祛腐生肌膏促进感染创面愈合作用的实验研究

1、祛腐生肌膏促进感染创面愈合作用的实验研究【摘要】目的观察祛腐生肌膏对感染创面的作用，为中医古方和临床用药提供科学根据。方法采用新西兰大白兔12只，制作感染创面动物模型，形成36个创面，随机分为实验组、药物对照组和空白对照组，每组12个创面。实验组用祛腐生肌膏，药物对照组用红霉素软膏，空白对照组用生理盐水进展换药治疗，分别于伤后7天在创面肉芽组织取材，测定肉芽组织蛋白质含量，计数成纤维细胞、毛细血管，检查脓液中吞噬细胞数，记录创面愈合率、愈合时间。结果祛腐生肌膏可以促进创面成纤维细胞及毛细血管的增殖P0.01；增加创面蛋白质含量P0.01，促进肉芽组织生长，进步创面愈合率P0.01，缩短创面愈合

2、时间P0.01。结论祛腐生肌膏具有促进感染创面愈合的作用，其机制包括促进组织修复细胞和炎性细胞的增殖,促进肉芽组织生长。Abstrat：bjetiveTbservetheeffetfQuFuShengJiintentninfetedundsandtexplretheehanisfatinsastprvidesientifibasisfrlassialpresriptinsfTandlinialediatin.ethdsAnialdelsfundinfetinereestablishedin12NeZealandrabbitsith36unds,hihererandlyrandizedintex

3、perientalgrup,drugntrlgrupandblankntrlgrup,ith12undsineahgrup.TheexperientalgrupastreatedithQuFuShengJiintent(rintentfRevingPutrefatinandPrtingTissueRegeneratin);drugntrlgrupastreateditherythryinintentandthentrlgruptreatedithnralsalinefrdressingtreatentalne,respetively.Saplesfgranulatintissueserebta

4、ined7daysafterinjurytdeterinetheprtEinlevels,untsffibrblastsandapillariesasellasthephagytiuntsinthepus,andtheprprtinfundhealingandundhealingtieerererded.ResultsQuFuShengJiintentanprtetheprliferatinffibrblastsandapillariesftheunds(P0.01),inreasetheprtEInntentftheunds(P0.01),prtethegrthfgranulatintiss

5、ueandinreaseundhealingprprtin(P0.01),andreduethehealingtie(P0.01).nlusinQuFuShengJiintenthastheeffetfprtingthehealingfinfetedunds,theehanisfhihinludesprtingellrepairandtheprliferatinfinflaatryellsandgrthfgranulatintissue.Keyrds:infetedund;undhealing;QuFuShengJiintent已换祖国医学的长期临床理论证明，中药对于创面愈合有着显著的作用，祛

6、腐生肌膏为南京中医药大学附属徐州医院老中医经历方，已用于临床多年。本实验观察祛腐生肌膏对感染创面的作用，现报道如下。1材料和方法1.1动物模型及分组采用新西兰大白兔12只，雌雄各半，体重2.252.5kg，由徐州医学院实验动物中心提供。于实验前1周购入，单笼喂养，自由饮水与摄食,实验当日禁食。用2%戊巴比妥钠按30g/kg的剂量静脉麻醉，动物背部剃净毛备皮，面积约为2015。在备皮区常规消毒，在距腰部脊柱旁开2处用特制创伤切割器打孔器，直径1.5在兔背部切割直径约为1.5圆形创面3个，深达肌层，肌层伤口厚度约0.3，止血后用污土污染创面，以油纱条、敷料、胶带固定，2天后去除覆盖物，见创面周围充

7、血红肿，分泌物增多，并出现少量脓苔附着。12只兔形成36个创面，随机分为实验组、药物对照组、空白对照组，每组12个创面，每天统一时间用药。1.2药物组成及制剂加工祛腐生肌膏由紫草、象皮、当归、生龟板、生地、血余炭、白芥子、生石膏、生炉甘石、白蜡等组成，按一定比例及炮制方法，由南京中医药大学附属徐州医院制剂中心制成软膏，装盒备用自制制剂批号：030108。1.3用药方法方法参照文献1-2，实验组每天换药时用生理盐水清洗创面后，外涂祛腐生肌膏5g，用敷料包扎，每天换药1次。药物对照组每天用生理盐水清洗创面后，外涂红霉素软膏5g，用一样敷料包扎，每天换药1次。空白对照组每天仅用生理盐水清洗创面1次，

8、用一样敷料包扎，每天换药1次。1.4肉芽组织蛋白质含量测定在伤后第7天取新生肉芽组织，采用考马斯亮蓝法测定肉芽组织蛋白质含量，所用试剂由南京建成生物工程研究所提供。取0.050.005g肉芽组织，置入浓度为1l/L的氢氧化钠溶液10l中48h，使蛋白质充分溶解，用751型紫外分光光度计分别测定260n和280nD值，并根据以下公式计算蛋白质的含量。蛋白质含量(g/g)=1.45D280n-0.74D260n,计算出肉芽组织中的蛋白质含量。1.5组织学检查1.6脓液涂片检查吞噬细胞数取创面浓液按常规涂片35张，以瑞氏染色法染色，光学显微镜下计数整张涂片的呑噬细胞数。1.7创面愈合率及愈合时间的测

9、定各组分别于伤后第6、8、12、14天用涤纶投影膜覆盖创面，描绘创缘形态，在方格计算纸上计算出创面面积，计算创面愈合率。创面愈合率=1-现伤口面积/原伤口面积100%。观察各组创面完全愈合所需时间。1.8急性毒性试验方法参照文献1-2。1.9统计学处理计量资料数据以s表示，用SPSS10.00软件进展统计分析。计量资料组间比拟采用方差分析和q检验，率的比拟采用2检验。P0.05认为差异有显著性。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1伤后第7天3组创面肉芽组织蛋白质含量的比拟伤后第7天，实验组创面肉芽组织蛋白质含量高于药物对照组和空白对照组P0.01。见表1。表1伤后第7天3组创面肉芽组织蛋白质含量

10、的比拟略2.2组织学观察结果2.2.1肉芽组织中成纤维细胞数的比拟在肉芽组织形成早期,成纤维细胞大量增殖。中期数量急剧增多,排列密集,并向创面表浅部位生长。晚期,成纤维细胞转变成纤维细胞。在伤后第4、8天，计数肉芽组织中成纤维细胞数，实验组的成纤维细胞数高于空白对照组和药物对照组P0.01。见表2。2.2.2肉芽组织中新生毛细血管形态及数量的比拟实验组和药物对照组肉芽组织内均可见大量毛细血管增生,毛细血管分支多且与肉芽组织外表垂直排列,肉芽组织中有大量成纤维细胞及各类白细胞,胶原纤维排列松散。实验组与药物对照组相比,有以下特点:毛细血管数量较多;毛细血管管腔扩大;可见毛细淋巴管;毛细血管内皮细

11、胞体积较大;胶原纤维较纤细、松散。在术后第4、8天,实验组的新生毛细血管数量明显高于空白对照组和药物对照组P0.01)。见表2。表2伤后不同时间3组肉芽组织中成纤维细胞及新生毛细血管数的比拟略2.3伤口脓液涂片吞噬细胞计数实验组脓液涂片吞噬细胞计数明显高于药物对照组和空白对照组P2.4不同时间创面愈合率的比拟用药后不同时间实验组创面表皮愈合率和肌肉愈合率均明显高于药物对照组P0.05)和空白对照组P0.01)。见表4、5。表43组用药后不同时间创面表皮愈合率的比拟略表53组用药后不同时间肌肉愈合率的比拟略2.5创面愈合时间的比拟实验组创面愈合时间较药物对照组和空白对照组明显缩短P0.01)。见

12、表6。表63组创面愈合时间的比拟略2.6完好及破损皮肤浸透性急性毒性试验实验25天，实验兔未见死亡，破损皮肤伤口根本愈合，未发现毒副作用。3讨论创伤愈合包括炎症反响、肉芽组织形成和组织重建3个不同但又彼此交织的过程。参与皮肤伤口愈合的细胞主要包括各种炎性细胞和组织修复细胞，前者包括中性粒细胞、巨噬细胞、肥大细胞等；后者主要包括血管内皮细胞、表皮细胞和成纤维细胞3。成纤维细胞是构成肉芽组织的主要成分之一，在创伤愈合中起着非常重要的作用4。吞噬细胞是创伤愈合过程中又一重要的细胞成分，它一方面能去除创面部分受损伤的细胞、坏死组织和病原体；另一方面通过分泌多种细胞因子来调控创伤修复5。创伤愈合过程中血

13、管内皮细胞也具有重要作用。创伤后形成的肉芽组织的主要成分是成纤维细胞和毛细血管，新生的毛细血管那么是由邻近毛细血管内皮细胞分裂增生演变而来3。本实验结果说明，祛腐生肌膏具有较强的促进吞噬细胞、成纤维细胞和毛细血管增殖的作用。肉芽组织具有抗感染、保护创面、机化血凝块、去除坏死组织和异物、填补组织缺损等作用。细胞主要由蛋白质构成，细胞数量增多，组织构造中的蛋白质随之增多，检测肉芽组织的蛋白质含量可初步估计肉芽组织的生长情况。本实验结果显示，实验组肉芽组织细胞中蛋白质含量较对照组高，说明祛腐生肌膏有促进肉芽组织蛋白质合成的作用。创面愈合率、创面愈合时间是最直接而有效的创面愈合评价指标。本实验结果说明

14、，祛腐生肌膏能显著进步创面愈合率，缩短创面愈合时间，促进创面愈合效果较为理想。本实验结果说明，祛腐生肌膏对感染性创面脓腐未净同样有促进愈合的作用。理论上说明中医的祛腐生饥拔脓助长包含了抗感染的作用，在理论中扩大了祛腐生肌膏的适用范围，而且使用方便，价格低廉，毒副作用小，可以在临床上推广使用。【参考文献】1徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1991:713.2施新猷.医学动物实验方法.北京：人民卫生出版社，1983:217.3屈纪富，程天民，郝利参与皮肤伤口愈合的细胞及其作用的研究进展J.中国临床康复，2001，5(24)：74-75.4kH，StephensP,DaviesKJ,etal.DefetiveextraellularatrixrerganizatinbyhrniundfibrblastsisassiatedithalteratinsinTIP-1,TIP-2,andP-2ativity