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文档简介
1、医学微生物学实验细菌的形态和结构观察内 容1.实验室生物安全; “有菌意识,无菌操作观念”的树立。2、学会显微镜油镜的使用。3、学会辨认细菌的基本形态和特殊结构。4、初步学会制作细菌涂片、革兰染色法的操作及结果判断。 医学微生物学实验室规则1.学生进微生物实验室必须穿好工作服,离室需脱下反折,要经常清洗消毒。2.实验无关物品一律禁止带入实验室。3.严禁在实验室进食、饮水和喧哗打闹。4.手拿培养物后或出实验室前要洗手,必要时用消毒液泡手;避免有菌材料溅出;破损器材及时处理并报告。5.实验过程中避免一切不良的个人习惯;操作中产生的废料要扔在指定容器内;实验完毕清理台面,值日生严格认真打扫卫生,关闭
2、水电,门窗,洗手后离开实验室。一、实验目的学习并掌握普通光学显微镜的构造和油镜的使用技术及维护的基本知识(一)显微镜油镜的使用(一)光学显微镜(油镜)放大观察细菌 1、显微镜(油镜头的识别标志)(物镜)镜头刻有100/ 或 “OIL”字样2、油镜观察标本的步骤(1)采光,(2)载玻片上滴加一滴香柏油,(3)调焦,使油镜头浸于玻片上的油中,由于玻璃和其折光率近似,由集光器出来的光线通过玻片和此油时基本不发生折射而直接进入镜筒,使物像清晰。(4)油镜使用完毕,应用擦镜纸擦去镜头上的香柏油。总之:油镜使用减少了光线的折射,而使镜筒集聚了更强的光线,故人们观察物像更清晰G+ 球形,直径约1m,呈葡萄串
3、状排列;无鞭毛和芽孢、一般不形成荚膜;(一)基本形态1)葡萄球菌(一)基本形态2)链球菌直径约1m。链状排列。无鞭毛,不形成芽胞。(一)基本形态4)大肠杆菌电镜图光镜图G-杆菌 0.6-1.0m* 2-4m周身鞭毛(一)基本形态5)炭疽芽胞杆菌最大的G+粗大杆菌两端平切,竹节样排列有芽胞,呈椭圆形,位于菌体中央(一)基本形态6)霍乱弧菌G-菌,菌体短小,弯曲成弧形,单鞭毛。(二)特殊构造 8)肺炎链球菌形态与染色: 革兰染色阳性,双球菌,矛头状,钝端相对; 无芽胞和鞭毛,有厚荚膜;(二)特殊构造 9)鞭毛:伤寒沙门菌G-杆菌 0.6-1.0m*2-4m周身鞭毛三、细菌涂片标本制作和革兰染色法操
4、作步骤一)、细菌涂片标本制作1、涂片2、干燥3、固定白大二)、革兰染色法1、革兰染色法(Gram stain)用途鉴别细菌选择抗菌药物研究细菌致病性 三、步骤与方法 1.涂片制备 涂片 干燥 固定 2.染色 初染(结晶紫) 媒染(卢戈氏碘液) 脱色(乙醇) 复染(石炭酸复红) 1min 吸水纸吸干 3.镜检:油镜下观察。1min1min1min水冲水冲水冲水冲四、结果G-G+注 意 事 项1. 涂片的厚度;2. 固定的程度;3. 染色的时间控制,一一半半;4. 冲洗的方法,不要对着涂片区;5. 油镜头的使用方法。一、观察并完成绘图作业(9个视野)作业1)葡萄球菌2)链球菌3)脑膜炎球菌4)大肠杆菌5)分枝杆菌6)霍乱弧菌7)芽孢:破伤风梭菌8)荚
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