妇科养荣胶囊的质量标准研究

1、妇科养荣胶囊的质量标准研究【摘要】目的：按新药审批标准为妇科养荣胶囊制定质量标准。方法：以TL法对妇科养荣胶囊中的当归、陈皮、黄芪三味药进展定性鉴别；以HPL法测定妇科养荣胶囊白芍中芍药苷23H2811的含量。结果：试验采用薄层色谱法定性鉴别，色谱斑点明晰，阴性液无干扰；以HPL法测定该胶囊白芍中芍药苷的含量，方法精细度、稳定性、重复性良好，平均回收率为100.25%，RSD为1.7%。结论：本试验所确定的质量分析方法稳定可靠，能作为妇科养荣胶囊的质控标准。【关键词】妇科养荣胶囊质量标准化方法学研究StudyntheQualityStandardfFukeYangrngapsules【Suar

2、y】bjet:frulatethequalitystandardfrtheFukeYangrngapsulesardingttherequireentbyEvaluatinfhineseGvernent.ethds:thequalitativeidentifyingethdbyTLasestablishedfrDanggui、henpi、HuangqiandShayaganasquantitativelydeterinedbyHPL.Resultshs:thesptsntheTLarelearbytheethdsfqualitativeidentifiatinbyTL,thereslutini

3、sellandhavennegativesapleinterferene.TheethdfrdeterinatingthententfapsulesbyHPLissuitablefrthefrulatefthequalitystandardithsuffiientauray、stabilityandreappearane.Theeveragefreveryrateis100.25%,RSDis1.7%.nlusin:thequalitativeandquantitativeanalytiethdsarestableandreliable.【Keyrd】TheFukeYangrngapsules

4、;QualityStandard;ethdAppraise妇科养荣胶囊是根据已有国家标准的妇科养荣丸改变剂型制得，属中药8类品种。方中当归、川芎、白芍对补血活血、调经止痛、月经不调、经闭痛经有较好的作用。根据药品标准中药成方制剂标准1998年，标准号：S3-B-2893-98进展了质量标准的研究工作，拟定了质量标准。本专题对处方中各药味定性、定量方法加以挑选和分析，从而确立稳定可靠的消费质控标准。1薄层定性鉴别妇科养荣胶囊由当归、白术、熟地黄、川芎、白芍酒炒、香附醋制、益母草、黄芪、杜仲、艾叶炒、麦冬、阿胶、甘草、陈皮、茯苓、砂仁十六味药材经加工制成。本品所参照的妇科养荣丸中药质量标准S3-B

5、-2893-98中并无药材的薄层鉴别试验，对于本品的定性鉴别试验，经查阅有关文献与现行药典，拟订了鉴别当归的薄层鉴别，陈皮的薄层鉴别，黄芪的薄层鉴别。本试验对具有对照品与对照药材的药味重点进展了挑选，最后确立采用TL法检查当归、陈皮、黄芪，试验条件与方法说明如下。其中在黄芪的鉴别中，我们对鉴别试验进展了研究，结合“张启明等，妇科养荣丸鉴别方法研究文献中的鉴别方法，为使样品的显示的荧光点更明晰，我们对检视局部进展了优化，经试验省略了原有的显色局部喷以10%的硫酸乙醇溶液，105加热5分钟后，在紫外光灯365n下检视，而是直接在紫外光灯365n下检视，从而使鉴别方法更简便、准确。所有仪器：薄层层析

6、装置、薄层板、聚酰胺薄膜、紫外光灯、烘箱。试剂：所用试剂为分析纯，薄层层析用硅胶G由青岛海洋化工制造为化学纯。1.1鉴别当归实验方法：本试验参照?妇科养荣丸浓缩丸质量标准研究?中方法试验，采用正己烷-乙酸乙酯91为展开剂。取本品内容物10g，研细，加乙醚20l，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1l使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材2.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法?中国药典?2022年版一部附录B试验，汲取上述两种溶液各5l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯91为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365n下检视。供试品色

7、谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一样颜色的斑点。经屡次试验，待测组分斑点明晰，方法重复性良好，阴性液无干扰。1.2鉴别陈皮实验方法：本试验参照?妇科养荣丸鉴别方法研究?方法试验，采用36%的冰醋酸为展开剂。取本品内容物10g，研细，加醋酸乙酯-冰醋酸191混合液40l，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加水30l溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20l，分取乙醚液，挥干，残渣加1l醋酸乙酯使之溶解，作为供试品溶液。另取陈皮对照药材0.5g，加醋酸乙酯-冰醋酸191混合液10l，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法?中国药典?2022年版一部附录B试验，汲取上述两种溶液各5l，分别点于同

8、一聚酰胺薄膜上，以36%的冰醋酸溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光365n下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一样颜色的荧光斑点。经屡次试验，待测组分斑点明晰，方法重复性良好，阴性液无干扰。1.3鉴别黄芪实验方法：本试验参照?妇科养荣丸鉴别方法研究?方法试验，采用氯仿-甲醇-水1372为展开剂。取本品内容物10g，研细，加甲醇40l，加热回流2小时，滤过，浓缩，浓缩液加于已处理好的中性氧化铝柱100目120目，5g，内径10n15n上，用40%甲醇100l洗脱，搜集洗脱液，蒸干，残渣加水20l使之溶解，用饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20l，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲

9、醇1l使之溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1l含1g的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法?中国药典?2022年版一部附录B试验，分别汲取供试品溶液10l、对照品溶液25l，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水1372为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光365n下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显一样颜色的荧光主斑点。经屡次试验，待测组分斑点明晰，方法重复性良好，阴性液无干扰。2检查2.1砷盐按砷盐检查法?中国药典?2022年版一部附录F试验。精细量取每1l含1g的标准砷溶液1.0l、2.0l、3.0l，置坩埚中，同供试品砷斑制备方法，依法制备标准砷斑依次

10、为A、B、。取本品10粒，研细，取约1g，精细称定置坩埚中，缓缓灼烧至完全炭化，放冷，加硫酸1l使潮湿，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5l，蒸干，至氧化氮蒸汽除尽，放冷，在540灼烧使完全炭化，放冷，加水25l，定量转移至A瓶中，加碘化钾试液5l与酸性氯化亚硒试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即连接导气管与A瓶，置37水浴中，反响45分钟，取出溴化汞试纸，即得。试验结论：检验其砷盐含量低于2pp。2.2炽灼残渣按炽灼残渣检查法?中国药典?2022年版一部附录J测定。取本品10粒，研细，取约1g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精细称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温，加硫酸1l使潮湿，

11、低温加热至硫酸蒸汽除尽后，在540炽灼使完全灰化，移置枯燥器内，放冷至室温，精细称定后，再在540炽灼至恒重。试验结论：检验其炽灼残渣含量低于0.2%。2.3重金属按重金属检查法?中国药典?2022年版一部附录E第二法测定。取炽灼残渣项下残渣，分别加硝酸0.5l，蒸干，至氧化氮蒸汽除尽，放冷，加盐酸2l，置水浴上蒸干后加水15l，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液PH=3.52l，微热使溶解，移置纳氏比色管中，加水稀释成25l乙管：1、2、3；另取配制供试品溶液的试剂共四份，分别置瓷皿中蒸干，各加醋酸盐缓冲液PH=3.52l与水15l，微热使溶解，分别移置纳氏比色管中，分别加每1

12、l相当于10g的标准铅溶液0.5l、1.0l、1.5l、2.0l，加水稀释成25l甲管：1、2、3与4。在甲乙两组管中，加硫代乙酰胺试液各2l，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上而下透视，比拟甲管与乙管的颜色。结果：乙管1、2、3的颜色均比甲管2的颜色浅。试验结论：检验重金属含量低于10pp。转贴于论文联盟.ll.2.4其它检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定。3含量测定3.1测定指标与测定方法确实立本制剂由当归、白芍、黄芪等十六味中药经提取加工制成，我们以液相色谱法测定主要药物白芍中芍药苷的含量。当归为本方君药，其有效成分藁本内酯缺乏对照品，测定阿魏酸时川芎又有干扰，难于建立含量测定方法。因此

13、，选择方中主要药物白芍中的芍药苷作为含量测定方法。本实验参考?中国药典?2022年版一部“含量测定项下方法采用HPL法测定白芍中芍药苷的含量。在选定的色谱条件下，供试溶液中芍药苷与相邻组分别离度良好，阴性液无干扰。经方法学考察，方法的重复性、稳定性、精细度、回收率试验均符合有关规定。因此，确立本制剂定量指标为芍药苷，定量方法为液相色谱法。3.2仪器与所用试剂仪器：高效液相色谱议UV200大连依利特科学仪器；电子天平AL204梅特勒托利多上海称重设备公司；试剂：甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯；芍药苷供含量测定用，中国药品生物制品检定所。3.3检测波长确实立精细称取芍药苷对照品适量，加50%甲醇制

14、成每1l含100g的溶液，摇匀，照紫外分光光度法?中国药典?2022年版一部附录A，在200500n处扫描，溶液在236n波长处有最大吸收，确定检测波长为236n。3.4方法系统适用性试验考察3.4.1流动相的挑选与确立本实验先后采用0.05l/L磷酸二氢钾溶液-乙腈8515，甲醇-水-冰醋酸55450.5为流动相，在系统的条件下，供试溶液中芍药苷与相邻组分别离度良好，阴性液无干扰。故确立甲醇-水-冰醋酸55450.5为流动相系统。3.4.2色谱条件色谱柱：Diansil18柱2504.6，5u；柱温：室温；流动相：甲醇-水-冰醋酸55450.5；流速：1.0l/in；检测波长：236n。3.

15、5阴性干扰试验3.5.1阴性液制备取除去白芍以外的其它药材，按样品制备方法制成阴性液。供试品溶液制备方法：取装量差异项下的本品内容物，研细，过三号筛，取细粉1.5g，精细称定，精细参加甲醇25l，称定重量，加热回流提取1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精细量取续滤液10l，蒸干，残渣用50%甲醇约10l，分次转移至已处理好中性氧化铝柱中性氧化铝5g，内径约1，50%甲醇20l预洗上，再用50%甲醇35l洗脱，搜集洗脱液置50l量瓶中，加50%甲醇定容到刻度，摇匀，精细量取10l浓缩至干，残渣用50%甲醇1l溶解，即得。3.5.2对照品溶液制备取芍药苷对照品适量，精细称定

16、，加50%甲醇制成每1l含100g的溶液，即得。测定法精细汲取供试品溶液、阴性液、对照品溶液各20l，注入液相色谱仪中，绘制液相色谱图，由色谱图提示在对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有一样保存时间的色谱峰，阴性液在此保存时间处无色谱峰。测定结果提示，其它组分对本品中芍药苷含量测定无干扰，方法专属性良好。根据测定结果，确定本实验理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000。3.6线性范围考察取芍药苷对照品10g，置10l量瓶中，加50%甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，再分别精细量取0.6、0.8、1.0、1.2、1.4l，置10l量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。精细量取上述溶液各20l，分别

17、注入液相色谱仪，测定峰面积，结果见下表。以峰面积Y对进样浓度X，g/l进展线性回归，回归方程为Y=226.168X135.76，相关系数R2=0.9996。结果说明，芍药苷浓度在60140g/l范围内，峰面积与芍药苷浓度线性关系良好。表芍药苷线性关系试验结果3.7最低检测限取线性关系试验项下的3号溶液1l，置50l量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，再取1l置10l量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，再精细量取20l注入液相色谱仪中，记录色谱图，信噪比约为31，最低检测限为4ng。3.8定量限取线性关系试验项下的3号溶液1l，置50l量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，再取3l置10l量

18、瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，精细量取20l，注入液相色谱仪，记录色谱图。色谱图中，信噪比约为101，计算定量限约为12ng。3.9稳定性试验考察精细汲取供试品溶液20l，每隔2小时进样测定一次，共测定4次，结果见下表。平均值为1509.16，RSD为1.8%。表稳定性试验结果结果说明，供试品溶液在8小时内根本稳定。3.10精细度试验考察3.10.1重复性试验考察取含量测定项下的供试品溶液，精细量取20l，连续测定6次，结果见下表。峰面积平均值为2075.81，RSD为0.28%，本法重复性良好。表重复性试验结果测定结果说明，本试验精细度良好，符合有关规定。3.10.2重现性试验考察取胶

19、囊内容物适量，按供试品制备方法，分别制备6份供试品溶液，分别测定含量，峰面积平均值为2115.34，RSD为0.69%，说明本法重现性良好，结果见下表。表重现性试验结果测定结果说明，本试验精细度试验良好，符合有关规定。3.11回收率试验考察取芍药苷对照品适量，精细称定，加50%甲醇制成每1l含100g的溶液，作为对照品溶液。取装量差异项下的本品内容物，研细，过三号筛，取细粉1.5g，精细称定，精细参加甲醇25l，称定重量，加热回流提取1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精细量取续滤液10l，蒸干，残渣用50%甲醇约10l，分次转移至已处理好的中性氧化铝柱中性氧化铝5g，内

20、径约1，50%甲醇20l预洗上，再用50%甲醇35l洗脱，搜集洗脱液置50l量瓶中，加50%甲醇定容至刻度，摇匀，精细量取10l浓缩至干，残渣用50%甲醇1l溶解，即得，作为供试品溶液。分别精细汲取对照品溶液与供试品溶液各20l，注入液相色谱仪，测定，测得供试品中芍药苷的含量为558g/g。取芍药苷对照品10g，置10l量瓶中，加50%甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，从中精细量取1l，置10l量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1l含100g的溶液，作为加样用对照品溶液。取上述已经测定含量的供试品药粉，分别精细称定约0.6g、0.8g、1.0g各三份，分别精细参加加样用对照品溶液4l，精

21、细参加甲醇至25l，称定重量，加热回流提取1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精细量取续滤液10l，蒸干，残渣用50%甲醇约10l，分次转移至已处理好中性氧化铝柱中性氧化铝5g，内径约1，50%甲醇20l预洗上，再用50%甲醇35l洗脱，搜集洗脱液置50l量瓶中，加50%甲醇定容至刻度，摇匀，各精细量取10l浓缩至干，残渣用50%甲醇1l使溶解，即得，作为加样溶液。精细量取上述各溶液20l，注入液相色谱仪，记录色谱图，测定含量，计算加样回收率，测得9次平均回收率为100.25%，RSD为1.7%，结果见下表。测得量=A供/A对对1l10l50l10l25l=g；样品中芍药苷含量=供试品取样量558g/g=g，结果见下表。测定结果，平均回收率为100.25%，RSD为1.7%。据上述方法学考察结果，确定含量测定方法为：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸55450.5为流动相，检测波长为236n；柱温：室温，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精细称定，加50%甲醇制成每1l含100g的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备：取装量差异项下的