创新实验综述manuscript lei

1、 （nuclear receptor subfamily 2, group C, （nuclear receptor subfamily 2, group C, NR2C2 3 25 区，1994 年由等HumanandratTR4orphanreceptorsspecifyasubclassofthesteroidreceptorsuperfamilycDNAAF1 功能激活域，与转录激活相关。C 区则是含有高度 D DNA （DNA ，DBD)。DBD DNA 序列特定的反应元件结合。 ，LBD至今尚未发现 TR4 的特异性配体 1。因此在很长时间内，在缺乏配体情况下 敲除小鼠（TR4-/

2、-）构建成功TR4 TR4 1. TR4的辐射【F】？、隐睾症【Gp53/Rb 的DNAp53 G1 对恒河猴进行手术诱导，使其患隐睾症后发现，TR2。（humanHaCaTkeratinocytes）TR4表达，研究HaCaT中，用高钙培养液取代低钙培养液，TR4（humanHaCaTkeratinocytes）TR4表达，研究HaCaT中，用高钙培养液取代低钙培养液，TR4也增加了。InductionofTR4orphanreceptorbyretinoicacidinhumanHaCaTkeratinocytes Loss of TR4 Orphan Nuclear Receptor P

3、hosphoenolpyruvate Gluconeogenesis研究发现，Activation of TR4 orphan nuclear ene promoter by /PKA C/EBP的Ser276能被钙调素依赖型蛋白激酶（calmodulin-dependent element，CRE 除了在转录水平的调节外，研究发现TR4还受翻译后修饰前在真核生物中有20种以上的PTM白质的相互作用，细胞增殖、分化、凋亡25 odulesandsignalling26 Acetylation:aregulatorymodificationtorival27 McBride,A E,andSil

4、ver,P A (2001)S eofthearg: PTM调节效应也取决于不同功能区域的位点，既可1）磷酸化 PTM调节效应也取决于不同功能区域的位点，既可1）磷酸化激酶催化磷酸化或由多种信号分子（(MAPKs, Akt, PKA, 能促进共激活剂或者转录元件（components of the transcription machinery ） 核受体与配体结合后，LBD 构象变化，募集共激活因子 18 (SRC-1/NCoA1TIF2/GRIP-1/SRC-2 p/CIP/RAC3/ACTR/AIB-1/TRAM-1) 的有组蛋白修饰活性的复合物21，组蛋白乙酰转移酶 (PCAF) 22

5、，组蛋白甲基转移酶(CARM1/PRMT1) 23and24 和组蛋白激酶活化25and26histone kinaseactivities？，这些复合物通过组蛋白重构和修饰使核染色质解旋，在启动子处促进转录。另外，NRsTRAP，DRIPSMCCormediator来促进转录器(transcription machinery) (RNA 聚合酶 II 和共转录因子 the General Transcription Factors) 进入起始复合物。AF-1 30, PPAR AR)NAF1MAPKs(Erks,p38MAPKJNKs) Akt靶 靶 PKCVDR76NR（ERRAR）PKA

6、或 分别同时催化磷酸化其他转录因子（CREB）108，促进他们与共调节因子的作用和转录活性，最终可能使细胞向其他方向转录。而 N 末端的磷酸化与 GR109PPAR58，110and111等核受体转录活性的抑制有关，PPAR GRPPARAF-1 区磷酸化通过泛素途径 113 and 114促进核受体降解。RXR LBD RAR/RXR 63 and 115 在对TR4的研究中发现，丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated ，即ProteinKinase-mediatedPhosphorylation。通过大规模的以光谱法为基础的蛋白组学分析，发现了在AF-1功能区中有三个MA

7、PK磷酸化位点，分别是Ser19Ser55Ser68进一步的定点诱变技术则证明了只有Ser19和Ser68的磷酸化具有生物学功能。突变体，模仿去磷酸化，用Glu代替含磷Ser残基构建CP突变体模仿高度磷酸化，证实了在AF-1功能区Ser19Ser68（LBDTR（TR4LBD过的TR4转录调节与LBD又用辅激活物PCAF物RIP140 进行实验， 发现AF1 功能区高磷酸化的TR4 会优先招募辅阻遏物 过的TR4转录调节与LBD又用辅激活物PCAF物RIP140 进行实验， 发现AF1 功能区高磷酸化的TR4 会优先招募辅阻遏物 又有另一项研究发现Metformin Inhibits Nucl

8、ear Receptor TR4Mediated Hepatic Stearoyl- Desaturase1GeneK）能够磷酸化Ser351，从而调控TR4的-activatedprotein性。与上一个实验相似，通过构建突变体来模仿高磷酸化和去磷酸化，在这两项研究证明了TR4存在磷酸化的位点，分别位于Ser19, Ser55, Ser68和 2乙酰化的乙酰化修饰在越来越多的研究中被发现。2009 年，Choudhary C 白组学分析(质谱法)鉴定除了 1750 种蛋白的 3600 个赖氨酸 PTM 位点 s protein complexes and co-regulates major

9、 cellular functions. 白质的乙酰化和蛋白质磷酸化一样普遍，改变或是影响蛋白质功能。2010 FOXO1 (19) YY1(20)DBD FOXO1 (19) YY1(20)DBD acetylation：codifiedcrosstalkwithosttranslational 通过招募组蛋白乙酰化转移酶（histone acetyltransferase，HAT），DBD Lys175、Lys176TR4 DNA 小沟中带负电荷的磷酸基团与酰化作用在不同的功能区有关。序列分析发现了保守的乙酰化模体 RLKK 存在AR，雌激素受体（estrogenreceptor，ER，T

10、R4等。有 TR4 的保守乙酰化模体（RLKK）DBD FactorYY1byTR4 三在 TR4 1、形成TR2TR4TheorphanreceptorTAK1actsasarepressorofRAR-, TR4 结合 TR4 结合 2. 27TIP27源二聚化或与DR1结合，而是影响了TR4对辅助激活因子的募集；另一种与 protein3.TR4 一定碳链长度和不饱和度的天然脂肪酸和它们的代谢物能够激活 TR4。例如，-TR4 E（ApoE、的表达，同时，-ApoE DR1TR4RIP140 PCAF 的反应13多不饱和度脂肪酸（PUFAs），如-3 和-6 脂肪酸，还有它们的代谢分子作

11、用5四TR4 在代谢中的作 RAR、VDR、AR、ER 等)二聚体3 促进 MS 发生发展。另一方面，TR4 可以通过调节其他转录因子的表达(如 TR4 与靶CD36、CideA、CideCmogat1启动子上的 TR4 反应元件elementTR4RETR 1、TR4 在糖代谢中磷酸烯醇酸羧激酶（phosphoenolpyruvate ，调控糖异生的关键酶。研究发现，TR42.敲除小鼠（TR4-/-）模型显示，肝的甘油三酯水平显因子样效应因子（cell death-inducing DNA fragmenion factor alpha-like CideC CD36与低。而在 2.1、TR

12、4 与 FATP1、SCD1、apoE/C-I/C-导外源性脂肪酸进入细胞, 和酯化, 敲除FATP1小鼠模型显示，细胞内甘油三酯含量显著减少FATP1 is all2.1、TR4 与 FATP1、SCD1、apoE/C-I/C-导外源性脂肪酸进入细胞, 和酯化, 敲除FATP1小鼠模型显示，细胞内甘油三酯含量显著减少FATP1 is all insulinsensitivefatty acid transporter 酸摄取的增多。深入研究发现，TR4直接结合位于5TR4RE，激活转录，促进3T3-L1 to 生物激活受体(PPARs)反应元件，能分别被PPAR和PPARIdentifica

13、tion ofa functional peroxisome proliferator-responsive he murine fatty acid transport 。SCD1 在肥胖鼠模型中表达水平较高, 小鼠呈现出肝脂肪变、胰岛素抵抗等表型。此外, 油三酯血症、VLDL 均与 SCD1 活性有关10。TR4 可以通过直接结转录激活 SCD1 TR4 直接与靶启动子的活性。11启动子的结合从而激动靶的激活同样存在于的调节中。apoE apoEapoEmRNA DR1,AGGTCAorphannuclearreceptortheofliverapolipoproteinE/C-I/C-I

14、Igene 2.2、TR436（clusterofdifferentiation36,CD36）在脂肪细胞和肝细胞中， 4CD36是TR4NuclearOrphanReceptorTAK1/TR4-DeficientMiceAreProtectedObesity-LinkedInflammation,HepaticSteatosis,and 4CD36是TR4NuclearOrphanReceptorTAK1/TR4-DeficientMiceAreProtectedObesity-LinkedInflammation,HepaticSteatosis,and 提示CD36 可作为TR4 的直

15、接5。另外，由于CD36 也是其他几个核PPARLXRPXR6TAK1/PXR LXR PPAR50%CD36的表达可能经TR4的直接调节和通过调节PPAR的表达从而间接调节这两种方2.3、TR4CideC、CideA、的因子样效应因子（cell death-inducing 介导细胞ionfactoralpha-likeeffector,Cide）C , Fsp27Cide解。FSP27 contributes to efficient energy urine white adipocytes by promoting the formation unilocular dropletsCi

16、deA也能促进脂滴融合，与CideC有着相似的作用Cidea edropletandstorageinbrownandwhite的脂滴大小中有重要的作用。Fsp27和CideA在LD-LD接触部位（LD-LD ，能够促进脂滴的融合和增大。Perilipin1 promotes unilocular formationthroughtheactivationofFsp27in 现认为单酰基甘油酰基转移酶1 （monoacylglycerol O-acyltransferase 中TGDietary obesity in nine inbred mouse strains.但在脂肪肝中高表达，且升高的血浆游离脂肪酸引起PPARCD36PPAR的表达Peroxisome proliferator-activated receptor -dependent regulation of nodesandmetabolic的表达Peroxisome proliferator-activated receptor -dependent regulation of nodesandmetabolicTranscriptionalactivationofCidecbyPPAR2in表明，TR4 着重要的作用，参与 MS 的发生和