高效液相色谱法测定连翘败毒丸中连翘苷的含量

1、高效液相色谱法测定连翘败毒丸中连翘苷的含量【摘要】目的：建立连翘败毒丸的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：AgilentTehnlgiesZRBAXExtend-184.6250，5。流动相：乙腈-水2575V/V。流速：1.0lin1。检测波长：230n，柱温30。结果：连翘苷在0.0051.0gl1范围内线性关系良好r=0.9999；平均加样回收率为96.7%，RSD=2.7%n=6。结论：该方法简便易行，结果准确可靠，可适用于连翘败毒丸的质量控制。【关键词】高效液相色谱法连翘败毒丸连翘苷含量测定DeterinatinfFrsythinntentinLianqiabaiduP

2、illsbyHPL【Abstrat】bjetive:TsetupaethdfrqualityntrlflianqiabaiduPills.ethd:HPLethdasdevelpedtquantitativedeterinatin.LUNAgilentTehnlgiesZRBAXExtend-184.6250,5.Thebiliphaseasaetnifrile-ater(2575V/V).Thelunteperatureas30,theavelengthfrdetetinas230n,flrateas1.0lin1.RESULTS:Thepaenlaveragefreveryrateas96

3、.7%,andRSDas2.7%(n=6).NLUSIN:Theethdissiple,aurateandsuitablefritsassaying.【Keyrds】HPL;lianqiabaiduPills;Frsythin;deterinatin连翘败毒丸为?卫生部药品标准?第二十册中药成方制剂收载的品种，由连翘、金银花、苦地盯天花粉等19味中药组成，具有清热解毒、散风消肿之成效。临床用于脏腑积热、风热湿毒引起的疮疡初起、红肿疼痛、憎寒发热、风湿疙瘩、遍身刺痒、大便秘结1。处方中连翘为君药，连翘苷为其主要有效成分，原标准中无含量测定方法。为了更好地控制制剂的内在质量，本文采用高效液相色谱法

4、测定连翘败毒丸中连翘苷的含量，以期为该制剂的质量提供快速、准确的测定方法，现报告如下。1仪器与试药L-2022A高效液相色谱仪，LSAA-VP色谱工作站，紫外检测器；连翘苷对照品批号：110821-202206，由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用；连翘败毒丸为市售样品北京同仁堂科技开展股份制药厂，规格6g/袋，批号：6082655；呼伦贝尔哈慈制药厂，规格6g/100粒，批号：20221201，20221205。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱：AgilentTehnlgiesZRBAXExtend-184.6250，5。流

5、动相：乙腈-水2575V/V。检测波长：230n；流速：1.0lin1；柱温30。2.2溶液制备2.2.1对照品溶液的制备精细称取经五氧化二磷减压枯燥12小时以上的连翘苷对照品适量，加甲醇制成0.10gl1的对照品贮备液；再精细量取对照品贮备液适量，加甲醇制成0.05gl1的对照品溶液，即得。2.2.2供试品溶液的制备取重量差异项下的连翘败毒丸10g，研碎，混匀，取约6g，精细称定，置具塞锥形瓶中，精细参加甲醇25l，密塞，称定重量，超声处理功率250，频率50kHz30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精细量取续滤液5l，蒸干，残渣加水20l使溶解，用三氯甲烷振摇提取

6、5次，每次20l，合并三氯甲烷液，回收至干。残渣用50%甲醇溶解，转移至5l量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，离心，取上清液，或滤过，取续滤液，即得。2.2.3阴性对照溶液的制备取除连翘以外的处方中其余药材的非常之一量，按法制成丸，再按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。转贴于论文联盟.ll.2.3专属性试验分别精细汲取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各10l注入液相色谱仪，记录色谱图图1。由图1可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上有一样保存时间连翘苷16.290in的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。2.4线性关系考察精细汲取连翘苷对照品贮备液浓度：0.10gl1适量，分别

7、置于10l量瓶中，加甲醇定容，配成浓度分别为0.005、0.01、0.03、0.05、0.08、0.1gl1的溶液6份，摇匀，用0.45微孔滤膜过滤。精细汲取续滤液各10l，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积A为纵坐标，其浓度为横坐标，得连翘苷的回归方程为：A=48148500.1325281.19，r=0.9999n=6。结果说明，连翘苷在0.0050.1gl1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系。2.5精细度与稳定性试验精细汲取连翘苷对照品溶液0.05gl110l，在上述色谱条件下重复进样6次，求得连翘苷溶液峰面积的相对标准偏向RSD为0.7%n=6，说明精细度较好。取同一对照品溶液，在0

8、、4、8、12、24、48h分别进展测定，结果说明连翘苷对照品溶液在48h内稳定，RSD为0.8%n=6。2.6重复性试验取供试品批号6082655共6份，分别按“2.2.2供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进展测定，求得连翘苷含量的RSD为1.1%n=6，说明重现性较好。2.7加样回收率试验精细称取含量的样品批号：6082655，连翘苷含量0.06gg1，平均重量6.003g袋1适量，共6份，分别置具塞锥形瓶中。分别精细参加连翘苷对照品贮备液0.1gl1各2l，按“2.2.2供试品溶液的制备方法操作，得回收率试验溶液，依法测定，结果见表1。2.8样品含量测定分别精细汲取供试品溶液与对照品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定三批样品中连翘苷峰面积，按外标法计算其含量n=5，结果见表2。表1连翘苷加样回收率试验表23批样品含量测定结果3讨论3.1通过对3批样品中连翘苷的测定，结果说明最高含量为0.36g6g1，最低为0.28g6g1，综合考虑确定限量每6g含连翘苷不