实验五血浆凝固酶实验与肥达实验

1、关于实验五血浆凝固酶实验与肥达实验第1页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三目录一 血浆凝固酶实验二、肥达氏反应实验第2页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三熟悉血浆凝固酶试验的意义。目的：一 血浆凝固酶实验材料：菌种 ： 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌其他： 新鲜兔血浆(或人血浆)、 NS等第3页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三纤维蛋白原+血浆凝固酶 不溶性纤维蛋白 玻片法原理：一 血浆凝固酶实验细菌形成凝块黏附于细菌第4页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三 充分混合，观察结果。 结果：阳性无法混匀，细菌在血

2、浆中聚集成团块； 阴性呈均匀混浊 ； 血浆+NS+细菌1 血浆+NS+细菌2 方法：一 血浆凝固酶实验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌意义： 鉴定致病性与非致病性葡萄球菌。 第5页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三目的：二、肥达氏反应实验1、掌握肥达试验的原理，操作方法及结果判断。2、熟悉其临床意义。第6页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三一、肥达氏反应实验材料：1标本 感染待测血清（稀释度1：20）。2试剂 伤寒沙门菌菌体抗原（O）及鞭毛抗原 （H）、甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原及乙型 副伤寒沙门菌鞭毛抗原。3其他 微孔反应板、50l移液器、吸头、水浴 箱等

3、。第7页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三原理：一、肥达氏反应实验第8页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三（1）在微孔反应板编号4排6列。（2）每孔加入生理盐水50l 。（3）吸取待检血清50l加入每排第1孔，连续倍比稀释 到第5孔。从第5孔吸出50l弃去。第6孔为对照管。 这样每排从第1孔至第5孔的血清稀释度为1：40, 1：80,1：160，1：320,1：640。 （4）每排每孔加入对应的伤寒菌液50l 。（5）混匀，置于52水浴箱中1h后观察 。方法：二、肥达氏反应实验第9页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三50实验方法

4、5050505050505050501:401:801:1601:3201:64050弃掉1234550650NS(l )待测血清对照管50505050灭活的伤寒菌液50l 50l 50l 50l 50l 50l 抗体稀释度彻底混匀52, 1h二、肥达氏反应实验第10页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三结果： 先观察对照管，应无凝集现象。“+” 细菌全部凝集，液体清澈，孔底形成大片凝集物。“+” 细菌大部分凝集，液体澄清，孔底明显凝集物。“+” 细菌部分凝集，液体半澄清，孔底有明显凝集物“+” 少量细菌凝集，液体较混浊，孔底少量凝集物。“-” 液体混浊，细菌无凝集。与对照

5、孔相同。二、肥达氏反应实验第11页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三 效价（滴度）的判定： 产生明显凝集反应（+）的最高血清稀释度为血清中所测抗体的效价。效价愈高，表示血清中所含该抗体愈多。如血清的最低稀释度仍无凝集，或血清效价低于1：80 ，则为阴性，应报“1：1280”。二、肥达氏反应实验第12页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三实验预期结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照相同+小、部分凝集块中等混浊+大多凝集管底轻度混浊+大的凝集块清亮凝集程度沉淀上清第13页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三H与O抗体的性质及其消长意义预防接种； 非特异性回忆反应感染早期、其他沙门菌引起的交叉反应患肠热症可能性大高低高出现较晚，维持时间长IgGH抗体低高高出现较早， 维持时间短IgMO抗体体内出现情况体内出现情况抗体类型第14页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三管底沉淀凝集程度最高稀释比例待测血清的滴度效价第15页，共17页，2022年，5月20日，22点11分，星期三思考题1. 李某发热、全身不适，体温持续升高，最高达40，采血进行肥达氏实验检测，检测结果是O抗体凝集效价是1:80， H抗体凝集效价是1:320。