单独高胃泌素血症及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响

1、单独高胃泌素血症及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响研究背景随着肿瘤分子生物学的不断研究，人们相继发现在胃癌、大肠癌、胰腺癌和小细胞肺癌等肿瘤中均有胃泌素基因的表达，并在相应的细胞膜表面也发现有胃泌素的受体。在癌组织及癌旁组织中胃泌素受体阳性表达率也明显高于正常组织，提示胃泌素可作为肿瘤临床诊断与预后的一项参考指标。Jensen RT Consequences of long-term proton pump blockade: insights from studies of patients with gastrinomas J Basic Clin Pharmacol Toxicol，

2、2006，98( 6) : 4-9研究目的探讨胃泌素及其与N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)合用时对大鼠胃黏膜的影响。研究方法Wistar大鼠共24只,分为4组:空白对照组(A组,6只):自由饮用纯净水;胃泌素组(G组,6只):连续每天皮下注射胃泌素300g/kg共90d;MNNG组(M组,6只):饮用含MNNG100g/ml的自来水;胃泌素与MNNG合用组(M+G组,6只):饮用含MNNG100g/ml的自来水,同时连续注射胃泌素每天300g/kg共90d。研究方法第90天取材,比较各组胃的组织学变化,并采用免疫组化的方法检测bcl-2(即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)和ki-67

3、(增殖细胞核抗原)抗体在不同胃组织中的表达。研究结果4个组动物胃黏膜层厚度差异有统计学意义,G组及M+G组与A组和M组相比,胃黏膜层厚度增加；G组、M组及M+G组ki-67及bcl-2的表达量均增加,且与A组比较,差异均有统计学意义。图1 4 组大鼠胃体HE 染色图( 50 ) A: A 组; B: G 组; C: M 组; D: M + G 组ABCD图2 4 组大鼠胃窦bcl-2 免疫组化染色图( 200 ) 图3 4 组大鼠胃窦ki-67 免疫组化染色图( 200 ) A: A 组; B: G 组; C: M组; D: M + G 组讨论胃泌素由分布于胃窦和十二指肠近端的G 细胞分泌，释

4、放贮存于血液、组织和胃肠液当中，起着循环激素和神经递质的双重作用。Kleveland PM，Brenna E，Bakke I，et al Interactions between gastric acid secretagogues and the localization of the gastrin receptorJ Scand J Gastroenterol，2009，44 ( 4) : 390-393讨论胃泌素除了可以刺激壁细胞和主细胞而促进胃酸、胃蛋白酶分泌外，还可以促进胃肠黏膜细胞的分裂增殖，增加DNA、RNA 的合成和蛋白质的含量，并且可以营养胃肠道黏膜及壁细胞群，促进胃肠道黏

5、膜的生长和加快黏膜更新速度等; 还能增加胃黏膜血流量，有利于损伤组织的修复; 还能促进胃窦运动，加速胃排空等。讨论MNNG 是一种较为常见的引起癌变的活性致癌剂，它不依赖酶的代谢而直接作用于胃肠道黏膜上皮，使DNA 链上已有的碱基发生烷化产生突变，发挥其致癌作用，它可诱发大鼠实验性胃癌，现已得到公认。Naresse LE，Kobayasi S Carcinogenesis of the upper gastrointestinal tract induced by N-methyl-N-nitro-nitrosoguanidine and reflux of duodenal contents

6、 in the rat J Acta Cir Bras，2009，24 ( 2 ) : 112-117讨论bcl-2 是一种凋亡抑制基因，在肿瘤细胞的增殖中起重要作用，它是由Tsujimoto 等在人类滤泡型淋巴瘤研究中首先发现而命名，定位于人染色体18q21，长约230 000 bp。bcl-2 蛋白是通过染色体内的转位活化而致其编码的蛋白产物过度表达，位于线粒体外膜、核膜和内质网膜上，主要通过抑制细胞色素C从线粒体向胞质释放，延长细胞寿命，从而阻断细胞凋亡的发生。Tsujimoto Y，Coxxman J，Taffe E，et al Involvement of the bcl-2 gen

7、e in human follicular lymphomaJ Science， 1985， 228 (4706) : 1440-1443.讨论ki-67 是一种人类增殖细胞核抗原，通过测定细胞ki-67 的表达，可以了解细胞的增殖情况。一般认为细胞呈现高增殖状态时，更容易形成肿瘤。Shinohara T，Ohshima K，Murayama H，et al Apoptosis and proliferation in gastric carcinoma: the association with histological typeJ Histopathology 1966. 29( 2) :

8、 123-129讨论胃泌素与其受体结合后通过细胞内信号传导可以促进某些原癌基因如c-myc、c-fos 以及细胞周期蛋白cyclinD1 等的转录与表达，以促进胃肠道肿瘤细胞增殖。Gerdes的研究也表明ki-67 抗原表达可反映肿瘤细胞的增生活性，与恶性肿瘤的发展、转移与预后高度相关。Gerdes J Ki-67 and other proliferation markers useful for immunohistological diagnosis and prognostic evaluations in human malignances JSem in Cancer Biol，1

9、990，1( 3) : 199-206结论胃泌素能促进胃黏膜生长增厚且增加ki-67及bcl-2的表达量,提示单独高胃泌素血症有可能通过促进细胞增殖及抑制细胞凋亡而最终导致肿瘤的形成。意义目前，临床上常用的PPIs 类药物和H2 -受体拮抗剂均可能在抑酸的同时导致胃泌素水平升高，GERD发病率的升高也会使这两类药物的使用增加。而且中国又是Hp感染高发的国家，Hp的感染会进一步升高胃泌素的水平。对胃泌素及其受体的研究将为这两类药物使用期限、年龄范围，以及在使用前是否需要根除Hp，使用期间是否需要进行随访等，给予一定的临床指导意义。意义幽门螺杆菌( H pylori) 感染与消化道肿瘤形成的关系正受到人们的重视，Robertson 等认为这可能与其诱导的胃泌素水平升高有关。因此，对胃泌素的研究，有助于临床上对患者采取合理的治疗方式。Robertson DJ，Sandler RS，Baron JA， et al Gastrin，Helicobacter pylori and colorectal adenomasJ