720.0000.124120.0000.25630.0000.116130.0000.05840.0000.107140.0000.05850.0000.017150.0000.28960.0000.008160.0000.10770.0000.066170.0000.00080.0000.025180.0000.14990.0000.165190.010.000100.0000.157200.010.017特异性：被测试剂盒测定真阴性数/ （真阴性数+假阳性数）*100%=100%特异性验证结果：满足要求口不满足要求4符合率符合率：被测试剂盒测定（真阳性数+真阴性数）/ （真阳性数+假阴性数+真 阴性数+假阳性数）*100%=100%符合率验证结果：满足要求口不满足要求5检出限材料：康彻思坦0.2IU/ml HBsAg质控品。结果：拟以1:1作为目标稀释度，以此稀释度样本做20次重复性检测，所得 S/CO值均大于1。根据稀释度计算其浓度为0.1IU/ml，故将此浓度作为检出 限浓度。数据：稀释比例S/CO平均结果判断原倍2.1402.0502.0402.08Y1:11.2401.1601.0501.15Y1:20.710.690.640.68Y1:1稀释度重复20次S/C