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文档简介

1、龙牡壮骨冲剂对胃肠动力及胃肠组织VIP的影响【摘要】目的通过动物实验观察龙牡壮骨冲剂对小鼠胃肠动力和胃肠激素的影响。方法将小鼠随机分为对照组、模型组、龙牡壮骨冲剂大剂量组、中剂量组、小剂量组,用胃复安、阿托品、新斯的明、肾上腺素注射液尾静脉注射复制胃肠动力紊乱小鼠模型,以营养性半固体糊灌胃,标记胃肠测量胃残留率和小肠推进比,同时以放免法测胃肠组织中血管活性肠肽VIP程度。结果胃复安可致胃排空加速,同时可致胃肠组织中VIP程度降低均为P0.05。阿托品可致胃排空减慢并致胃肠组织中VIP程度升高均为P0.05。新斯的明可致小肠推进比增加并致胃肠组织中VIP程度降低均为P0.05。肾上腺素可致小肠推

2、进比降低并可致胃肠组织中VIP程度升高均为P0.05。龙牡状骨冲剂对正常组小鼠胃残留率和小肠推进比无影响,大剂量龙牡状骨冲剂对胃复安所致胃排空加速、阿托品所致胃排空减慢、新斯的明所致小肠推进比增加、肾上腺素所致小肠推进比降低有逆转作用均为P0.05,中小剂量龙牡状骨冲剂亦有一定的逆转作用。龙牡状骨冲剂对各组所致胃肠激素VIP紊乱有逆转作用,且与剂量有一定的相关性。结论龙牡壮骨颗粒可双向调节胃肠运动,并具有剂量依赖性,其对胃肠动力的调节作用可能是通过影响部分组织中的VIP程度实现的。【关键词】胃肠动力;龙牡状骨冲剂;组织血管活性肠肽;胃肠激素;小鼠Keyrds:gastrenteriveent;

3、Lnguzhuanggupder;vasintestinalplypeptideVIP;gastrenterihrne;use小儿胃肠动力性疾病非常常见,中医研究发现小儿胃肠动力性疾病常和脾虚相关,其病理特点为“脾常缺乏、“肾气常虚、“稚阳体,邪易干。龙牡壮骨冲剂是湖北省中成药大品种,主要用于治疗和预防小儿佝偻病,软骨病;对小儿多汗、夜惊、食欲不振、消化不良、发育缓慢等症也有治疗作用。本研究目的就在于理解龙牡壮骨颗粒对胃肠动力的影响,以利于龙牡壮骨颗粒二次开发利用。1对象与方法1.1对象雄性昆明种小鼠,平均1820g46周,雌雄兼用,购自湖北省医学科学院实验动物中心。1.2实验试剂放免法测VI

4、P,放免试剂盒购自北京华英生物技术研究所。龙牡壮骨冲剂为武汉健民药业集团消费;胃复安为徐州莱恩药业消费;阿托品为上海丰禾制药消费;新斯的明为山东天福制药厂消费;肾上腺素为武汉远大制药集团股份消费。1.3仪器HAUSPT200S电子天平,美国出品;Labfug400R离心机,德国Heraeus公司产品。2试验方法12.1营养性半固体糊制作2取5g羧甲基纤维素溶于25l蒸馏水中,然后分别参加8g奶粉、4g糖、4g淀粉、3g活性炭,搅拌均匀,配成150l约150g的半固体糊,置冰箱中冷藏12h,使用前2h取出恢复常温。2.2龙牡壮骨冲剂对正常小鼠胃排空及小肠推进的影响昆明种小鼠40只,按体重随机分成

5、4组,为对照组蒸馏水灌胃、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组给药剂量分别为6.3g/kg、3.2g/kg、1.6g/kg,灌胃,给药75in后给予营养性半固体糊1l/只,30in后脱颈处死动物,剖开腹腔,结扎胃贲门和幽门。取胃用滤纸试干后称全重,然后沿胃大弯剪开胃体,洗去胃内容物后用滤纸试干,称胃净重,胃全重和胃净重差值为胃内残留物重,以之与所给糊重的百分比为胃内残留率剖腹摘取胃,胃内残留率=全重-净重/全重100%。自盲肠处取上述小鼠的肠,不加牵引铺平于白纸上,分别量取自幽门括约肌至炭糊最前端及至盲肠的间隔 。计算小肠推进比%=炭糊挪动间隔 /幽盲全长100%。2.3龙牡壮骨冲剂对胃复安所致小鼠胃

6、排空的影响昆明种小鼠40只,按体重随机分成4组,为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组剂量同上,灌胃,模型组小鼠蒸馏水灌胃,后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂,60in后各组小鼠均给予胃复安5g/kg尾静脉注射。15in后给予营养性半固体糊1l/只,同2.2,计算胃内残留率。2.4龙牡壮骨冲剂对阿托品所致胃排空的影响昆明种小鼠40只,按体重随机分成4组,为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组剂量同上,灌胃,模型组小鼠蒸馏水灌胃,后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂,60in后各组小鼠均给予阿托品15g/kg尾静脉注射。15in后给予营养性半固体糊1l/只,同2.2,计算胃内残留率。2.5龙牡壮骨

7、冲剂对新斯的明所致小鼠小肠推进的影响昆明种小鼠50只,按体重随机分成5组,为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组剂量同上,灌胃,模型组小鼠蒸馏水灌胃,后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂,60in后各组小鼠均给予新斯的明0.08g/kg尾静脉注射。15in后给予营养性半固体糊1l/只,同2.2,计算小肠推进比%。2.6龙牡壮骨冲剂对肾上腺素负荷小肠推进的影响昆明种小鼠40只,按体重随机分成4组,为模型组、龙牡壮骨冲剂大、中、小剂量组剂量同上,灌胃,模型组小鼠蒸馏水灌胃,后3组小鼠给予相应剂量龙牡壮骨冲剂,60in后各组小鼠均给予肾上腺素0.4g/kg尾静脉注射。15in后给予营养性半固体糊1l/

8、只,同2.2,计算小肠推进比%。2.7龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织血管活性肠肽VIP的影响:小鼠处死、开腹,取胃组织及肠组织,洗去胃肠内容物后称重量,于1l100生理盐水中煮沸3in,参加1N冰醋酸0.5l中于匀浆器中匀浆提取,参加1N的NaH0.5l中和,4条件下,离心3500r/in30in,取上清液,-20下保存。本试验采用放射免疫分析非平衡法进展测定。2.8统计学处理数据用均数加减标准差表示xsd,统计方法采用方差分析,由SPSS13.0统计软件处理。转贴于论文联盟.ll.3结果3.1龙牡壮骨颗粒对小鼠胃排空的影响见表1。表1龙牡壮骨颗粒对小鼠胃排空率的影响略3.2龙牡壮骨颗粒对小鼠小肠

9、推进的影响见表2。表2龙牡壮骨颗粒对小鼠小肠推进的影响略3.3龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织VIP的影响见表3。表3龙牡壮骨颗粒对小鼠胃肠组织VIP的影响略4讨论中医认为小儿生长发育不良多与脾肾亏虚亲密相关。临床大量研究已证实龙牡壮骨冲剂具有脾肾双补的作用。龙牡壮骨冲剂含党参、黄芪、麦冬、龟板醋制、白术炒、山药、五味子醋制、龙骨等15味中药,所含黄芪、党参可增强单核巨噬细胞吞噬才能,刺激淋巴细胞吞噬,还能促进NK细胞功能,延长组织细胞在体内的存活,并对抗体形成细胞有双向调节作用,用于脾气虚;白术健运中焦,既可助脾胃升发,又可健脾以绝生湿之源,在胃肠动力紊乱治疗方案中应用很广;山药、茯苓、大枣、甘草

10、益气健脾,补后天生化之源;麦冬、五味子酸甘化阴,敛汗生津;鸡内金消积化滞使上述诸药补而不滞,并可促进消化吸收相得益彰。全方共奏补钙壮骨、和胃健脾、益气敛阴、解痉止痛之功,龙牡状骨冲剂全方具有健脾、和胃等成效。因此,推测龙牡壮骨冲剂可影响小儿胃肠动力。本实验参照文献3,用胃复安、阿托品、新斯的明、肾上腺素注射液尾静脉注射复制胃肠动力紊乱小鼠模型。结果显示胃复安可致胃排空加速,阿托品可致胃排空减慢,新斯的明可致小肠推进比增加,肾上腺素可致小肠推进比降低,提示造模成功。本实验以胃内残留率及小肠推进比为指标,采用营养性半固体糊为食物,其营养构造更接近动物日常食物,因此能更客观、准确地反映动物胃排空状况

11、及药物的影响2。本研究发现,龙牡状骨冲剂对正常小鼠胃排空和小肠推进比无影响,但对胃复安所致胃排空加速、阿托品所致胃排空减慢;新斯的明所致小肠推进比增加、肾上腺素所致小肠推进比降低有逆转作用,且从量效关系看随剂量增大作用明显。说明本方在胃肠运动偏抑或偏亢机能状态下具有双向调节作用,符合目前中医理论的新学说“霰弹学说4,即该中药复方作用于多靶体,有别于西药单体制剂,作用于单靶体机制,可起到双向调节作用,表达了中药药理作用的优势。肠道除了分泌经典胃肠激素外,还有胃肠神经肽参与胃肠神经的调节。中医认为脾虚那么失健运,近年的研究发现胃肠激素的增多或缺少也可引起胃肠功能失常,两者在临床表现、胃肠道的机械性消化和化学性消化方面的病理生理改变有许多共同点5。VIP的分泌细胞广泛存在于胃肠道自食道至直肠,主要发如今黏膜的内分泌细胞和黏膜下的细微神经纤维、肠肌神经丛。它有使平滑肌松弛和舒血管作用,抑制胃酸分泌,促进H3的分泌,刺激胰和小肠液的产生6。最近有研究提醒VIP是神经系统和免疫系统之间互相作用的一种信号分子。在维持胃黏膜完好性、增强胃黏膜对损伤的防御才能和促进胃黏膜对损伤的修复中起着关键作用7。本试验进一步研究发现:胃复安可致胃排空加速的同时可致胃肠组织中VIP程度降低;阿托品可致胃排空减慢的同时可致

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