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文档简介
1、第一章 绪论六、论述题1、什么叫细胞生物学?试论述细胞生物学研究的主要内容。答:细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它是在三个水平(显微、亚显微与分子水平)上,以研究细胞的结构与功能、细胞增殖、细胞分化、细胞衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容的一门科学。细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面:细胞结构与功能、细胞重要生命活动。涵盖九个方面的内容:细胞核、染色体以及基因表达的研究;生物膜与细胞器的研究;细胞骨架体系的研究;细胞增殖及其调控;细胞分化及其调控;细胞的衰老与凋亡;细胞的起源与进化;细胞工程;细胞信号转导。第二章 细胞的统一性与多样
2、性一、名词解释1、细胞;由膜转围成的、能进行独立繁殖的最小原生质团,是生物体电基本的开矿结构和生理功能单位。其基本结构包括:细胞膜、细胞质、细胞核(拟核)。 2、原核细胞;没有由膜围成的明确的细胞核、体积小、结构简单、进化地位原始的细胞。 8、原核细胞和真核细胞核糖体的沉降系数分别为70S和 80S 。9、细菌细胞表面主要是指细胞壁和细胞膜及其特化结构间体,荚膜和鞭毛等。10、真核细胞亚显微水平的三大基本结构体系是生物膜结构系统、遗传信息表达系统,和细胞骨架系统。三、选择题1、大肠杆菌的核糖体的沉降系数为( B )A、80S B、70S C、 60S D、50S3、在病毒与细胞起源的关系上,下
3、面的( C )观战越来越有说服力。A、生物大分子病毒细胞 B、生物大分子细胞和病毒C、生物大分子细胞病毒 D、都不对8、原核细胞的呼吸酶定位在( B )。A、细胞质中 B、质膜上 C、线粒体内膜上 D、类核区内7、细菌核糖体的沉降系数为70S,由50S大亚基和30S小亚基组成。( )五、简答题1、为什么说支原体是目前发现的最小、最简单的能独立生活的细胞生物?答:支原体的的结构和机能极为简单:细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA、进行蛋白质合成的一定数量的核糖体以及催化主要酶促反应所需要的酶。这些结构及其功能活动所需空间不可能小于100nm。因此作为比支原体更小、更简单的细胞,又要维持细胞生命活动
4、的基本要求,似乎是不可能存在的,所以说支原体是最小、最简单的细胞。六、论述题1、如何理解“细胞是生命活动的基本单位”。答:细胞是构成有机体的基本单位。一切有机体均由细胞构成,只有病毒是非细胞形态的生命体。细胞具有独立的、有序的自控代谢体系,细胞是代谢与功能的基本单位细胞是有机体生长与发育的基础细胞是遗传的基本单位,细胞具有遗传的全能性细胞是生命起源和进化的基本单位。没有细胞就没有完整的生命2、试论述原核细胞与真核细胞最根本的区别。答:原核细胞与真核细胞最根本的区别在于:生物膜系统的分化与演变:真核细胞以生物膜分化为基础,分化为结构更精细、功能更专一的基本单位细胞器,使细胞内部结构与职能的分工是
5、真核细胞区别于原核细胞的重要标志;遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化:由于真核细胞结构与功能的复杂化,遗传信息量相应扩增,即编码结构蛋白与功能蛋白的基因数首先大大增多;遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的一个重大标志。遗传信息的复制、转录与翻译的装置和程序也相应复杂化,真核细胞内遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性与区域性,而在原核细胞内转录与翻译可同时进行。第三章 细胞生物学研究方法一、名词解释 1、原代细胞培养;直接从有机体取出组织,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞,在体外进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。 2、传代细胞培养
6、;原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,将影响细胞的生长,这一分离培养称为传代细胞培养3、细胞融合;两个或多个细胞融合成一个双核细胞或多核细胞的现象。一般通过灭活的病毒或化学物质介导,也可通过电刺激融合。4、单克隆抗体;通过克隆单个分泌抗体的B淋巴细胞,获得的只针对某一抗原决定簇的抗体,具有专一性强、能大规模生产的特点。二、填空题1、荧光显微镜是以紫外光为光源,电子显微镜则是以电子束为光源。3、细胞组分的分级分离方法有超速离心法,层析法和电泳法。4、电子显微镜使用的是电磁透镜,而光学显微镜使用的是玻璃透镜。5、杂交瘤是通过
7、(小鼠骨髓)瘤细胞细胞和B淋巴细胞种细胞的融合实现的,由此所分泌的抗体称为单克隆抗体。6、观察活细胞的内部结构可选用相差显微镜显微镜,观察观察细胞的形态和运动可选用暗视野显微镜显微镜,观察生物膜的内部结构可采用冰冻蚀刻法。7、体外培养的细胞,不论是原代细胞还是传代细胞,一般不保持体内原有的细胞形态,而呈现出两种基本形态即成纤维样细胞和上皮样细胞。三、选择题1、由小鼠骨髓瘤细胞与某一B细胞融合后形成的细胞克隆所产生的抗体称( A )。A、单克隆抗体 B、多克隆抗体 C、单链抗体 D、嵌合抗体2、适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是( C )A、荧光显微镜 B、相差显微镜 C、倒置显微镜 D、扫描电镜
8、 3、冰冻蚀刻技术主要用于( A )A、电子显微镜 B、光学显微镜 C、微分干涉显微镜 D、扫描隧道显微镜4、分离细胞内不同细胞器的主要技术是( A )A、超速离心技术 B、电泳技术 C、层析技术 D、光镜技术5、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法,常用于细胞内( C )A、蛋白质的分布与定位 B、脂肪的分布与定位 C、DNA的分布与定位 D、RNA的分布与定位6、流式细胞术可用于测定( D )A、细胞的大小和特定细胞类群的数量 B、分选出特定的细胞类群C、细胞中DNA、RNA或某种蛋白的含量 D、以上三种功能都有11、动物细胞在体外培养条件下生长情况是( C )。A、能无限增殖
9、B、不能增殖分裂很快死亡 C、经过有限增殖后死亡 D、一般进行有限增殖后死亡,但少数情况下某些细胞发生了遗传突变,获得无限增殖能力13、在杂交瘤技术中,筛选融合细胞时常选用的方法是( C )。A、密度梯度离心法 B、荧光标记的抗体和流式细胞术C、采用在选择培养剂中不能存活的缺陷型瘤系细胞来制作融合细胞D、让未融合的细胞在培养过程中自然死亡五、简答题1、超薄切片的样品制片过程包括哪些步骤?答案要点:固定,包埋,切片,染色。3、比较差速离心与密度梯度离心的异同。答案要点:二者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮扔中的颗粒进行分离的技术。差速离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和细胞器的分离。因为在密度
10、均一的介质中,颗粒越大沉降越快,反之则沉降较慢。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开,而且所获得的分离组分往往不很纯;而密度梯度离心则是较为精细的分离手段,这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层,密度梯度的介质可以稳定沉淀成分,防止对流混合,在此条件下离心,细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。六、论述题1、试比较电子显微镜与光学显微镜的区别。答案要点:光学显微镜是以可见光为照明源,将微小的物体形成放大影像的光学仪器;而电子显微镜则是以电子束为照明源,通过电子流对样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器。它们
11、的不同在于:照明源不同:光镜的照明源是可见光,电镜的照明源是电子束;由于电子束的波长远短于光波波长,因而电镜的放大率及分辨率显著高于光镜。透镜不同:光镜为玻璃透镜;电镜为电磁透镜。分辨率及有效放大本领不同:光镜的分辨率为0.2m左右,放大倍数为1000倍;电镜的分辨率可达0.2nm,放大倍数106倍。真空要求不同:光镜不要求真空;电镜要求真空。成像原理不同:光镜是利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化成像;而电镜则是利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差成像。生物样品制备技术不同:光镜样品制片技术较简单,通常有组织切片、细胞涂片、组强压片和细胞滴片等;而电镜样品的制备较复杂,技术难度和费用都
12、较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,还需要制备超薄切片 第四章 细胞膜与细胞表面 一、名词解释 2、脂质体;是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的而制备的人工膜。 3、内在蛋白;分布于磷脂双分子层之间,以疏水氨基酸与磷脂分子的疏水尾部结合,结合力较强。只有用去垢剂处理,使膜崩解后,才能将它们分离出来。 4、外周蛋白 ;为水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜表面的蛋白质分子或脂分子极性头部非共价结合,易分离。四、简答题1、简述细胞膜的基本功能。答案要点:(1)限定细胞的范围,维持细胞的形状。(2)具有高度的选择性,(为半透膜)并能进行主动运输使细胞内外形成不同的离子浓
13、度并保持细胞内物质和外界环境之间的必要差别。(3)是接受外界信号的传感器,使细胞对外界环境的变化产生适当的反应。(4)与细胞新陈代谢、生长繁殖、分化及癌变等重要生命活动密切相关。物质的跨膜运输第八章 细胞信号转导一、名词解释1、载体蛋白 :是一类膜内在蛋白,几乎所有类型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白质分子。通过与特定溶质分子的结合,引起一系列构象改变以介导溶质分子的跨膜转运。 2、细胞通讯 一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应的反应。对于多细胞生物体的发生和组织的构建,协调细胞的功能,控制细胞的生长、分裂、分化和凋亡是必须的。 3、通道蛋白 由几个蛋白亚基在膜上形成的孔道,能使适
14、宜大小的分子及带电荷的溶质通过简单的自由扩散运动从膜的一侧到另一侧。 4、分子开关 细胞信号转导过程中,通过结合GTP与水解GTP,或者通过蛋白质磷酸化与去磷酸化而开启或关闭蛋白质的活性。 5、钠钾泵(Na+K+ pump)又称Na+ - K+ ATPase,能水解ATP,使a亚基带上磷酸集团或去磷酸化,将Na+泵出细胞,而将K+泵入细胞的膜装运载体蛋白。 6质子泵 质子泵是位于细胞膜或细胞内膜上的一种能主动转运质子(H+)的特殊蛋白质.7、胞吞作用 细胞摄取大分子和颗粒性物质时,细胞膜向内凹陷形成囊泡,将物质裹进并输入细胞的过程。 8、胞吐作用 携带有内容物的膜泡与质膜融合,将内容物释放到胞
15、外的过程。 9、胞饮作用 细胞对液体物质或细微颗粒物质的摄入和消化过程。10、信号分子 生物体内的某些化学分子,如激素、神经递质、生长因子等,在细胞间和细胞内传递信息,特称为信号分子。11、受体 一种能够识别和选择性地结合某种配体(信号分子)的大分子,当与配体结合后,通过信号转导作用将胞外信号转导为胞内化学或物理的信号,以启动一系列过程,最终表现为生物学效应。12、第一信使 :一般将胞外信号分子称为第一信使。 13、第二信使:细胞表面受体接受胞外信号后最早在胞内产生的信号分子。细胞内重要的第二信使有:cAMP、cGMP、DAG、IP3等。15、G蛋白 由GTP控制活性的蛋白,当与GTP结合时具
16、有活性,当与GDP结合时没有活性。既有单体形式(ras蛋白),也有三聚体形式(Gs蛋白)。在信号转导过程中起着分子开关的作用。16、G蛋白耦联受体 是指配体受体复合物与靶蛋白的作用要通过与G蛋白的偶联,在细胞内产生第二信使,从而将胞外信号跨膜传递到胞内影响细胞的行为。 17、组成型胞吐作用 所有真核细胞都有的、从高尔基体反面管网区分泌的囊泡向质膜流动并与质膜融合、将分泌小泡的内含物释放到细胞外的过程。此过程不需要任何信号的触发,除了给细胞外提供酶、生长因子和细胞外基质成分外,还为细胞膜提供膜整合蛋白和膜脂。18、调节型胞吐作用 某些特化的细胞(如分泌细胞)产生的分泌物(如激素、粘液或消化酶)储
17、存在分泌泡内,当细胞受到胞外信号刺激时,分泌泡与质膜融合并将内含物释放出去的过程。三、选择题1、下列不属于第二信使的是(D )。A、cAMP B、cGMP C、DG D、NO2、Na+-K+泵由、两个亚基组成,当亚基上的( C )磷酸化才可能引起亚基构象变化,而将Na+泵出细胞外。A、苏氨酸 B、酪氨酸 C、天冬氨酸 D、半胱氨酸3、真核细胞的胞质中,Na+和K+平时相对胞外,保持( C )。A、浓度相等 B、Na+高,K+低C、Na+低,K+高 D、Na+ 是K+的3倍4、生长因子是细胞内的( C )。A、结构物质 B、能源物质 C、信息分子 D、酶5、肾上腺素可诱导一些酶将储藏在肝细胞和肌
18、细胞中的糖原水解,第一个被激活的酶是( D )。A、蛋白激酶A B、糖原合成酶 C、糖原磷酸化酶 D、腺苷酸环化酶6、Ras基因的哪一种突变有可能引起细胞的癌变( A )A、突变后的Ras蛋白不能水解GTP B、突变后的Ras蛋白不能结合GTPC、突变后的Ras蛋白不能结合Grb2或Sos D、突变后的Ras蛋白不能结合Raf7、( D )不是细胞表面受体。A、离子通道 B、酶连受体 C、G蛋白偶联受体 D、核受体8、动物细胞中cAMP的主要生物学功能是活化( A )。A、蛋白激酶C B、蛋白激酶A C、蛋白激酶K D、Ca2+激酶9、在G蛋白中,亚基的活性状态是( A )。A、与GTP结合,
19、与分离 B、与GTP结合,与聚合C、 与GDP结合,与分离 D、 与GTP结合,与聚合五、简答题1、简述细胞信号分子的类型及特点?答案要点:细胞信号分子包括:短肽、蛋白质、气体分子(NO、CO)以及氨基酸、核苷酸、脂类的胆固醇衍生物等,其共同特点是:特异性,只能与特定的受体结合;高效性,几个分子即可发生明显的生物学效应,这一特性有赖于细胞的信号逐级放大系统;可被灭活,完成信息传递后可被降解或修饰而失去活性,保证信息传递的完整性和细胞免于疲劳。简要说明由G蛋白偶联的受体介导的信号的特点。答案要点:G蛋白偶联的受体是细胞质膜上最多,也是最重要的倍转导系统,具有两个重要特点:信号转导系统由三部分构成
20、:G蛋白偶联的受体,是细胞表面由单条多肽链经7次跨膜形成的受体;G蛋白能与GTP结合被活化,可进一步激活其效应底物;效应物:通常是腺苷酸环化酶,被激活后可提高细胞内环腺苷酸(cAMP)的浓度,可激活cAMP依赖的蛋白激酶,引发一系列生物学效应。产生第二信使。配体受体复合物结合后,通过与G蛋白的偶联,在细胞内产生第二信使,从而将胞外信号跨膜传递到胞内,影响细胞的行为。根据产生的第二信使的不同,又可分为cAMP信号通路和磷酯酰肌醇信号通路。cAMP信号通路的主要效应是激活靶酶和开启基因表达,这是通过蛋白激酶完成的。该信号途径涉及的反应链可表示为:激素G蛋白偶联受体G蛋白腺苷酸环化化酶cAMP cA
21、MP依赖的蛋白激酶A基因调控蛋白基因转录。磷酯酰肌醇信号通路的最大特点是胞外信号被膜受体接受后,同时产生两个胞内信使,分别启动两个信号传递途径即IP3Ca2+和DGPKC途径,实现细胞对外界信号的应答,因此,把这一信号系统又称为“双信使系统”。论述题1、试论述Na+-K+泵的结构及作用机理。答案要点:1、结构:由两个亚单位构成:一个大的多次跨膜的催化亚单位(亚基)和一个小的单次跨膜具组织特异性的糖蛋白(亚基)。前者对Na+和ATP的结合位点在细胞质面,对K+的结合位点在膜的外表面。2、机制:在细胞内侧,亚基与Na+相结合促进ATP水解,亚基上的一个天门冬氨酸残基磷酸化引起亚基的构象发生变化,将
22、Na+泵出细胞外,同时将细胞外的K+与亚基的另一个位点结合,使其去磷酸化,亚基构象再度发生变化将K+泵进细胞,完成整个循环。Na+依赖的磷酸化和K+依赖的去磷酸化引起构象变化有序交替发生。每个循环消耗一个ATP分子,泵出3个Na+和泵进2个K+。2、cAMP信号系统的组成及其信号途径?答案要点:1、组成:主要包括:Rs和Gs;Ri和Gi;腺苷酸不化酶;PKA;环腺苷酸磷酸二酯酶。2、信号途径主要有两种调节模型:Gs调节模型,当激素信号与Rs结合后,导致Rs构象改变,暴露出与Gs结合的位点,使激素-受体复合物与Gs结合,Gs的构象发生改变从而结合GTP而活化,导致腺苷酸环化酶活化,将ATP转化为
23、cAMP,而GTP水解导致G蛋白构象恢复,终止了腺苷酸环化酶的作用。该信号途径为:激素识别并与G蛋白偶联受体结合激活G蛋白活化腺苷酸环化酶胞内的cAMP浓度升高激活PKA基因调控蛋白基因转录。Gi调节模型,Gi对腺苷酸环化酶的抑制作用通过两个途径:一是通过亚基与腺苷酸环化酶结合,直接抑制酶的活性;一是通过和亚基复合物与游离的Gs的亚基结合,阻断Gs的亚基对腺苷酸酶的活化作用。第七章 细胞质基质与细胞内膜系统一、名词解释1、细胞质基质:真核细胞的细胞质中除去细胞器和内含物以外的、较为均质半透明的液态胶状物称为细胞质基质或胞质溶胶。2、微粒体:为了研究ER的功能,常需要分离ER膜,用离心分离的方法
24、将组织或细胞匀浆,经低速离心去除核及线粒体后,再经超速离心,破碎ER的片段又封合为许多小囊泡(直径约为100nm),这就是微粒体。3、糙面内质网:细胞质内有一些形状大小略不相同的小管、小囊连接成网状,集中在胞质中,故称为内质网。内质网膜的外表面附有核糖体颗粒,则为糙面内质网,为蛋白质合成的部位。核糖体附着的膜系多为扁囊单位成分,普遍存在于分泌蛋白质的细胞中,其数量随细胞而异,越是分泌旺盛的细胞中越多。6、溶酶体:溶酶体几乎存在于所有的动物细胞中,是由单层膜围绕、内含多种酸性水解酶类、形态不一、执行不同生理功能的囊泡状细胞器,主要功能是进行细胞内的消化作用,在维持细胞正常代谢活动及防御方面起重要
25、作用。8、蛋白质分选:细胞中绝大多数蛋白质均在细胞质基质中的核糖体上开始合成,随后或在细胞质基质中或转至糙面内质网上继续合成,然后,通过不同途径转运到细胞的特定部位并装配成结构与功能的复合体,参与细胞的生命活动的过程。又称定向转运。9、信号假说:1975年G.Blobel和D.Sabatini等根据进一步实验依据提出,蛋白合成的位置是由其N端氨基酸序列决定的。他们认为:分泌蛋白在N端含有一信号序列,称信号肽,由它指导在细胞质基质开始合成的多肽和核糖体转移到ER膜;多肽边合成边通过ER膜上的水通道进入ER腔。这就是“信号假说”。12、信号肽:分泌蛋白的N端序列,指导分泌性蛋白到内质网膜上合成,在
26、蛋白合成结束前信号肽被切除。三、选择题1、属于溶酶体病的是( A )。A、台萨氏病 B、克山病 C、白血病 D、贫血病2、真核细胞中,酸性水解酶多存在于( D )。A、内质网 B、高尔基体 C、中心体 D、溶酶体3、真核细胞中合成脂类分子的场所主要是( A )。A、内质网 B、高尔基体 C、核糖体 D、溶酶体4、被称为细胞内大分子运输交通枢纽大细胞器是( B )。A、内质网 B、高尔基体 C、中心体 D、溶酶体5、下列哪组蛋白质的合成开始于胞液中,在糙面内质网上合成( C )。A、膜蛋白、核定位蛋白 B、分泌蛋白、细胞骨架C、膜蛋白、分泌蛋白 D、核定位蛋白、细胞骨架6、细胞内钙的储备库是(
27、B )。A、细胞质 B、内质网 C、高尔基体 D、溶酶体7、质子膜存在于( C )。A、内质网膜上 B、高尔基体膜上 C、溶酶体膜上 D、过氧化物酶体膜上8、细胞核内的蛋白质主要通过( B )完成。A、跨膜运输 B、门控运输 C、膜泡运输 D、由核膜上的核糖体合成五、简答题1、信号假说的主要内容是什么?答:分泌蛋白在N端含有一信号序列,称信号肽,由它指导在细胞质基质开始合成的多肽和核糖体转移到ER膜;多肽边合成边通过ER膜上的水通道进入ER腔,在蛋白合成结束前信号肽被切除。指导分泌性蛋白到糙面内质网上合成的决定因素是N端的信号肽,信号识别颗粒(SRP)和内质网膜上的信号识别颗粒受体(又称停泊蛋
28、白docking protein, DP)等因子协助完成这一过程。2、比较粗面内质网和光面内质网的形态结构与功能?4、简述细胞质基质的功能。:物质中间代谢的重要场所;有细胞骨架的功能;蛋白质的合成、修饰、降解和折叠。56、蛋白质糖基化的基本类型、特征及生物学意义?7、已知的膜泡运输有哪几种类型?各自主要功能如何?六、论述题1、何为蛋白质分选?细胞内蛋白质分选的基本途径、分选类型是怎样的?答案要点:蛋白质的分选:细胞中绝大多数蛋白质均在细胞质基质中的核糖体上开始合成,随后或在细胞质基质中或转至糙面内质网上继续合成,然后,通过不同途径转运到细胞的特定部位并装配成结构与功能的复合体,参与细胞的生命活
29、动的过程。又称定向转运。细胞中蛋白质都是在核糖体上合成的,并都是起始于细胞质基质中。基本途径:一条是在细胞质基质中完成多肽链的合成,然后转运至膜围绕的细胞器,如线粒体、叶绿体、过氧化物酶体、细胞核及细胞质基质的特定部位,有些还可转运至内质网中;另一条途径是蛋白质合成起始后转移至糙面内质网,新生肽边合成边转入糙面内质网腔中,随后经高尔基体转运至溶酶体、细胞膜或分泌到细胞外,内质网与高尔基体本身的蛋白成分的分选也是通过这一途径完成的。蛋白质分选的四种基本类型:1、蛋白质的跨膜转运:主要指在细胞质基质合成的蛋白质转运至内质网、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等细胞器。2、膜泡运输:蛋白质通过不同类型的转
30、运小泡从其糙面内质网合成部位转运至高尔基体进而分选运至细胞不同的部位。3、选择性的门控转运:指在细胞质基质中合成的蛋白质通过核孔复合体选择性地完成核输入或从细胞核返回细胞质。4、细胞质基质中的蛋白质的转运第九章 细胞骨架一、名词解释1、细胞骨架:由微管、微丝和中间丝组成的蛋白网络结构,具有为细胞提供结构支架、维持细胞形态、负责细胞内物质和细胞器转运和细胞运动等功能。3、微管;在真核细胞质中,由微管蛋白构成的,可形成纺锤体、中心体及细胞特化结构鞭毛和纤毛的结构。4、微丝;在真核细胞的细胞质中,由肌动蛋白和肌球蛋白构成的,可在细胞形态的支持及细胞肌性收缩和非肌性运动等方面起重要作用的结构。5、中间
31、纤维;存在于真核细胞质中的,由蛋白质构成的,其直径介于微管和微丝之间,在支持细胞形态、参与物质运输等方面起重要作用的纤维状结构。6、微管组织中心(MTOC);存在于真核细胞质中的,由蛋白质构成的,其直径介于微管和微丝之间,在支持细胞形态、参与物质运输等方面起重要作用的纤维状结构。7、肌球蛋白;依赖于维丝的分子马达。8、分子马达;主要是指依赖于围观的驱动蛋白、动力蛋白和依赖于维斯的肌球蛋白。三、选择题1、细胞骨架是由哪几种物质构成的(D )。A、糖类 B、脂类 C、核酸 D、蛋白质 E.以上物质都包括2.下列哪种结构不是由细胞中的微管组成( D )。A、鞭毛 B、纤毛 C、中心粒 D、内质网 E
32、、以上都不是3.关于微管的组装,哪种说法是错误的( E )。A、微管可随细胞的生命活动不断的组装与去组装 B、微管的组装分步进行C.微管的极性对微管的增长有重要意义D、微管蛋白的聚合和解聚是可逆的自体组装过程 E、微管两端的组装速度是相同的4.在电镜下可见中心粒的每个短筒状小体( C )。A、由9组二联微管环状斜向排列 B、由9组单管微管环状斜向排列C、由9组三联微管环状斜向排列 D、由9组外围微管和一个中央微管排列E、由9组外围微管和二个中央微管排列5、组成微丝最主要的化学成分是( A )。A、球状肌动蛋白 B、纤维状肌动蛋白 C、原肌球蛋白 D、肌钙蛋白 E、锚定蛋白6、能够专一抑制微丝组
33、装的物质是( B )。A、秋水仙素 B、细胞松弛素B C、长春花碱 D、鬼笔环肽 E、Mg+7.在非肌细胞中,微丝与哪种运动无关( C )。A、支持作用 B、吞噬作用 C、主动运输 D、变形运动 E、变皱膜运动8、在微丝的组成成分中,起调节作用的是( A )。A、原肌球蛋白 B、肌球蛋白 C、肌动蛋白 D、丝状蛋白 E、组带蛋白五、简答题1、微丝的化学组成及在细胞中的功能。微丝的化学组成:主要成分为肌动蛋白和肌球蛋白,肌球蛋白起控制微丝的形成、连接、盖帽、切断的作用,也可影响微丝的功能。其他成分为调节蛋白、连接蛋白、交联蛋白。微丝的功能:(1)与微管共同组成细胞的骨架,维持细胞的形状。(2)具
34、有非肌性运动功能,与细胞质运动、细胞的变形运动、胞吐作用、细胞器与分子运动、细胞分裂时的膜缢缩有关。(3)具有肌性收缩作用(4)与其他细胞器相连,关系密切。(5)参与细胞内信号传递和物质运输。什么是微管组织中心,它与微管有何关系。答:微管组织中心是指微管装配的发生处。它可以调节微管蛋白的聚合和解聚,使微管增长或缩短。而微管是由微管蛋白组成的一个结构。二者有很大的不同,但又有十分密切的关系。微管组织中心可以指挥微管的组装与去组装,它可以根据细胞的生理需要,调节微管的活动。如在细胞有丝分裂前期,根据染色体平均分配的需要,从微管组织中心:中心粒和染色体着丝粒处进行微管的装配形成纺锤体,到分裂末期,纺
35、锤体解聚成微管蛋白。所以说,微管组织中心是微管活动的指挥简述中间纤维的结构及功能。答:中间纤维的直径约712nm的中空管状结构,由4或8个亚丝组成。单独或成束存在于细胞中。中间纤维具有一个较稳定的310个氨基酸的螺旋组成的杆状中心区,杆状区两端为非螺旋的头部区(N端)和尾部区(C端)。头部区和尾部区由不同的氨基酸构成,为高度可变区域。功能:(1)支持和固定作用:支持细胞形态,固定细胞核。(2)物质运输和信息传递作用:在细胞质中与微管、微丝共同完成物质的运输,在细胞核内,与DNA的复制和转录有关。(3)细胞分裂时,对纺锤体和染色体起空间支架作用,负责子细胞内细胞器的分配与定位。(4)在细胞癌变过
36、程中起调控作用。六、论述题1、比较微管、微丝和中间纤维的异同。答:微管、微丝和中间纤维的相同点:(1)在化学组成上均由蛋白质构成。(2)在结构上都是纤维状,共同组成细胞骨架。(30在功能都可支持细胞的形状;都参与细胞内物质运输和信息的传递;都能在细胞运动和细胞分裂上发挥重要作用。微管、微丝和中间纤维的不同点:(1)在化学组成上均由蛋白质构成,但三者的蛋白质的种类不同,而且中等纤维在不同种类细胞中的基本成分也不同。(2)在结构上,微管和中间纤维是中空的纤维状,微丝是实心的纤维状。微管的结构是均一的,而中等纤维结构是为中央为杆状部,两侧为头部或尾部。(3)功能不同:微管可构成中心粒、鞭毛或纤毛等重
37、要的细胞器和附属结构,在细胞运动时或细胞分裂时发挥作用:微丝在细胞的肌性收缩或非肌性收缩中发挥作用,使细胞更好的执行生理功能;中等纤维具有固定细胞核作用,行使子细胞中的细胞器分配与定位的功能,还可能与DNA的复制与转录有关。总之,微管、微丝和中间纤维是真核细胞内重要的非膜相结构,共同担负维持细胞形态,细胞器位置的固定及物质和信息传递重要功能。2、试述微管的化学组成、类型和功能。答;微管的化学组成:主要化学成分为微管蛋白,为酸性蛋白。其他化学成分为微管结合蛋白包括为微管相关蛋白、微管修饰蛋白、达因蛋白。微管的类型:单微管、二联管、三联管。微管的功能:(1)构成细胞的网状支架,维持细胞的形态。(2
38、)参与细胞器的分布与运动,固定支持细胞器的位置(3)参与细胞收缩和伪足运动,是鞭毛纤毛等细胞运动器官的基本组成成分。(4)参与细胞分裂时染色体的分离和位移。(5)参与细胞物质运输和传递。 第 十章 细胞核与染色体一、名词解释1、染色体 ;是细胞在有丝分裂或减数分裂过程中,由染色质聚缩而成的棒状结构,是细胞分裂期遗传物质存在的特定形式。2、染色质;指间期细胞核内能被碱性物质染色的,由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,是间期细胞遗传物质的存在形式。常伸展为非光镜所能看到的网状细纤丝。3、常染色质 ;间期核内染色质纤维折叠压缩程度低,处于伸展状态,用碱性染料染色时着色浅的染色质
39、组分。4、异染色质;间期核内染色质纤维折叠压缩程度高,处于聚缩状态,用碱性染料染色时着色深的染色质组分5、核小体 ;染色体的基本结构单位,是由组蛋白和200个碱基对的DNA双螺旋组成的球形小体,其核心由四种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各两分子共8分子组成的八聚体,核心的外面缠绕了1.75圈的DNA双螺旋,其进出端结合有H1组蛋白分子。6、核型 ;即细胞分裂中期染色体特征的总和。包括染色体的数目、大小和形态特征等方面 7、核型分析 ;8、核定位信号 ;亲核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,这些内含的特殊短肽保证了整个蛋白质能够通过核孔复合体被转运到细胞核内。这段具有“定向”“定位”作用的序
40、列被命名为核定位序列或核定位信号(亲核蛋白的特殊氨基酸序列,具有定向、定位的作用,保证蛋白质能够通过核孔复合体转运到细胞核内)。9、端粒;位于每条染色体端部,为染色体端部的异染色质结构,由高度重复的DNA序列构成,高度保守。主要功能是维持染色体稳定,防止末端粘连和重组,并能锚定染色体于细胞核内,辅助线性DNA复制等,与染色体在核内的空间排布及减数分裂时同源染色体配对有关;起着细胞计时器的作用.三、选择题1、真核细胞间期核中最显著的结构是( C )。A、染色体 B、染色质 C、核仁 D、核纤层3、每个核小体基本单位包括多少个碱基是(B )。A 、100bp B、 200bp C、300bp D、
41、 400bp2、从氨基酸序列的同源比较上看,核纤层蛋白属于( C )。A、微管 B、微丝 C、中间纤维 D、核蛋白骨架3、细胞核被膜常常与胞质中的( B )相连通。A、光面内质网 B、粗面内质网 C、高尔基体 D、溶酶体4、下面有关核仁的描述错误的是( D )。A、核仁的主要功能之一是参与核糖体的生物合成 B、rDNA定位于核仁区内C、细胞在M期末和S期重新组织核仁 D、细胞在G2期,核仁消5、下列( A )组蛋白在进化上最不保守。A、H1 B、H2A C、H3 D、H46、构成染色体的基本单位是( B )。A、DNA B、核小体 C、螺线管 D、超螺线管7、染色体骨架的主要成分是( B )。
42、A、组蛋白 B、非组蛋白 C、DNA D、RNA8、异染色质是( B )。A、高度凝集和转录活跃的 B、高度凝集和转录不活跃的C、松散和转录活跃的 D、松散和转录不活跃的五、简答题1、简述细胞核的基本结构及其主要功能。、细胞核是真核细胞内最大、最重要的细胞器,主要由核被膜、染色质、核仁及由非组蛋白质组成的网络状的核基质组成,是遗传信息的贮存场所,是细胞内基因复制和RNA转录的中心,是细胞生命活动的调控中心2、简述染色质的类型及其特征。间期染色质按其形态特征和染色性能区分为两种类型:常染色质和染色质染色质。常染色质纤维折叠压缩程度低,处于伸展状态,用碱性染料染色时着色浅。构成常染色质的DNA主要
43、是单一序列DNA和中度重复序列DNA。异染色质纤维折叠压缩程度高, 处于聚缩状态,用碱性染料染色时着色较深,又分结构异染色质或组成型异染色质和兼性异染色质。3、简述核仁的结构及其功能。在光学显微镜下,核仁通常是匀质的球形小体,一般有1-2个,但也有多个。主要含蛋白质,是真核细胞间期核中最明显的结构,在电镜下显示出的核仁超微结构与胞质中大多数细胞器不同,在核仁周围没有界膜包围,可识别出3个特征性区域:纤维中心、致密纤维组分、颗粒组分。功能是进行核蛋白体的生物发生的重要场所,即核仁是进行rRNA的合成、加工和核蛋白体亚单位的装配的重要场所。5、组蛋白如何参与表观遗传调控?组蛋白修饰主要包括甲基化、
44、乙酰化、磷酸化等。其参与调控的方式主要包括:1,改变空间结构,因为基因平时是以染色体形式存在的,在转录时需要通过组蛋白的改变打开,放转录因子进入。2,作用于特定转录元件。3,和DNA甲基化进行相互作用,来调控表达变化。六、论述题1、试述核孔复合体的结构及其功能。核孔复合体主要有下列结构组分:、胞质环位于核孔边缘的胞质面一侧,又称外环,环上有8条短纤维对称分布伸向胞质;、核质环位于核孔边缘的核质面(又称内环),环上8条纤维伸向核内,并且在纤维末端形成一个小环,使核质环形成类似“捕鱼笼”(fish-trap)的核篮(nuclear basket)结构;、辐由核孔边缘伸向核孔中央,呈辐射状八重对称,
45、该结构连接内、外环并在发挥支撑及形成核质间物质交换通道等方面起作用;它的结构比较复杂,可进一步分为三个结构域:柱状亚单位:主要的区域,位于核孔边缘,连接内、外环,起支撑作用;腔内亚单位:柱状亚单位以外,接触核膜部分的区域,穿过核膜伸入双层核膜的膜间腔;环带亚单位:在柱状亚单位之内,靠近核孔复合体中心的部分,由8个颗粒状结构环绕形成核孔复合体核质交换的通道。、中央栓位于核孔的中心,呈颗粒状或棒状,又称为中央颗粒,由于推测它在核质交换中起一定的作用,所以又把它称做转运器(transporter)核孔复合体是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体,并且是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道,双功能表现在它有
46、两种运输方式:被动扩散与主动运输;双向性表现在既介导蛋白质的入核转运,又介导RNA、核糖核蛋白颗粒(RNP)的出核转运。2、试述核小体的结构要点及其实验证据。结构要点:每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体及一个分子H1。、组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心结构,由4个异二聚体组成,包括两个H2A-H2B和两个H3-H4。两个H3-H4形成4聚体位于核心颗粒中央,两个H2A-H2B二聚体分别位于4聚体两侧。每个异二聚体通过离子键和氢键结合约30bp DNA。、146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈, 组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA,锁住核
47、小体DNA的进出端,起稳定核小体的作用。包括组蛋白H1和166bp DNA的核小体结构又称染色质小体。、两个相邻核小体之间以连接DNA 相连,典型长度60bp,不同物种变化值为080bp。实验证据:a、用温和的方法裂解细胞核,铺展染色质,电镜观察未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐溶液处理后解聚的染色质呈现10nm串珠状结构。b、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质,经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析,发现绝大多数DNA被降解成约200bp的片段;部分酶解,则得到的片段是以200bp不单位的单体、二体(400bp)、三体(600bp)等等。如果用同样的方法处理裸露的DNA,则产生随机大
48、小的片段群体,由此显示染色体DNA除某些周期性位点之外,均受到某种结构的保护,避免酶的接近。c、应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术研究,发现核小体颗粒是直径为11nm、高6.0nm的扁园柱体,具有二分对称性,核心组蛋白的构成是先形成(H3)2(H4)2四聚体,然后再与两个H2AH2B异二聚体结合形成八聚体。d、SV40微小染色体(minichromosome)分析与电镜观察:用SV40病毒感染细胞,病毒DNA进入细胞后,与宿主的组蛋白结合,形成串珠状微小染色体,电镜观察到SV40DNA为环状,周长为1500nm,约含5.0kb。若200bp相当于一个核小体,则可形成25个核小体,实际观
49、察到23个,与推断基本一致。3、试述从DNA到染色体的包装过程(多级螺旋模型)。、 a、由DNA与组蛋白包装成核小体,在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构,这是染色质包装的一级结构;b、在有组蛋白H1存在的情况下,由直径10nm的核小体串珠结构螺旋盘绕,每圈6个核小体,形成外径30nm,内径10nm,螺距11nm的螺线管。螺线管是染色质包装的二级结构。C、螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4um的圆筒状结构,称为超螺线管,这是染色质包装的三级结构。d、超螺线管进一步折叠、压缩,形成长2-10um的染色单体,即四级结构。 压缩7倍 b 压缩6倍 压缩40倍 压缩5倍
50、DNA 核小体 螺线管 超螺线管 染色单体(200bp长约70nm) (直径约10nm) (直径30nm,螺距11nm) (直径400nm长1160um)(长210um)第十二章 细胞增殖及其调控一、名词解释 1、细胞周期:连续分裂的细胞,从上一次有丝分裂结束开始到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制,各组分加倍,平均分配到两个子细胞中。2、细胞周期检验点:在细胞内存在一系列的监控机制,可以鉴别细胞周期进程中的错误,并诱导产生特异的抑制因子,阻止细胞周期的进行,这些监控机制称为检验点。不仅存在于G1期,也存在于细胞周期的其他时期。3、细胞同步化:在自然过程中发生的
51、或因研究工作的需要,为得到具有分裂能力且细胞时相一致的细胞群体的方法。 4、染色体的早期凝集:将细胞同步化在细胞周期的不同时期,通过细胞融合,将M期细胞与其他间期细胞融合后培养一段时间,与M期细胞融合的间期细胞发生了形态各异的染色体凝集现象。5、MPF(细胞促分裂因子):又称促成熟因子或M期促进因子,是指存在于成熟卵细胞的细胞质中,可以诱导卵细胞成熟的一种活性物质。已经证明,MPF是一种蛋白激酶,包括两个亚基即Cdc2蛋白和周期蛋白,当二者结合后表现出蛋白激酶活性,可以使多种蛋白质底物磷酸化;MPF是一种普遍存在的、进化上较保守的G2/M转换调控者。6、周期中细胞:又称周期细胞或连续分裂的细胞
52、,是指在细胞周期中连续运转不断分裂,保持分裂能力的细胞。7、静止期细胞:又称G0期细胞或静止期细胞,是指暂时脱离细胞周期不进行增殖,但在适当的刺激下,可重新进入细胞周期的细胞。8、细胞周期蛋白:与细胞周期调控有关的、其含量随细胞周期进程变化而变化的特殊蛋白质。最初在海胆卵中发现,一般在细胞间期内积累,在细胞分裂期内消失,在下一个细胞周期又重复这一消长现象,即在每一轮间期合成,G2/M时达到高峰,M期结束时被水解,下一轮周期又重新合成积累。已经证明周期蛋白广泛存在于各种真核生物中,是诱导细胞进入M期必需的,说明周期蛋白是细胞周期的调控者,可能参与了MPF功能的调节,是MPF的一部分。 13、细胞
53、分裂周期基因:是指与细胞分裂和细胞周期有关的基因,称为cdc基因。 10、CDK抑制因子(CKI):是细胞内存在的一些对CDK激酶活性起负调作用的蛋白质。它是能与CDK激酶结合并抑制其活性的一类蛋白质,具有确保细胞周期高度时序性的功能,在细胞周期的负调控过程中起着重要作用。11、周期蛋白依赖性激酶(CDK):是与细胞周期进程相对应的一套Ser/Thr激酶系统。各种CDK沿细胞周期时相交替活化,磷酸化相应底物,使细胞周期事件有条不紊地进行下去。12、DNA合成阻断法:通过使用DNA合成抑制剂,特异性地抑制DNA的合成,将细胞阻断在G1/S交界处的细胞同步化方法。13、中期阻断法:经过药物处理,抑
54、制微管的形成,从而抑制有丝分裂器的形成,将细胞阻断在细胞分裂中期的同步化方法。转录因子E2F 它调控的基因有周期蛋白E和A,它们与CDK2结合复合物是使细胞从G1进入S期转变所必须的。 p53:肿瘤抑制基因,在DNA受到损伤时,它通过激活和抑制基因的转录,而起着阻断细胞周期和诱导细胞凋亡的作用。8、细胞周期中重要的检验点包括 R点 、 G1/S 、 G2/M 和 中期/后期 。三、选择题1、在细胞分裂中期与纺锤体的动粒微管相连,保证染色体平均分配到两个子细胞中的结构是( D )。A、复制源 B、着丝粒 C、端粒 D、动粒2、关于细胞周期限制点的表述,错误的是( A )。A、限制点对正常细胞周期
55、运转并不是必需的B、它的作用是细胞遇到环境压力或DNA受到损伤时使细胞周期停止的刹车作用,对细胞进入下一期之前进行“检查”。C、细胞周期有四个限制点:G1/S、S/G2、G2/M和M/ G1限制点3、MPF 的分子组成是( B )。A、CDK2和cyclinB B、CDK1和cyclinB C、 CDK4和cyclinD D、CDK2和cyclinD4、细胞周期正确的顺序是( D )。A、G1-M-G2-S B、G1-G2-S-M C、G1-M-G2-S D、G1-S-G2-M5、CDK是否具有酶活性依赖于( D )。A、与周期蛋白的结合 B、CDK本身的磷酸化 C、A、B都必须 D、A、B还
56、不够7、MPF的主要作用是调控细胞周期中( B )。A、G1期向S期转换 B、G2期向M期转换 C、中期向后期转换 D、S期向G2期转换8、核仁的消失发生在细胞周期的( C )。A、G1期 B、S期 C、M期 D、G2期9、休眠期细胞是暂时脱离细胞周期,不进行增殖,但在适当刺激下可以重新进入细胞周期的细胞,下列属于休眠期细胞的是( C )。A、肝细胞 B、神经细胞 C、小肠上皮组织基底层细胞 D、肌细胞10、在细胞周期的G2期,细胞核的DNA含量为G1期的( C )。A、1/2倍 B、1倍 C、2倍 D、不变11、G0期细胞一般是从( A )即脱离了细胞周期。A、G1期 B、S期 C、G2期
57、D、M期12、MPF不能促进( B )。A、卵母细胞成为卵细胞 B、卵巢发育 C、G2期向M期转化 D、蛋白质磷酸化13、在有丝分裂过程中,使用( A )可以抑制纺锤体的形成。A、秋水仙素 B、紫杉酚 C、羟基脲 D、细胞松弛素B五、简答题1、什么是细胞周期?细胞周期各时期主要变化是什么?答案要点:连续分裂的细胞,从上一次有丝分裂结束开始到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制,各组分加倍,平均分配到两个子细胞中。细胞周期被划分为四个时期:G1期(复制前期,M期结束至S期间的间隙)、S期(复制期,DNA合成期)、G2期(复制后期,S期结束至M期间的间隙)、M期(有丝
58、分裂期)。在正常情况下,细胞沿着G1SG2M运转,细胞通过M期被分裂为两个子细胞,完成增殖过程。G1期:主要合成细胞生长所需要的各种蛋白质、RNA、糖类、脂质等。S期:主要进行DNA的复制和组蛋白的合成。G2期:此时DNA的含量已增加一倍。此时主要进行其他蛋白质的合成。M期:主要进行染色体的分离、胞质分裂,一个细胞分裂为两个子细胞。2、细胞周期人工同步化有哪些方法?比较其优缺点。答案要点:、选择同步化包括:有丝分裂选择法:优点:同步化程度高,细胞不受药物侵害。缺点:得到的细胞数量少。密度梯度离心法:优点:简单省时,效率高、成本低。缺点:对大多数种类的细胞并不适用。、诱导同步化包括:DNA合成阻
59、断法:优点:同步化效率高,几乎适合于所有体外培养的细胞体系。缺点:诱导过程可造成细胞非均衡生长.中期阻断法:优点:操作简便,效率高;缺点:药物毒性作用较大。3、细胞周期中有哪些主要检验点?细胞周期检验点的生理作用是什么?答案要点:细胞周期检验点主要有:R点,G1/S,G2/M,中期/后期,即:G1期中的R点或限制点,S期的DNA损伤检验点、DNA复制检验点,G2/M检验点,M中期至M后期又称纺锤体组装检验点等。通过细胞周期检验点的调控使细胞周期能正常动转,从而保证了遗传物质能精确地均等分配,产生具有正常遗传性能和生理功能的子代细胞,如果上述检验点调控作用丢失,就会导致基因突变、重排,使细胞遗传
60、性能紊乱,增殖、分化异常,细胞癌变甚至死亡。六、论述题1、什么是MPF?如何证明某一细胞提取液中有MPF?答案要点:又称促成熟因子或M期促进因子,是指存在于成熟卵细胞的细胞质中,可以诱导卵细胞成熟的一种活性物质。已经证明,MPF是一种蛋白激酶,包括两个亚基即Cdc2蛋白和周期蛋白,当二者结合后表现出蛋白激酶活性,可以使多种蛋白质底物磷酸化。将该细胞提取液注射到新的未成熟的卵母细胞中,检测该卵母细胞是否能够被诱导成熟,若能,则证明该细胞提取液中存在MPF。细胞周期中有哪些主要检验点?细胞周期检验点的生理作用是什么?细胞周期检验点主要有:R点,G1/S,G2/M,中期/后期,即:G1期中的R点或限
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