液质联用操作规程

1、液质联用仪操作规程 1液质联用仪操作规程 18 页SOPI-Xevo-TQSFSIDC适用范围TQSMS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。职责操作人员依据本规程操作仪器，认真填写试验使用记录。保管人员负责对仪器进展定期维护和保养。3操作程序日常操作步骤： 设置样品表 运行样品定量打印报告。注：假设一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。project 的操作步骤：project用标准品调谐编辑质谱方法编辑UPLC 方法设置样品表运行样品定量 打印报告。开机：彻底开机挨次仪器已关闭 win

2、dows 正常启动 30s 或者是有响声。5min，离子源透视镜里面亮。 界面菜单MS1 turbo 内升到80至少抽真空4 个小时 查看真空状态主界面massconsole-界面左侧xevotqmsdetector加号开放-msdisplay碰撞室真空度达7.xe-5mbar 。日常开机挨次仪器未关闭 预备样品 灌注二元泵样器 建立液相方法 平衡液相3.3.1. 预备流淌相 10mM。3.3.2.样品要求0.22um 的膜过滤。3.3.3 灌注二元泵 MSConsole,UPLC 交互显示界面，点击左栏 Acquity 3 分钟。 Wash5cycles,Samplesyringe20eo0

3、t 开头灌注. 左右。设定流速，平衡液相在MasslynxInletMethod status , 0.2ml/min,50:50。预备质谱3.4.1. 计算化合物单同位素养量数 Calculator, 输入化合物的分子式ClBr 等正确的输入方法,Monoiso,IonMode:离子 ,Calculate。Intellistart 进展自动调谐 MSTune图标，翻开调谐窗口，单击IonModeES+ 或ES- ，单击APIGas 图标翻开氮气，单击翻开高压 相流速0.2ml/min, 水：乙腈的比例为50:50。把标准品调谐液放入质谱仪塑料瓶位置处的 A或 B 或 C号位(注:浓度在 20

4、0ppb左右)A,FlowState LC Purge 图标。 模式，设定 Function 为 MS1 scan， 5响应比较稳定。保存调谐文件：FileSaveAs 至已建的工程下。 TQMSDetector Method ，ES+ 辑窗口，选择 Switch to Advanced (化合物名称) ，MolecularMass/Formula分子量或分子式)AdductA+M+H+，选择LoadExistingSampleTune Name MRM Method 前框打钩，并在方框出输入MRM 方法的文件名，路径为已建的工程下。在PrintReport 前方框打钩，ConeVoltage

5、 ，CollisionEnergy 处为默认值，Fluidics 下 SampleFlowRate 参数与 式下的进样参数保持全都单击右边的Start开头自动调消灭 ，查看intellistart 报告查看 intellistart 中自动生成的质谱方法：xSdSd 编辑对话框 , e, 中保存的质谱方法的文件，双击方法,如觉察自动调谐生产Channels 窗口手动修改参数，填写 end 时间 ，此时间必需与液相色谱方法运行时间保持全都FileSaveAs, 保存质谱方法文件。建立液相方法编辑液相方法Inlet ，输入溶剂名称，runtime 及梯度洗脱程序，runtime OK, FileS

6、aveAsLoadMethod ，平衡液相。建立样品列表 samplelist File InletFile, InjectVolume 中输入进样体积，可右键Add, 增加样品表的行数，保存样品表：FileSaveAs 。数据采集和处理. OK Real-time . 图，单击 DefaultRange 图标。DisplayMass 查看Function,DisplayTIC 查看 的数据FunctionFunctionFunction，MSScan 的数据。MSScan Addtrace ，单OK。 质谱图 在色谱图中选择 Display TIC, 选择ScanWaveDSAddtrace

7、 ，单击OK。3.6.3.3. 选择ProcessCombinespectra. 分别用右键输入信号和本底噪音.单击OK. DaughterScan ProcessSmoothOK。数据处理-外标定量法 单击建方法图标，建一个定量方法。 (添加的化合物)图标，添加一个的化合物。 和Compound Name前面打勾 下低浓度标准品的色谱图，Display/Mass chromatogram选出要定量的化合物的离子对，一般强度高的化合物用来做为定量 Acquisition Function Number, Quantification Trace, Predicted window 将自动输入到

8、定量方法中。留意：在色谱图上拉的时候，要遵循两个原则，拉的位置要以色谱峰的峰尖左右对称，拉的宽度要超过峰的起点和终点。单击工作曲线图标，在工作曲线设置页面，填入ng/mlug/kg，ppbppm 等。Conc.A。PolynomialTypeLinear. 可依据自己行业的规定 WeithtingFunction(权重)_1/x 依据自己行业规定假设全部的化合物均用一样的工作曲线的参数，Yes翻开积分参数列表，选中xkd打勾， 并不是很对称的色谱图，可先在色谱图上先设定参数，积分，好积分参数满足之 分方法，Smooth 方法建议用 smooth iteration1,smoothwidth2重

9、复上面的过程把其他几个化合物的信息全部参加 ， 文件夹中，正确的 samplelist 项之外还要有sampletype,ConA, 等选中要处理 方法单击OK 后，消灭定量结果对话框。可依据自己的需要，用鼠标右键，ChangColumnOrder 来 中的选项。关机程序日常关机：2 分钟，流速设为30 80%20 分钟， 停流速，水相，冲洗至少30 80%20 分钟，停流速，柱温为室温。面masstune 或者电脑下面仪器图标界面左侧偏上 界面或者电脑下面仪器图标6个 关高压masstune界面右下角 100度以 界面或者电脑下面仪器图标左侧偏上。ES+source-temperature-

10、desolvation 彻底关机先完成日常关机 10 以 界面左侧偏上diagnostics-vacuum-sourceturbospeed%退出软件，其他界面先退出，主界面最终退出关质谱电源 电源挨次无所谓，关氮气发生器，氩气。UPSUPS 电源，计算机电源。日常维护、保养及留意事项仪器室要保持干净、干净、无尘；配套设施布局合理。20-25，保持恒温；相对湿度最好关闭离子源内的真空隔离阀。用一字镙丝刀顺时针方向拧开机械泵上的 Gas Ballast30 分钟后再把 GasBallast 阀旋转到原来关闭的ESIAPCI开高压之前肯定要先开氮气，关氮气之前肯定要先关高压。ESI面：三氟乙酸TFA多用于蛋白质和多肽分析，但对ESITEAm/z102M+H+峰，有可能会抑制某些碱性化合物在正ESIESI的响应；(phosphate,borate,citrate,etc.)；外表活性剂、清洁剂和去污剂 (会抑制离子化)；以及无机酸 (sulphuric acid, phosphoric acid etc.)等。连接 UPLC 泵、色谱柱、注射泵以及 ESI 探头时，要将仪器置于 standby 状态。条件下，应当做质量数校正。时间