液相基本术语操作

1、液相色谱检测仪器的基本知识及术语仪器结构：液相色谱仪主要包括泵、进样器、色谱柱、检测器；仪器分类：液相色谱仪属于精美仪器中的色谱仪器；依照分为离体系，吸附、分配、离子交换、亲和色谱，体积排阻色谱；依照流动相与固定相的极性，分为正相色谱法和反相色谱法；高效液相色谱法的应用范围：高效液相色谱法适用于高沸点不易挥发、受热不牢固易分解、分子量大的，不相同极性的有机化合物，生物活性物质和多种天然产物，合成的和天然的高分子化合物等。仪器检定：液相色谱仪检定周期为1年，在两次检定间期内进行一次时期核查，也能够依照情况增加核查次数；保护保养：关于液相保护方式主若是周保护和日保护，其中周保护包括联机系统及中工作

2、站软件保护、数据库整理备份、检测器自检、维护单向阀、溶剂砂芯滤头、进样器、电机泵检查保护、溶剂瓶冲洗等；日保护包括环境温度、环境湿度、色谱柱温度、压力流速、进样口可否干净、进液处的砂芯过滤头可否干净、流动相交换时可否有积淀；色谱法的常用基本术语基线：在色谱操作条件下,没有被测组分经过判断器时,记录器所记录的检测器噪声随时间变化图线称为基线.死时间,保留时间及校正保留时间:从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间,以td表示.从进样到出现色谱峰最高值所需的时间称保留时间,以tr表示.保留时间与死时间之差称校正保留时间.以Vd表示.死体积,保留体积与校正保留体积:死时间与载气平均流速的乘积称为

3、死体积,以Vd表示,载气平均流速以Fc表示,Vd=tdxFc.保留时间与载气平均流速的乘积称保留体积,以Vr表示,Vr=trxFc峰面积：流出曲线(色谱峰)与基线组成之面积称峰面积,用A表示.拖尾因子：是反响峰对称性的指标，计算公式：拖尾因子T2d1（其中为5%峰高处的峰宽，d1为峰极点至峰前沿之间的距离）。峰高与半峰宽:由色谱峰的浓度极大点向时间座标引垂线与基线订交点间的高度称为峰高,一般以h表示.色谱峰高一半处的宽为半峰宽,一般以x1/2表示；色谱检测的特点1）矫捷度高；2）线性范围宽；3）分别度与柱效、选择因子、容量因子、解析时间的关系：4）分别度与柱效的平方根成正比，选择因子一准时，增

4、加柱效；5）分配系数与分配比都是与组分及固定相的热力学性质相关的常数，随分别柱温度、柱压的改变而变化：一般经过改变固定相和流动相的性质和组成或降低柱温，可增大选择因子；6）增大选择因子的最有效方法是选择合适的固定液。关于液相色谱，改变流动相的组成，能够有效控制k；仪器的操作规程日立液相设备L-2000/2400操作规程使用环境环境温度：455；相对湿度：小于95%RH。使用前准备检查所用溶液(如流动相，乙腈等)可否足够。检查线路可否连结正常。设备操作方法详细操作以下：依次开启泵开关，检测器开关，自动进样器开关，柱温箱开关；打开软件，点击“i”按钮，出现联机界面，点击“Iinitialize”i

5、ni?.laiz按钮，当文本框出现文字时，表示联机成功；检查所用方法可否吻合要求。如不吻合，进行设置；开泵。检测详细操作以下：建立所需样品盒；点击检测按钮，选择刚建立的样品盒；第一进行走基线；当基线走平时，点击系列样品检测按钮，进行标样，样品检测；当标样检测结果出来时，打开结果窗口，选择所需标样结果，点击“Recalculateri:k?lkjuleit进行重新计算，尔后点击“Calibration”k?librei?n进行定标；当样品结果出来时，打开结果窗口，选择所需样品结果，点击“Recalculate”ri:k?lkjuleit进行重新计算，然后点击“ModifyReport”m?dif

6、ai,?rip?:t,出现结果报告，即可查察样品详细结果。更换流动相详细操作以下：当流动相快不够时或异常时，实时更换流动相；先把泵关闭，将流动相入口放入新流动相中；将泵阀逆时针旋转，进行排气。大体3分钟后，关闭排气功能；排气达成后，将泵阀顺时针旋转拧紧，开泵；走基线，当基线走平时，开始做标样，做样。关机详细操作以下：先把泵关闭，将流动相入口更换为超纯水；将泵阀逆时针旋转，进行排气。大体3分钟后，关闭排气功能；排气达成后，将泵阀顺时针旋转拧紧，开泵；用超纯水冲洗管路大体20分钟；把泵关闭，将超纯水更换为100%甲醇或100%乙腈；将泵阀逆时针旋转，进行排气。大体3分钟后，关闭排气功能；排气达成后

7、，将泵阀顺时针旋转拧紧，开泵；用100%甲醇或100%乙腈冲洗管路大体30分钟；关泵，关液相软件，关泵开关，检测器开关，自动进样器开关，柱温箱开关。保护保养、注意事项进行旬保护检查工作，主要检查事项：软件可否正常、温度、冲洗、进样器、泵单元；每次测量前进行标样检测，斜率达到%要求才能检测样品，测完样品实时清理。按要求进行每天2个小时以上的冲洗。Waters高效液相色谱-2695/2489开机自检详细操作以下：(1)打开Alliance?lai?ns2695和2489的电源开关至ON(1)的地址，仪器开始进行自检；仪器将进行大体5分钟的自检过程，待仪器自我测试达成后，出现以下画面，画面上方的状态

8、显示区会出现“Idle”aidl状态，表示开机测试正常。流动相有机溶剂要求用色谱纯(入口名牌最好)，水或缓冲盐溶液要用超纯水(电阻率：18.2M)，每48小时制备新鲜的水相流动相,特别是100%含水流动相使用时间不高出两天。6根管子都在液面以下。溶剂的地址必定高于溶剂混杂阀(GradientProportioningValve)。greidi?ntpr?p?:?ni?v?lv冲洗柱塞密封垫(SealWash)si:lw?的溶液：含5%10%甲醇的超纯水。洗针液(NeedleWash)ni:d?lw?：50%甲醇：50%水(该比率仅适用于反相试验)。注:以上溶剂或溶液均需用m的膜过滤并超声脱气1

9、分钟，用干净的玻璃容器盛放,防范污染，同时玻璃容器应用超纯水来冲洗而不能够用自来水。灌注柱塞密封冲洗冲洗操作步骤：(1)回到Menumenju:画面，选择Diag；(2)确定SealWashsi:lw?的管路放在正确的地址；(3)按PrimeSealWashpraimsi:lw?，再按Start，直到清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液管，按Halt；h?:lt(4)按Close。注意：密封圈冲洗(Sealwash)si:lw?溶剂，在反相液相色谱中可使用Water/MeOHmethylalcohol甲醇=90/10或Water/Acetonitrile同溶剂)。?sit?unaitril乙腈=95

10、/5(依如实质需要使用不灌注针头冲洗操作步骤：回到Mainmein的画面，选择Diag，选择PrimepraimNdlWash。设定值为30秒，若想要多冲洗几次时，请按StartAgain。冲洗溶剂：50%的甲醇溶液注意：若上述冲洗溶剂无法防范进样时的交织污染，使用较强的溶剂系统来进行冲洗操作。打开真空脱气机如液相仪管路干，可进执行用，如管路不干则依照以下步骤进行操作：按“Menu/Status”steit?s键，进入Status(1)画面；利用方向键将光标移至“Degasser”di:g?s?地址，按Enter；利用上下键选择模式为ON。注意：在开启除气装置时，要确认全部溶剂管路都充满溶剂；

11、若没有溶剂时请执行溶剂的DryPrimedraipraim操作。ditekt执行干灌注确定流动相溶剂的管子放在正确的地址，检测器(Detector?)废液管及定量环(SampleLooplu:p)的废液管可否放置于合适的废液容器中。摇动溶剂瓶内的过滤器(SolventFilter)防范气泡附着在过滤器的表面面。将空的针筒插入抽液阀(Prime/Ventvalue)旋转3圈。s?lv?ntfilt?，中，以逆时针的方向按“Menu/Status”steit?s键，进入Status(1)画面，按“DirectFunction”direktf?k?n功能键，选择DryPrime，按Enter。按下面

12、使用的溶剂开启阀门(比方:OpenA)，尔后将针筒向外拉，抽出510mL溶剂并完满抽出溶剂管子内的气泡，达成后关闭Prime/Vent阀门。在“Enteraduration”djurei?n中输入3分钟，按“Continue”键，泵即以min的流速进行冲洗(Purge)。可重复上两个步骤，将所要使用的流动相溶剂DryPrime。执行湿灌注按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Composition”k?mp?zi?n字段，将欲WetPrime的溶剂输入100%。按“DirectFunctionPrime，按Enter。”direktf?k?n功能键，

13、选择WetWetPrime的原设定值，一般为FlowRate:min，Time:，尔后按下“OK”键，泵即开始进行WetPrime操作。重复上述的步骤直到全部溶剂WetPrime进行达成。设定流动相平衡色谱柱按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Composition”k?mp?zi?n字段，利用仪器面板右侧的数字键设置试验要求的溶剂组成比率，此时会在原溶剂比率表的下方出现新编写溶剂比率表(NewComposition)。设定好新的溶剂组成比率后，按“ChangeComp”t?eind?k?mp功能键(改变溶剂组成比率changecompositio

14、n)，此设定的溶剂组成比率即为当前的比率。利用方向键将光标移至“Flow”fl?u字段，利用仪器面板右侧的数字键设定流速，此时仪器即设定的溶剂组成比率和流速来平衡色谱柱。特别提示:关于老例的反相色谱试验最少要用30倍柱体积来平衡，而关于离子对色谱的平衡可能需要多达500柱体积的流动相来平衡。冲洗进样器溶剂管理系统的前办理(Primethesolventmanagementsystem)要求以下：改变溶剂;发现注射针头内有气泡;每天开机的时候。冲洗进样器执行步骤：按“Menu/Status”键，进入Status(1)画面，在设定溶剂的画面中设定合适的流速与溶剂比率；(2)按“DirectFunc

15、tion”Injectorp?:d?ind?ekt?，按direktfEnter；?k?n键，选择Purge输入SampleLoop体积冲洗的倍数(原定值为6倍)，按Enter；压缩测试(CompressionCheck)请先不需要测试，设定达成后按OK。放入样品盘打开计算机，运转Empowerimpau?软件，选择存放数据文件的Project，运转RunSamples；按DevelopMethodsdivel?pme?d按钮，建立方法；按Monitorm?nit?按钮，观察基线，待基线平稳，可准备进样。关机第一关闭检测器电源；在2695溶剂槽中换上合适的冲洗溶剂，清洗系统约60分钟(针对离子

16、对试验，建议50%乙腈：50%水1mL/min流速冲洗色谱柱2小时以上)；按2695面板Diag键，选择PrimeSealWash，冲洗泵头约1分钟；再选择PrimeNdlWashMenu/Status键进下手动控制模式，按，冲洗进样针12次；按DirectFunctiondirektf?k?n键，选择PurgeInjectorp?:d?ind?ekt?，冲洗进样器(针对离子对试验，建议设定50%乙腈：50%水的溶剂来冲洗进样器)；降低流速至0，待系统压力回零后，关闭2695电源，关闭计算机及显示器电源。岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程准备工作在开机以前，依照所做样品的方法要求，准备好所用

17、流动相，标样及样品。流动相抽滤后超声脱气15分钟，标样和样品膜过滤。打开LC-20A2SETS,CTO-10ASvp，SPD-M20A(或RF-10AXL)电源，待自检经过。打开SCL-10Avp电源，检查开机屏幕应显示各单元，若是某单元没有显示，则不能够控制该单元，需按f2键取消屏幕Fixed标志即可显示并控制该单元。否则检查通讯设置。打开计算机电源或重新启动计算机，待正常进入WINXP操作系统。排空操作：打开LC-20AT泵排空阀(逆时针180度以上)，按Purge键，泵开始排空运转。检查流动相入口Teflon管路没有气泡后，再按Purge键停止排空。压力调零：若是purge时，压力不为零

18、，需要进行压力调零,按LC-20ATvp泵Func键选择CONTROL项，按FUNC键直至屏幕显示*mlZEROADJ项，按Enter键，再按CE键，即达成调零。尔后关紧排空阀(顺时针旋紧)。在计算机中双击LCSOLUTION图标，进入工作站。再双击OperationAnalysis14进入实时解析窗口(依照不相同的检测器选择)。在开机画面中，UserID选中Admin，不需输入Password，点击OK(可听到峰鸣一声)，在下面操作中AB表示在A菜单下选择B，以此类推。选中表示在中打号。在左侧助手栏给出了引导序次操作的图标，自上而下序次执行即可(能够跳过执行)：(1)Systemconfig

19、uration系统配置(第一次安装或更换检测器时配置，平时跳过不操作)；(2)SystemCheck编写仪器检查参数：并且RUN运转检查。平时不操作(跳过)；(3)点击Dataacquisition点击InstrumentParameter进入收集数据编写方法界面进入仪器参数设置界面：选中Normal(通用简单)或Advanced(高级详细)项，分别设定Pumps泵参数，Oven柱箱参数，Detecter检测器参数，Controller系统控制器参数，TimeProgram时间程序参数等。仪器配置不相同，控制单元项的数目多少不相同;Pumps泵参数：Mode控制方式，Flow流速，B，C，DC

20、onc各项浓度，PMax最大压力；Oven柱箱参数：Oven设定温度，TMax最大保护温度；Detecter检测器参数：Cell设定池温。Wavelength设定波长；Controller系统控制器参数；Dataacquisition选中AcquisitionTime后，设置解析时间，等等；LCTimeProg时间程序参数：编写泵梯度洗脱程序，也能够控制柱箱，检测器等等；点击MethodDataAnalysisParameter编写积分参数：设置Width峰宽，Slope斜率，MinArea最小峰面积等等。新建方法介绍使缺省值，待解析完样品后再设置此项参数，获取优化的色谱数据结果后，将参数保留

21、在当前面法中；保留方法：点击FileSaveMethodas如图：起文件名*保留后，该方法即作为当前运转的方法;下载方法：点击DownLoad键，向仪器传达参数。运转方法点击如图图标(InstrumentOn/Off系统开/关)系统开始运转，检查各单元参数应与方法设定一致。等待系统平衡。一般情况下，由于流动相不相同，交换平衡时间不定。能够观察Detecter检测器吸取变化,若是吸取值牢固不变，即认为凑近平衡，能够调零等待，确认不变后，准备进样解析。能够经过改变衰减或予览基线观察基线变化，待基线平稳(初始化显示时与横轴平行)，准备进样操作。进样解析以下：(1)SingleStart对话框；编写样

22、品参数：SampleID样品信息，MethodName方法文件名，DataPath数据储藏路径，DataName数据文件名，Vial样品瓶号(无)，Tray#架号(无)，Injection进样量等；(3)点击OK后，开始进样操作(重复单针进样，重复执行第7步骤即可)；每个样到时间解析结束，依照方法中的积分参数，全部色谱数据会自动进行积分办理。报告予览和打印点击Top返回上级引导操作栏。点击PostRunAnalysis数据后办理界面：点击report进入报告界面：点击reportformat入格式界面：调入报告格式文件也能够自己编写报告格式，尔后点击打开数据文件，将左侧数据文件拖入右侧报告栏即

23、可。关于报告Data进入进格式，能够经过内容选择图标，在报告中确定地址后，增加即可。右键功能很富强，用户能够参照说明书灵便使用。选择快捷图标的预览或打印图标执行报告预览或打印。关机步骤以下：更换洗液冲洗流路系统(如用缓冲液，先用水冲洗1小时，再用有机溶剂冲洗30分钟以上)，最后用有机溶剂封存；(2)冲洗结束后，停止系统运转，在LCSOLUTION工作站中，按退出LCSOLUTION(可听到峰鸣一声)，再完满退出；关系统控制器SCL-10Avp电源开关；关主机SPD-M20A(或RF-10AXL)检测器，LC-20AT泵，CTO-10ASvp柱箱电源开关。冲洗流路系统要求若是使用缓冲液，先用水更

24、换缓冲液，冲洗1小时，尔后更换甲醇冲洗40分钟；若是使用有机溶剂(水)，直接更换甲醇冲洗40分钟即可。安捷伦高效液相色谱操作规程开机打开计算机,进入WindowsXP(或Windows2000)画面,并运转BootpServer程序。打开1100/1200LC各模块电源。待各模块自检达成后，双击Instrument1Online图标，化学工作站自动与1100LC/1200LC。从“View”菜单中选择“MethodandRuncontrol”画面,单击”View”菜单中的“ShowTopToolbar”，“Showstatustoolbar”，“Systemdiagram”,”Sampling

25、diagram”，使其命令前有“”标志，来调用所需的界面。把流动相放入溶剂瓶中。打开Purge阀。单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setuppump选项，进入泵编写画面。设Flow：5ml/min，单击OK。单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pumpcontrol选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道连续Purge，直到全部要用通道无气泡为止。单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击PumpControl选项，选中Off，单击Ok关泵，关闭Purgevalve。单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setuppump选

26、项，进入Pump编写画面，设Flow：min。单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实质体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击Ok。关机关机前，用100%的水冲洗系统20分钟，尔后用有机溶剂冲洗系统10分钟(如ACN)，尔后关泵(适于反相色谱柱，正相色谱柱用合适的溶剂冲洗)。退出化学工作站，及其他窗口，关闭计算机(用shutdown关)。关掉Agilent1100/1200电源开关2.5C8柱修复操作规程目的为节约检测成本，同时一致操作方法，特拟定本作业指导书。适用范围本标准适用于爱杰尔、天津兰博生产的C8柱修复方法（其他厂家能够试一试使用）。C8柱使用一段时间后，会出现柱压高、峰变形问题，大部分的原

27、因为C8柱污染，经过对污染C8柱柱头过滤网进行超声冲洗，尔后再生，解决问题。工具、试剂2个扳手，1把钝剪刀。乙腈（色谱纯）、异丙醇（色谱纯）。修复过程1）将故障C8柱柱头处拧开用2个扳手将C8柱两柱头拧开，取下两端柱头。用钝的剪刀夹住塑料封口，取下塑料封口，过滤网就在封口处。观察C8柱内填料可否有污染，如有污染，用干净的滤纸轻轻擦掉污染物。注意：只能擦去表面一层填料，不能够太多，否则会破坏柱子。两端端口两端端口图1：C8柱内有过滤网图2：C8柱内部塑料封口，内有过滤网2）对两端柱头进行超声冲洗（也许对另一支旧C8柱的后端柱头进行冲洗，并取代此C8柱前端柱头）准备小烧杯，倒入10%乙腈，尔后将第

28、一步取出的两端柱头（包括过滤网）放入烧杯，超声半小时；尔后将10%乙腈更换为100%乙腈超声半小时；最后将100%乙腈更换为超纯水，超声半小时。也许将以前用过的旧C8柱的后端柱头卸掉，进行冲洗，并取代此C8柱的前端柱头。图3：对端口，塑料封口，过滤网进行超声冲洗3）安装柱子将过滤网放入塑料封口处，安装塑料封口，用扳手拧紧柱子。4）连结柱子，进行再生尔后将C8柱装到液相色谱仪，等基线走平后，进标品。观察峰形、柱压等可否正常，若是正常则能够不进行此步骤，否则进行再生：（1）用10%乙腈冲洗30分钟，流速为min。（2）用100%乙腈冲洗2小时。流速为。（3）用100%异丙醇冲洗2小时。流速为。（4

29、）用100%乙腈冲洗2小时。流速为。（5）用10%乙腈冲洗30分钟，流速为min，尔后换上流动相，尔后走流动相，等基线走平后，进标品。5）考据修复收效考据方法1）观察柱压，柱压正常。2）观察标品出峰情况，峰形优异。3）进行回收率考据，回收率达到85%-105%。经过以上方面，说明修复成功，此C8柱能够连续进执行用。6）注意事项拆装C8柱注意事项冲洗手，防范污染柱子内部。拆装柱子时，防范柱头部螺纹变形。连结C8柱与液相色谱仪注意事项连结C8柱入口与液相色谱仪，打开泵，使C8柱出口流出液体，冲5分钟，连结C8柱与液相色谱仪检测器端。防范有异物流入检测池。色谱检测的项目和要点控制点样品检验流程图核实

30、检验计划样品接收样品确认记录样品信上机检测样仪器检查平衡检测器品仪器联机核实出具结果再次核实记录检验结检验计划输入unliab核实出具结果（1）核实检验计划仔细核实检验计划，明确检验项目和批次，核实能够睁开的项目。（2）样品接收经相关检验人员对送检信息及样品的吻合性确认后在送检单上签字，检验人员即可进行样品的检验。（3）样品确认注意检查样品规格、型号、商标、批次等级内容可否清楚，状态可否圆满、变质、污染等。如发现有任何问题，要咨询送检单位。4）记录样品信息将样品名称、批次、送样日期等信息完满的记录到带有编码的原始记录上，要尽可能的保证信息的完满性，和可追想性。4）样品前办理依照相应的检验方法进

31、行办理，并做好记录。5）上机检测样品待仪器平衡达成后，装满洗瓶内的冲洗溶剂（冲洗溶剂要当天用当天配置），依照作业指导书也许国标，走标准曲线也许单点，上机即可。6）记录检验结果仪器走完样品后，依照峰的保留时间定性，峰面积定量，如实记录检验结果于原始记录中，原始记录按方法要求进行实质记录检测值。7）核实出具结果关于外面样品的检测，记录好检验结果后，核实无误后即可出具检验结果。8）核实检验计划关于内部样品的检测，输入结果前需再次核实检验计划，保证没有漏检后方可输入检验结果。9）输入unliab打开unliab系统，选择正确的样品种类和业务种类，创办样品，创办达成后如实填写unliab系统中的信息卡，

32、正确分配检测项目，输入结果。结果报出时，检测结果在检出限以下时，均报未检出；检测结果在检出限以上时，报实测值。如检验处均使用程序输单，则要求各岗位的输单密码不能够外漏；结果输入后不相同意随意改动，如需更正则上报直属领导赞成后则进行更正，其他人员无权更正；全部过程检验结果均在出具结果的当班下班前提交系统或输入固定文件夹中；依照规定的程序进入预定的表格，不相同意输入的内容和文件名称不对应、存在相同或能引起误解的名称，不能够保证储蓄的唯一性。检验报告储蓄要求：如使用Unilab系统出具结果，由于起系统有自动保留功能，故不需要对其进行下载保留，其他电子版检验报告要求每半年进行备份刻盘一次。三聚氰胺检测

33、原理：试样用三氯乙酸溶液-乙酸铅提取，经阳离子固相萃取柱净化后，用高效液相色谱法测定，外标法定量。三聚氰胺检验方法流程图：接样称量样品加%三氯乙酸50ml加0%乙酸铅2ml超声20min离心10min（8000r/min）过混杂型阳离子交换柱净化氮吹20%甲醇溶液定容1ml过滤上机。称量样品：严格依照天平的使用规程操作即可。详细以下：天平使用前检查：(1)准备使用天平时观察周围可否存在震动的情况，若是存在应在震动结束后再称取样品。检查天平的使用环境可否吻合温度1030、湿度2585的要求，水平泡可否处于中央地址。(3)打开天平，待天平达成自检显示“0.0000”时，能够使用。关于过冷、过热和含

34、有挥发性及腐化性的物体，不能放入天平内称量，被测物不得高出天平最大的负载。称量将被测物放在称盘中央，待显示器左侧边的“”标志熄灭后，该数字即为被称物的质量；如称量需盛放物质，先称量容器，按TAR键，显示为零即去皮，再置被称物质于容器中，这时显示的是被称物的净重；每次称量时都应将天平门关闭，称量样品过程中，防范出现抽拉抽屉、人员走动、倚靠实验台等对结果有影响的动作；称量达成后关闭天平开关，但不用断掉电源；称样时所使用的离心管等要编号与样品一一对应，并且记录下样品的质量；加药品加入药品时注意要边加边摇，让药品与样品充分接触，使粉末状样品充分的溶解在药品中。超声办理：超声样品时执行超声波操作规程即可

35、。详细以下：工作前准备：(1)检查电源连结线可否有破坏，电源插头可否插入220V的三芯电源插座并连结牢固；检查冲洗槽可否有异物；检查排水阀门可否关闭；超声办理：(1)样品在超声时要求超声波冲洗机中的液面必然要高于样品的液面;时间控制吻合要求;样品超声办理达成后，关闭电源开关，将槽内水放净，并将机体擦洗干净；断开电源，让机体自然散热;离心样品:样品离心时执行离心计的操作规程即可。以下：(1)检查电源及数据线连结可否牢固，打开仪器电源，设定所需温度;待温度达到设定温度时，打开仪器上盖，将需离心的样品对称放入离心计内，关闭仪器上盖，设定转速，设定运转时间，点击开始离心;离心结束后将样品取出，如暂时不

36、使用，需将仪器上盖盖好，如长时间不使用，需将腔体内冷凝水清理后，关闭仪器电源;过混杂型阳离子交换柱样品离心时准备好所需要的阳离子小柱和试管并一一编号。离心结束后活化阳离子小柱、上样、淋洗等。整个萃取过程要求连结亲密不能以使小柱干燥，并且每一种液体按要求控制流速在1ml/min左右;氮吹:执行氮吹仪操作规程即可，详细以下：用前检查检查电源线路可否正常；检查氮气连结收路可否正常；检测氮吹针可否干净，并进行必要的干净工作;使用连结电源，打开氮吹仪开关，调治温度，准备升温；将针头放置好，调治氮气流路畅达。将氮气开关打开，使用调压阀调治氮气流速合适；待温度和压力达到检验要求，则放置样品；调治针头地址(距

37、离液面1-2cm)，使氮气开始吹干样品；样品吹干后，关闭氮气。关闭氮吹仪开关，取下电源插头；取出样品;注意事项注意保持氮吹仪干净,氮气管路必然要连结亲密;三聚氰胺要求氮吹的温度是505（），并且吹针要用甲醇擦拭干净，防范样品间交织污染，氮气流量以液面有略微的颠簸即可，不能够吹的液面飞溅。并且所使用的试管是玻璃的，在氮吹时小心不要发生强烈得磕碰，省得碰碎试管;浓缩完满的吹干后用所需的溶液1毫升定容，旋涡1分钟，过相应的或针头过滤器(针头过滤器分水系和有机系)缓慢地过滤样品到已经一一编号的进样瓶中准备上机。上机仪器参照条件：流动相：离子对缓冲盐：乙腈=90:10流速：min柱温：40检测器：紫外检

38、测器。波长;240nm进样量：20ul备注：以上仪器条件是参照条件，在实质操作过程中能够依照样品特性和仪器状态做合适调整;此方法的检出限2mg/kg山梨酸、苯甲酸山梨酸、苯甲酸检测原理：去除试样中脂肪和蛋白质，甲醇稀释，过滤后，采用反相液相色谱法奋力测定。方法检测流程图：称量样品加入0.1M氢氧化钠溶液25ml超声水浴15min调治PH到8分别先后加入2ml亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液强烈振摇，静止15min用甲醇定容，静止15min过滤膜过滤取清液上机色谱参照条件：色谱柱：C18,250mm*，5um流动相：甲醇：磷酸盐缓冲溶液=1：9流速：min检测波长：227nm柱温：室温进样量：10ul

39、山梨酸、苯甲酸检出限1mg/kg安赛蜜、糖精钠安赛蜜、糖精钠检测原理：样品中安赛蜜、糖精钠经高效液相反相柱C18分别后，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。方法流程图：称量样品加入氢氧化钠溶液25ml超声15min调治PH到8（用l的硫酸）分别先后加入2ml亚铁氰化钾和乙酸锌溶液振摇静止15min加入40ml甲醇定容到100ml静止15min有机滤膜取清液过滤上机检测。仪器参照条件：柱温箱：30-40紫外检测器：230nm进样量：20ul和10ul色谱柱：C18或C8（250*,5um）流速：min备注：以上仪器条件是参照条件，在实质操作过程中能够依照样品特性和仪器状态做合适调整。安赛蜜、糖精钠

40、的检出限3mg/kg对羟基苯甲酸乙丙酯对羟基苯甲酸酯类检测原理：试样用甲醇超声波提取，取上清液过滤，以高效液相色谱分别，二极管阵列检测器检测，外标法定量。依照DB37/T1100-2008方法检测流程图：称取样品于25ml比色管加入15ml甲醇旋涡2min超声10min用甲醇定容至25ml静止分层，取上清液经有机滤膜过滤上机检测。仪器条件：色谱柱：C18柱，250*流动相：甲醇：l乙酸铵溶液=60:40流速：min柱温：35进样体积：10ul检测波长扫描范围：210nm-400nm，定量波长256nm。本方法检出限为1mg/kg山梨酸、苯甲酸、安赛蜜、糖精钠、对羟基苯甲酸乙丙酯的前办理很相似，注意事项一致为：超声时液面应高于样品的液面。亚铁氰化钾和乙酸锌的地址不能够调换。用力振摇。食品中合成着色剂的测定食品中合成着色剂的测定