黄连中盐酸小檗碱提取工艺探究

1、黄连中盐酸小檗碱提取工艺探究【关键词】黄连；,盐酸小檗碱；,提取工艺；,正交实验设计；,荧光分析法摘要：目的考察乙醇回流提取法提取黄连中盐酸小檗碱时主要影响因素。方法通过正交实验法确立试验体系，采用荧光分析法测定盐酸小檗碱含量。结果选择不同的提取条件盐酸小檗碱提取率有显著差异。结论最优提取工艺是：50%乙醇溶液、8倍体积、85回流提取2次，每次2h。关键词：黄连；盐酸小檗碱；提取工艺；正交实验设计；荧光分析法TheStudiesfExtratinPressfBerberineHydrhlrideinptishinensisFranh.Abstrat：bjetiveTstudytheajrinf

2、luentialfatrsfextratinbyalhlflingnberberinehydrhlrideinptishinensisFranh.ethdsTestablishtheexperientsystebyrthgnalexperientaldesignandadptfluretrytdeterinethententfberberinehydrhlride.Resultsebservedthesignifiantdiffereneftheextratinratefberberinehydrhlrideunderthedifferentextratinnditins.nlusinThep

3、tiuextratinpressasahieved:theadditinf50%alhl(8tiesraherbinvlue)intaterials,refluxingandextratingfr2tiesat85.Keyrds：ptishinensisFranh.;BerberineHydrhlride;Extratinpress;rthgnalexperientaldesign;Fluretry黄连为毛茛科植物黄连ptishinensisFranh.的枯燥根茎。?神农本草经?列为上品。性寒，味苦，具有清热燥湿，泻火解毒之成效。?中国药典?中黄连和盐酸小檗碱一直有收载，具有抗病原微生物、抗腹

4、泻、抗炎和免疫促进以及降血压、抗心律失常、降血糖等药理作用，用于急性肠胃炎、口舌生疮、烧烫伤、心率失常、高血压、糖尿病等疾病的治疗。黄连中主要有效成分为小檗碱，为防止黄连中小檗碱在煎煮、浓缩过程中损失，中药复方制剂中的黄连常单独提龋常用的提取方法有稀硫酸渗漉法、乙醇回流提取法、超声提取法、连续回流法、煎煮法。本文主要讨论乙醇回流提取工艺中影响盐酸小檗碱提取率的主要因素。1仪器与试药1.1仪器960型荧光分光光度计上海精细科学仪器分析仪器总厂；UV型三用紫外灯北京智源通生物技术研究所；UX220H型电子天平岛津公司；HS24型电热恒温水浴锅上海一恒科技等。1.2试药黄连购自北京市丰泰金源药业，消

5、费批号050401，经鉴定为毛茛科植物黄连ptishinensisFranh.的枯燥根茎；盐酸小檗碱对照品供含量测定用，批号：110713200208，中国药品生物制品检定所；盐酸、乙醇、无水乙醇、苯、醋酸乙酯、异丙醇、甲醇均为分析纯；硅胶G薄层板青岛海洋化工厂。2方法与结果2.1预试验，考察盐析条件按照预先选定的提取思路，称黄连粗粉20g，50%乙醇回流提取，2h/次，乙醇提取液浓缩后用浓盐酸调pH2，参加Nal固体，充分搅拌使其完全溶解，放置过夜，抽滤，沉淀物用少量蒸馏水洗，于5060枯燥，得盐酸小檗碱粗品。考察Nal用量对盐酸小檗碱粗品得率的影响表1。结果显示Nal用量15%/V时粗品得

6、率最高，但此时溶液已达过饱和状态，干扰实验结果，且与浓度为10%时粗品得率无明显差异，应选择参加Nal固体10%/V为盐析条件。表1盐酸小檗碱粗品得率略2.2正交实验设计以盐酸小檗碱得率为指标，根据预试结果选择乙醇浓度，乙醇用量，回流提取次数，回流温度4个因素，每个因素取3个程度。见表2。按L9(34)正交实验设计表3对提取结果进展考察。表2因素程度略2.3盐酸小檗碱含量测定2.3.1测定波长确实定精细称取盐酸小檗碱标准品10g于100l容量瓶中，参加无水乙醇，50至完全溶解，冷却后定容，得盐酸小檗碱标准品溶液0.1g/l，以无水乙醇为空白溶液，固定激发波长ex365n，Sens=3,发射波长

7、e自260n至800n进展扫描，结果在525n获得最大荧光强度，因此将ex=365n，e=525n，作为测定波长。转贴于论文联盟.ll.2.3.2标准曲线的制备分别精细量取2.3.1中盐酸小檗碱标准品溶液0.5，0.75，1，1.25，1.5，1.75，2l于250l容量瓶中，用无水乙醇定容，分别得浓度为0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8g/l的标准品溶液，在2.3.1中确定的条件下测定荧光强度，得回归方程Y=9.032+90.679X，r=0.994。2.3.3各提取物中盐酸小檗碱的含量测定精细称取不同提取条件下的盐酸小檗碱粗品5g于50l容量瓶中，参加无水乙醇在50使全

8、部溶解，冷却后定容。用微量注射器汲取6l点于硅胶GNa薄层板105活化30in上，用苯：醋酸乙酯异丙醇甲醇水631.51.50.3为展开剂展开槽中加等体积浓氨液预平衡15in，盐酸小檗碱标准品溶液为阳性对照，展开，取出挥干溶剂，在紫外灯365n下检视，刮取盐酸小檗碱斑点用无水乙醇回流洗脱40in，趁热抽滤，滤液冷却后定容至10l。按2.3.1中条件分别测定各提取物的荧光强度，计算盐酸小檗碱含量。见表3。表3L9(34)正交实验设计及结果略2.4回收率测定分别用微量注射器汲取盐酸小檗碱标准品溶液0.1g/l4，6，8，10l点于硅胶GNa薄层板105活化30in上，以2.3.3中条件展开，洗脱，

9、测定荧光强度，计算回收率。见表4，RSD=2.32%。表4盐酸小檗碱标准品0.1g/l回收率略*标注数字为层析点样点数表5A1B22D2盐酸小檗碱提取率表略2.5重现性考察以正交实验设计中A1B22D2为提取条件，提取并测定盐酸小檗碱提取率见表5，RSD=0.519%。3讨论3.1盐酸小檗碱在热水、热乙醇中溶解度较大，在冷水、冷乙醇中溶解度小，参加Nal可以促进其析出结晶，且Nal用量10%/V最为理想。3.2本实验采用正交实验设计，乙醇回流提取法提取黄连中盐酸小檗碱的最正确提取工艺为：50%乙醇，8倍体积，85回流提取2次，每次2h。3.3荧光分析法灵敏度高，选择性好，但易受外界因素如温度等影