大肠杆菌检测方法之欧阳德创编

1、2022.03.07欧阳德创编2022.03.07欧阳德创编2022.03.07欧阳德创编2022.03.07欧阳德创编大肠菌群及检验时间：2022.03.07时间：2022.03.07创作：欧阳德一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全全都，其定义为：需氧及兼性厌氧、在 37能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。泛存在。调查争辩说明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经

2、常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要缘由。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。是以该菌群的检出状况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的凹凸，说明白粪便污染的程度，也反映了对人体安康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄 物，其中有安康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在如沙门氏菌、志贺氏菌等，因而食品中有粪便污染，则可以推想该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，埋伏着食物中毒和流行病的威逼，必需看作对人体安康具有潜在的危急性。目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作

3、中。二、大肠菌群检验方法：由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是依据它的定义进展。要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。酵试验、分别培育和证明试验。每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。361培育482h，观看是否产气。琼脂平板上，36118-24h，观看菌落形态。证明试验：挑取平板上的可疑菌落，进展革兰氏染色观看。同时接种乳糖发酵管361培育242h，观看产气状况。报告：依据证明为大肠杆菌阳性的管数，查 MPN100mlgMPN 值。具体操作参见 G

4、B4789.3-94 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定二原国家商检局制订的行业标准，等效承受美国FDA 的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进展检测。本方法承受两步法：推想试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管 LST 肉汤。361培育 482h，观看是否产气。证明试验：将产气管培育物接种煌绿乳糖胆盐BGLB肉汤管中，361培育 482h，观看是否产气。以 BGLB 产气为阳性。查 MPN 表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的 MPN 值。具体操作参见 SN0169-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法三、说明： 1MP

5、NMPN 为最大可能数(Most Probable Number)的简称。这种方法，对样品进展连续系列进展稀释，参加培育基进展培育，从规定的反响呈阳性管数的消灭率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。MPN 检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加 10 倍。留意国家标准和行业标准中所附 MPN 表所用稀释度是不同的，而且结果报告单位也不一样。初发酵和证明试验：无论是国家标准的三步法还是行业标准的两步 法，都利用了乳糖发酵管进展了两次发酵试验，培育基的配制略有不同，但都是为了证明培育物是否符合37分解乳糖产酸产气”。过证明试验后，有时可能成为阴性。有数据说明，食

6、品中大肠菌群检验步骤的符合率，初发酵与证明试验相差较大。因此，在实际检测工作中，证明试验是必需的。产气量与倒管：管内极微少的气泡有时比小米粒还小，有时可以能有气体产生，而应作进一步试验。选择菌落：美蓝平板分别，对典型和可疑菌落进展观看和证明试验。由于大肠菌群是一群细菌的总称，在平板大肠菌群菌落的色泽、形态等方面较大肠菌更为简单和多 样，而且与大肠菌群的检出率亲热相关。国家标准方法规定伊红美蓝平板为分别培育基，在该平板上，大肠菌群菌落呈黑紫色有光泽或无光泽时，检出率最 高；红色、粉红色菌落检出率较低。系，只挑取一个菌落，由于机率问题，尤其当菌落不典型时，很难避开假阴性的消灭。所以挑菌落肯定要挑取典型菌落，如无典型菌落则应多挑几个，以免出现假阴性。硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等。抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌，特别是革兰氏阳性菌的生长。国家标准中乳糖胆盐发酵管利用胆盐作为抑菌剂，行业标准中LST 肉汤利用十二烷基硫酸钠作为抑菌剂，BGLB 肉汤利用煌绿和胆盐作为抑菌剂。肠菌群细菌的生长和选择，但对大