实验室常用洗液配制方法实验室洗液的配制方法

1、实验室常用洗液配制方法实验室洗液的配制方法一：铬酸洗液:配制浓度各有不同，从 512%的各种浓度都有。配制方法大致相 同：取一定量的K2Cr207 （工业品即可），先用约12倍的水加热 溶解，稍冷后，将工业品浓 H2SO4 所需体积数徐徐加入 K2Cr2O7 不溶液中（千万不能将水或溶液加入 H2SO4 中），边倒边用玻璃棒搅拌，并注意不要溅出，混合均匀，俟冷却 后，装入洗液瓶备用。新配制的洗液为红褐色，氧化能力很强。当 洗液用久后变为黑绿色，即说明洗液无氧化洗涤力。例如，配制12%的洗液500mL。取60克工业品K2Cr2O7置于 100mL 水中（加水量不是固定不变的，以能溶解为度），加热

2、溶解， 冷却，徐徐加入浓硫酸：340mL，边加边搅拌，冷后装瓶备用。二：碱性高锰酸钾洗液用碱性高锰酸钾作洗液，作用缓慢，适合用于洗涤有油污的器皿。配法：取高锰酸钾（KMnO4）4克加少量水 溶解后，再加入10%氢氧化钠（NaOH）100mL。三：纯酸纯碱洗液根据器皿污垢的性质，直接用浓硫酸（HCL） 或浓硫酸（H2S04）、浓硝酸（HNO3）浸泡或浸煮器皿（温度不宜太高，否者浓酸挥发刺激人）。纯碱洗液 多采用10%以上的浓烧碱（NaOH）、氢氧化钾（KOH）或碳酸钠 （Na2CO3）液浸泡或浸煮器皿（可以煮沸）。四：碱性乙醇洗液溶解 120 克氢氧化钠固体于 120ml 水中，用 95%乙醇稀

3、释至1L。在铬酸洗液洗涤无效时，用于清洗各种油污；由于碱对玻璃的腐 蚀，玻璃磨口不能长期在该洗液中浸泡；须存放于胶塞瓶中，防止 挥发、防火，久注易失效五：碱性高锰酸钾洗液4 克高锰酸钾固体溶于少量水中，再加入100mll0%氢氧化钠溶液清洗玻璃器皿内的有无或其他有机物质；浸泡后器壁上会析出一层二氧化锰，需用盐酸或盐酸加过氧化氢除去六：磷酸钠洗液57克磷酸钠、28克油酸钠溶于470ml水中清洗玻璃器皿上的残留物；浸泡数分钟后用刷子刷洗七：酸性硫酸亚铁洗液含有少量硫酸亚铁溶液清洗由于贮存高锰酸及洗液而残留在玻璃器皿上的棕色污斑；浸泡后洗刷八：硝酸过氧化氢洗液 15%20的硝酸加等体积的 5%过氧化

4、氢清除特殊难洗的化学污物久存易分解，应存放于棕色瓶九：有机溶剂如三氯乙烯、二氯乙烯、苯、二甲苯、丙酮、乙醇乙醚、三氯甲烷、四氯化碳、汽油等清除玻璃器皿上的油脂类、单体原液、聚合体等有机污物，应根据污物性质选者使用注意毒性、可燃性，用过的废液溶剂应回收十：硫代硫酸钠洗液 10%的硫代硫酸钠溶液。可清洗衣物上的碘斑，浸泡后洗刷。玻璃砂芯器皿清洗剂过滤沉淀物有效清洗剂脂肪、脂膏四氯化碳有机物质混有中铬酸钾的温热浓硫酸浸泡一昼夜 氯化亚铜、铁斑混有氯酸钾的热浓盐酸 硫酸钡热浓盐酸汞渣热浓硝酸硫化汞热王水氯化银氨水或硫代硫酸钠铝质和硅质残渣用 2%氢氟酸、浓硫酸、蒸馏水、丙酮依次漂洗重复至无酸痕为止细菌

5、5.72ml浓硫酸、2克硝酸钠、94ml、蒸馏水混合液水垢盐酸一、玻璃仪器的洗涤方法洁净剂及其使用范围最常用的洁净剂有肥皂、合成洗涤剂（如洗衣粉）、洗液（清洁 液）、有机溶剂等。肥皂、合成洗涤剂等一般用于可以用毛刷直接刷洗的仪器，如烧 瓶、烧杯、试剂瓶等非计量及非光学要求的玻璃仪器。肥皂、合成洗涤剂也可用于滴定管、移液管、量瓶等计量玻璃仪 器的洗涤，但不能用毛刷刷洗。洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃仪器，如滴定管、移液管、量 瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗、凯氏烧瓶等特殊要求与形状的玻璃仪 器；也用于洗涤长久不用的玻璃仪器和毛刷刷不下的污垢。洗液的配制及说明铬酸清洁液的配制：处方 1 处方 2重铬酸钾

6、（钠）10g200g纯化水10mll00ml （或适量）浓硫酸 100ml1500ml制法：称取处方量之重铬酸钾，于干燥研钵中研细，将此细粉加 入盛有适量水的玻璃容器内，加热，搅拌使溶解，待冷后，将此玻 璃容器放在冷水浴中，缓慢将浓硫酸断续加入，不断搅拌，勿使温 度过高，容器内容物颜色渐变深，并注意冷却，直至加完混匀，即 得。说明：(1)硫酸遇水能产生强烈放热反应，故须等重铬酸钾溶 液冷却后，再将硫酸缓缓加入，边加边搅拌，不能相反操作，以防 发生爆炸。清洁液专供清洁玻璃器皿之用，它能去污去热原的作用的 原因为本品具有强烈的氧化作用。重铬酸钾与浓硫酸相遇时产生具 有强氧化作用的铬酐：K2CrO7

7、+H2SO4H2CrO7+K2SO4I2CrO3+H2O-Cr2O3 + 30浓硫酸是一个含氧酸，在高浓度时具有氧化作用，加热时作用更 为显著：H2S04-H20+S02+0AK2CrO7 + 3SO2+H2SO4-Cr2(SO4) 3+K2SO4+H2O铬酸的清洁效力之大小，决定于反应中产生铬酐(CrO3) 的多少及硫酸浓度之大小。铬酐越多，酸越浓，清洁效力越好。用清洁液清洁玻璃仪器之前，最好先用水冲洗仪器，洗取 大部分有机物，尽可能仪器空干，这样可减少清洁液消耗和避免稀 释而降效。本品可重复使用，但溶液呈绿色时已失去氧化效力，不可 再用，但能更新再用。更新方法：取废液滤出杂质，不断搅拌缓慢

8、加入高锰酸钾粉末， 每升约68g，至反应完毕，溶液呈棕色为止。静置使沉淀，倾取 上清液，在160C以下加热，使水分蒸发，得浓稠状棕黑色液，放 冷，再加入适量浓硫酸，混匀，使析出的重铬酸钾溶解，备用。（6）硫酸具有腐蚀性，配制时宜小心。（7）用铬酸清洁液洗涤仪器，是利用其与污物起化学反应的作 用，将污物洗去，故要浸泡一定时间，一般放置过夜（根据情况）； 有时可加热一下，使有充分作用的机会。洗涤玻璃仪器的方法与要求（1）一般的玻璃仪器（如烧瓶、烧杯等）：先用自来水冲洗一 下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自来水清洗，最后用纯 化水冲洗3 次（应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果）。计量玻璃仪器

9、（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗 衣粉的洗涤，但不能用毛刷刷洗。（2）精密或难洗的玻璃仪器（滴定管、移液管、量瓶、比色管 玻璃垂熔漏斗等）：先用自来水冲洗后，沥干，再用铬酸清洁液处 理一段时间（一般放置过夜），然后用自来水清洗，最后用纯化水 冲洗 3 次。（3）洗刷仪器时，应首先将手用肥皂洗净，免得手上的油污物 沾附在仪器壁上，增加洗刷的困难。（4）一个洗净的玻璃仪器应该不挂水珠（洗净的仪器倒置时， 水流出后器壁不挂水珠）。实验室各种洗液铬酸洗涤液铬有致癌作用，因此配制和使用洗液时要极为小心，常用两种配 制方法如下：取 100mL 工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后慢慢加入 5g

10、 重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解并缓慢冷却后，贮存在 磨口玻璃塞的细口瓶内。(2)称取5g重铬酸钾粉末，置于250mL烧杯中，力口 5mL水使其溶 解，然后慢慢加入100mL浓硫酸，溶液温度将达80C，待其冷却后 贮存于磨口玻璃瓶内。其他洗涤液工业浓盐酸：可洗去水垢或某些无机盐沉淀。25草酸溶液：用数滴硫酸酸化，可洗去高锰酸钾的痕迹。5%10%磷酸三钠(Na3P0412H20)溶液：可洗涤油污物。30%硝酸溶液：洗涤二氧化碳测定仪及微量滴管。5%10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)溶液：加热煮沸可 洗脱玻璃仪器内壁的白色沉淀物。尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛过蛋白质制

11、 剂及血样的容器。有机溶剂：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脱油脂、脂溶性染 料污痕等，二甲苯可洗脱油漆的污垢。氢氧化钾的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液：这是两 种强碱性的洗涤液，对玻璃仪器的侵蚀性很强，可清除容器内壁污 垢，洗涤时间不宜过长，使用时应小心慎重。实验室常用溶液配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中, 使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20C。10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):将77.1g乙酸胺溶解于 水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。10mg/ml牛血清蛋白（BSA）

12、:加100mg的牛血清蛋白（组分V或 分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇 动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到 10ml，然后分装成小份贮存于-20C。lmol/L二硫苏糖醇（DTT）:在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加 32.4ml水，分成小份贮存于-20C。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成lmol/L二硫苏糖醇溶液。8mol/L乙酸钾（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸钾于足 量的水中，加水定容到100ml。lmol/L氯化钾（KCl）:溶解

13、7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸钠（sodiumace tate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于 约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L）， 混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g 的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/LHEPES：将23.8gHEPES溶 于约90ml的水中，用NaOH调pH C6.8-8.2），然后用水定容至 100ml。1mol/LHCl：加8.6ml的浓盐酸至9

14、1.4ml的水中。25mg/mlIPGT:溶解250mg的IPGT （异丙基硫代-B-D-半乳糖苷） 于10ml水中，分成小份贮存于-20C。1mol/LMgCl2 :溶解20.3gMgCl26H2O于足量的水中，定容到 100ml。100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF （苯甲基磺酰氟）于足量的 异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20C。20mg/ml蛋白酶K （proteinaseK）:将200mg的蛋白酶L加入到 9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。 加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20C。10mg/mlRn

15、ase（无 DNase）（DNase freeRNase）:溶解 10mg 的胰蛋白 RNA 酶于 1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮 沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的TrisHCl调pH至7.5,于 -20C贮存。（配制过程中要戴手套）5mol/L氯化钠（NaCl）:溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定 容至 100ml。10N氢氧化钠（NaOH）:溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的 烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。10%SDS （十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含 0.9L 的水的烧杯中，

16、用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L。2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）:溶解36.4g山梨（糖）醇 于足量水中使终体积为100ml。100%三氯乙酸（TCA）:在装有 500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶 解。（稀释液应在临用前配制）2.5%Xgal （5-溴-4-氯-3-吲哚一B-半乳糖苷）：溶解25mg 的Xgal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存 于-20C。100XDenhardt 试剂（Denhardtsregent）成分及终浓度配制 100ml 溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙

17、烯吡咯烷酮（PVP-40） 2%BSA （组分 V）水 2g2g2g加水至总体积为100ml,依照上表称取各组分，溶于水中定容。 过滤除菌及杂质，分装成小份于-20C贮存。10X标准 DNA 连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘 端、平端连接）成分及终浓度配制 10ml 溶液各成分的用量0.5mol/LTris-HCl:5mllmol/L 贮液，100mmol/LMgCl2:lmllmol/L 贮液，100mmol/LDTT:lmllmol/L 贮液，2mmol/LATP:200ull00mmol/L 贮液，5mmol/L 盐酸亚精胺（可选）:50ul1mmol/

18、L 贮液,0.5mg/mlBSA （组分V）（可选）：0.5mll0mg/mL贮液，水:2.25ml将配制好的缓 冲液分装成小份，贮存于-20C。100mmol/LdNTP 溶液（dNTPsolutions）可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液，-80C可贮存至少6个月。10mmol/LdNTP 混合液成分及终浓度配制 20ul 溶液各成分的用量10mmol/LdATP10mmol/LdCTP10mmol/LdGTP10mmol/LdTTP水 2ul100mmol/LdATP 贮液2ul100mmol/LdCTP 贮液2ul100mmol/LdGTP 贮液2ul100mmol/LdTT

19、P 贮液12ul20PEG8000/2.5MNaCl成分及终浓度配制 10ml 溶液各成分的用量质量浓度为 20聚乙二醇2.5mol/L 氯化钠水 20g50ml5mol/L 氯化钠或 14.6g 固体氯化钠补足 100ml加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml,用磁 力搅拌器搅拌溶解20XSSC成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量300mmol/L柠檬酸三钠（二水）3mol/L 氯化钠水 88.2g175.3g补足1L溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴 10NNaOH溶液调pH为7.0,用水补足体积至1L。DEPC （焦碳酸二乙酯）处理水力加 100ulD

20、EPC于100ml水中，使DEPC的体积分数为0.1%。在 37C温浴至少12h，然后在15psi条件下高压灭菌20min,以使残余 的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。甲酰胺（deionizedformamide）直接购买或加DowexXG8混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中， 用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Wha tman1 号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80C贮存（防止氧化）。磷酸缓冲液（phospha tebuffer）按照下表所给定的体积，混合1mol/L的磷酸二氢钠（单碱）和 1mol/L磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所

21、需pH的磷酸缓冲液。配 制lmol/L的磷酸二氢钠（NaH2P04H20）贮液：溶解138g于足量水 中，使终体积为lL;lmol/L磷酸氢二钠（Na2HP04）贮液:溶解142g 于足量水中使终体积为 1L。lmol/L磷酸二氢钠（ml） lmol/L磷酸氢二钠（ml）最终pH值8778508l57757356856255655l0450390330280l23l50l852253l5490 5506106707206.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2TE (用于悬浮和贮存DNA)成分及终浓度配制 100ml 溶液各成分的用量10mmol/LTris

22、HCl1mmol/LEDTA水 lmllmol/LTris-HCl (pH7.4-8.0,25C)200ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)98.8mlTris 缓冲液（Tris-HClbuffer）将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH （25C 下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。浓盐酸的体积（ml） pH8.6142128.53846566671.3769.08.88.48.28.07.87.67.47.2电泳缓冲液、染料和凝胶加样液电泳缓冲液50XTris-乙酸（TAE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/LTris

23、碱1mol/L 乙酸100mmol/LEDTA水 242g57.1ml 的冰乙酸（17.4moL/L）200ml 的 0.5mol/LEDTA（pH8.0）补足1L5XTris-硼酸（TBE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445mmol/LTris 碱445mmol/L硼酸盐10mmol/LEDTA水 54g27.5g 硼酸20ml 的 0.5mol/LEDTA（pH8.0）补足 1L染料1%漠酚蓝（pomophenolblue）加 1g 水溶性钠型溴酚蓝于 100ml 水中，搅拌或涡旋混合直到完 全溶解。1二甲苯青 FF（xylenecyanoleFF）溶解lg二甲苯青FF于足量

24、水中，定容到100ml。10mg/ml 的溴化乙锭（ethidiumpomide）小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，力加 100ml水，用磁力 搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4C贮存。凝胶上样液（gelloadingsolutions）6X碱性凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制 10ml 溶液各成分用量0.3N 氢氧化钠6mmol/LEDTA18聚蔗糖（400 型）0.15溴甲酚绿0.25二甲苯青 FF水 300ul10N 氢氧化钠120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.8g15mg25mg补足到 10ml6X聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10m

25、l溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15二甲苯青 FF5mmol/LEDTA15聚蔗糖（400 型）水1.5mll%溴酚蓝1.5mll%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.5g补足到 10ml6X溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终 浓度配制10ml溶液各成分用量0.25%溴酚蓝0.25%二甲苯青FF15%聚蔗糖（400型）水2.5ml1%溴酚蓝2.5ml1%二甲苯青 FF1.5g补足到 10ml6X甘油凝胶上样液（4C贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5mmol/LEDTA50%甘油水1.5ml1

26、%溴酚蓝1.5ml1%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）3ml3.9ml6X蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝0.15二甲苯青 FF5mmol/LEDTA40聚蔗糖水1.5mll%溴酚蓝1.5mll%二甲苯青 FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）4g补足到 10ml10X十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制 10ml 溶液各成分用量0.2%溴酚蓝0.2%二甲苯青 FF200mmol/LEDTA0.1%SDS50%甘油水 20mg20mg4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)100

27、ul10SDS5ml补足到 10ml常用培养基LB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g如果需要用1 NNaOH （lml）调整pH至7.0,再补足水至1L。 注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物 5g氯化钠0.5g1mol/L 氯化钾 2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷 却到室温后,再在每 100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。SOC培养基成分、方法同 SOB 培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，

28、 除了在每 100ml 的小份中加 1ml 灭过菌的 1mol/L 氯化镁外，再加 2ml灭菌的lmol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足 到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。TB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中：蛋白胨12g酵母提取物 24g甘油 4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到60C，再加100ml灭菌的 170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HP04 的溶液（2.31g 的 KH2P04 和 12.54gK2HP04溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用 0.22um 的滤膜过滤除菌）。2XYT培养基将下列组分溶解在 0.9L

29、 水中：蛋白胨 16g酵母提取物10g氯化钠 4ml如果需要用1 NNaOH （1ml）调整pH至7.0,再补足水至1L。 注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。YPD培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中：蛋白胨 20g酵母提取物 10g葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色 氨酸营养缺陷型每升培养基添加 1.6g 色氨酸，因为 YPD 培养基是色 氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼 脂粉。常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解lg氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至1

30、0ml。分装 成小份于-20C贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长 培养基。羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。 分装成小份于-20C贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于 生长培养基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解lg甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小 份于-20C贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一 起添加于生长培养基。卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中

31、，最后定容至10ml。分装成 小份于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装 成小份于-20C贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml的终浓度添加于生链霉素(st rep to mycin)(50mg/ml)溶解 0.5g 链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至 10ml。 分装成小份于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于 生长培养基。萘啶酮酸(nalidixicacid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸钠盐

32、于足量的水中，最后定容至10ml。分装 成小份于-20C贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。四环素(tet racyyline )(10mg/ml)溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶 于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液 见光，于-20C贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长 培养基。几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在 7.27.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。2、TBS：2.1Tris 缓冲液配方：(0.5MpH7.6

33、)Tris (三羟甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL 约 420ml双蒸水加至 1000mlTris 缓冲液配制方法：先以少量双蒸水(300500ml)溶解Tris，加入HCl后，用HCl (1N)或NaOH (1N)将卩只调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。此 液为储备液，4C冰箱中保存。2.2TBS 配方：Tris-HCI 缓冲液(0.5MpH7.6) 100mlNaCI8.59g(0.15mol/L)双蒸水加至 1000mlTBS 配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双 蒸水至1000ml，充分摇匀。3、枸橼酸盐缓冲液(Cit ra tebuf

34、fer)：储存液：0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸(C6H8O7H20)溶于 1000ml 蒸馏水中。0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O72H20) 溶于 1000ml 蒸馏水中。取9mlA液和41mlB液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.00.14、胰酶(Trypsin)：4.1ZLI-9011 胰蛋白酶消化液：常用浓度为 0.125%，即使用前将一滴试剂 1 胰酶溶液和三滴试 剂2 胰酶稀释液均匀混合(1:3 稀释)，则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据 使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0. 05% ( 1:1 0 稀释)至 0.25

35、%(1:1 稀释)。4.2ZLI-9010 胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml0.05%或0.1%pH7.8的无 水氯化钙水溶液中，溶解即可。5、胃酶(Pepsin)：4%胃蛋白酶，用0.1mol/LHCL配制。（我公司备有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀释直接滴 加使用，欢迎选购）6、DAB：6.1ZLI-9032/9033DABKit：使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双 蒸水中，即可获得1mlDAB工作液，简单易用。6.1ZLI-9030DAB：6mgDAB 溶于 10mlTBS （0.05MpH7.6），再加入 0.1ml 浓度为

36、 3% 的H202,过滤掉沉淀物，即可。7、AEC：4mgAEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为0.1M的醋 酸缓冲液（pH5.2），然后加入0.15ml3%H2O2,过滤掉沉淀物。8、RIPA：1XPBS，1%NP40， 0.5sodiumdeoxycholate，0.1%SDS （此液体可 长期保存）。以下抑制剂以储存液方式保存，临用前加入RIPA中。8.110mg/mlPMSF异丙醇溶液（用量为10ul/ml）8.31000mMsodiumorthovanadate 冷冻液（用量为10ul/ml）9、BlottoA：常规使用 1XPBS，5%milk，0.05%Tween20

37、。10、BlottoB：与 Phospho tyrosine 抗体共用，1XPBS，1%m ilk， 0.05%Tween20。 部分实验中 milk 可完全去除，但可能引起背景增高。玻璃仪器的洗涤 SOP玻璃仪器的洗涤 SOP范围本规程适用于本公司分析测试室，也适用于本公司其他实验室。引用标准yyt01886 1995药品检验操作规程洁净剂分类常用的洁净剂有肥皂、洗衣粉、去污粉、洗液（清洁液），有机 溶剂等。使用范围洗衣粉、去污粉等一般用于：可用刷子直接刷洗的仪器，如烧瓶、烧杯、量杯、试剂瓶等。洗液可用于以下仪器的洗涤：不便于用刷子清洗的仪器，如滴定管、移液管、容量瓶 比色管、玻璃垂熔漏斗、凯氏烧瓶等特殊要求与形状的仪器。长久不用的玻璃仪器新购回的玻璃仪器刷子刷不下的污垢洗液的配制法及注意事项重铬酸钾洗液（清洁液）取500ml烧杯置天平上，称取已经研细重铬酸钾（k2cr2o3） 10g, 加水16ml，加热，搅拌使溶解，等冷后，在不断搅拌下缓慢地加入 工业硫酸200ml，冷却后，置细口瓶中密闭保存。如