腰痛宁胶囊的毒理学研究

1、腰痛宁胶囊的毒理学研究【关键词】腰痛宁胶囊摘要:目的:观察大鼠口服腰痛宁胶囊的急性毒性和长期毒性作用。方法:以SD大鼠为受试对象，采Bliss法测定口服腰痛宁胶囊的LD50;采用4个剂量300，150，75，35.5g/kgiqSD大鼠，连续180d，观察给药90，180d时大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理变化及停药30d时上述指标的变化。结果:雄性和雌性SD大鼠口服腰痛宁胶囊的LD50为6158.95g/kg和803.85g/kg。大鼠连续给药90d时，300g/kg剂量组碱性磷酸酶、肌酐比空白对照组升高P0.01:白蛋白降低P0.01;5只大鼠肝细胞脂肪变性;2只大鼠肾脏近曲小

2、管上皮细胞高度水肿，轻度脂肪变性，管腔变大，肾小管内可见红细胞管型，肾间质少量炎细胞浸润。150g/kg剂量组碱性磷酸酶升高P0.05，总蛋白和白蛋白降低P0.01，3只大鼠肝细胞脂肪变性。给药180d时，对大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、主要脏器的重量系数检查未见明显影响。300g/kg剂量组白蛋白降低P0.01，总蛋白、肌酐升高P0.0l和P0.001;150g/kg剂量组白蛋白降低P0.001，总蛋白、肌酐升高P0.05和0.001;75g/kg剂量组白蛋白降低，P0.001，肌酐升高P0.001，2只大鼠肝细胞轻度脂肪变性;37.5g/kg剂量组白蛋白降低P0.001，总蛋白和肌酐升

3、高P0.0l和0.001。停药30d后，大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、重要器官脏器系数均正常。生化指标检查，各给药组同空白对照组比拟肌酐升高P0.001。病理学检查各组各脏器均未发现明显改变。结论:不同性别的SD大鼠对腰痛宁胶囊的急性毒性反响有非常著性差异，雄性大鼠LD50比雌性高7.66倍。长期毒性研究说明，长期大剂量服用腰痛宁胶囊，对肾功能有一定影响并且恢复较慢，建议肾功能不好的患者慎用。通过对腰痛宁胶囊180d用药过程中各项指标反响的观察，未见性别差异。综合分析认为，腰痛宁胶囊在规定剂量下服用是平安可靠的。关键词:腰痛宁胶囊;急性毒性;马钱子;士的宁;大鼠;长期毒性TxilgiStu

4、dynYatngningapsuleAbstrat:bjetive:Tbservetheautetxiityandthelng-peridtxiityfYatngningapsuleYTNinrats.ethds:LD50eretestedfYTNinratsbyBlissethds.Furgrupsfrats300.0，150.0，75.0，37.5g/kgfYTNereadinisteredithrepeatedgastriinfusinfYTNfr180days.BdyEight，heatlgialandheatbiheialparaeters，effiientandhistrphlgi

5、alfigurefrganstheheart，1iver，Spleen，1ungs，kidneys，adrenals，testes，prstate，uterusandvary，brain，thyusereexinedin90days，180daysand30daysaftertheessatinfYTN.Results:TheLD50ffealeandaleere803.85163.94g/kgand6158.951021.70g/kginSDratsrespetively.Inthelng-peridtxiitytest，afteradinisteredrepeatedlyfr90days，

6、theALPandreaereinreased，ALBeredereased，thefatinliverellseredegeneratedinfiverats，theepitheliuellsedeafprxialnvlutedtubuleint，fatlydegenerated，luensbradendandferedellsinrenaltubuleerebservedin300g/kgdsegrup.Inthe150g/kgdsegrup，ALPereinreased，TPandALBeredereased，fatinliverellseredegeneratedinthreerats

7、.Afteradinisterdrepeatedlyfr180days，inthe300g/kgand150g/kgdsegrups，theTPandgreaereinreased，theALBeredereased.Inthe75g/kgdsegrupALBeredereased，thereaereinreased，thefatinliverellseredegeneratedlightlyintrats.Inthe37.5g/kgdsegrups，theALBeredereased，theTPangreaereinreased.In30daysafterstppingthedrug，the

8、hangesfheatbiheial，pathlgialandeffiientfrgansuldpletelyrever，nlythereaereinreasedinallftherats.nlusin:TheLD50fyinginaleeresignifiantlydifferentfrfealeinSDrats.LD50inaleratsas7.66tiesasuhasinfealerats.YTNadinistratinbylng-peridandlargedseslightlyinjurytherenalfuntininrats，buttheinjuryassllyreversible

9、.Itisprpsedthatthepatientssufferfrrenalfuntinharfultrendsuldadinistratearefully.ItissafetadinistratethepresribeddsefYTN.Keyrds:Yatngningapsule;Autetxiity;Lng-peridtxiity;Rat;Stryhnsnux-viaL.;Stryhnine腰痛宁胶囊为常用中成药，是国家中药保护品种。具有消肿止痛、疏散寒邪、通经活络的作用，在治疗腰椎间盘突出、腰椎增生、坐骨神经痛、腰肌纤维炎、慢性风湿性关节炎等疾病时具有独特的疗效1。因处方中含有马钱子等

10、毒性中药，为给临床用药提供平安的实验根据，本文对腰痛宁胶囊进展了毒理学研究。1材料和方法1.1实验材料1.1.1动物SD大鼠120150g，180220g由河北省实验动物中心提供，合格证号:第04036。1.1.2药物腰痛宁胶囊，由承德中药集团提供，批号:20000920。实验前用蒸馏水配成不同浓度的混悬液灌胃使用。1.2实验方法1.2.1大鼠LD50的测定选用SD大鼠，经过预实验发现雌、雄大鼠口服腰痛宁胶囊的急性毒性反响差异很大，因此将雌、雄大鼠分别分组实验。将雌性SD大鼠分1150.00，977.50，830.90，706.20，600.30，510.03及433.707个组，组间剂量比为

11、10.85;将雄性SD大鼠分成8290.00，6800.00，5580.00和4570.00g/kg4组，组间剂量比为10.82，每组10只，体重180220g;禁食不禁水12h，根据预先设计的剂量，按体重灌胃给药1次，给药体积为20l/kg，给药后观察即刻及每日动物存活情况及一般表现，连续2周。记录动物死亡数，死亡动物立即尸检，如发现有肉眼可见的病理改变时，做病理检查。用DAS软件，按Bliss法计算LD50。1.2.2SD大鼠的长期毒性实验将大鼠按性别和体重随机分成5组，空白对照组和A、B、D腰痛宁胶囊组，A组300g/kg和B组150g/kg每组40只大鼠，组75g/kg和D组37.5g

12、/kg每组30只大鼠，雌雄各半，给药体积为ll/100g体重，各组均灌胃给药，每周灌胃6d，对照组灌胃等体积蒸馏水，连续给药180d，给药前及给药期间每周称动物体重1次，并按平均体重调整给药剂量。实验期间每天观察大鼠一般状态、体征、摄食量、饮水及粪便状况。每周称体重、摄食量1次，理解对动物体重和进食的影响。给药90d，于末次给药后24h，空白对照组、A组和B组各抽取大鼠10只雌、雄各5只、给药180d，于末次给药后24h空白对照组和各给药组各抽取14只大鼠雌、雄各7只、停药后30d各组抽取6只大鼠雌、雄各3只，用乌拉坦麻醉，从腹主动脉取血，检查血液学和血液生化学指标。血液学检查工程为:血色素H

13、b、血小板PLT、红细胞计数RB、网织红细胞计数、白细胞计数B、白细胞分类D、凝血时间。血液生化学检查工程为:天门冬氨酸氨基转换酶AST、丙氨酸氨基转换酶ALT、碱性磷酸酶ALP、尿素氮BUN、总蛋白TP、白蛋白ALB、血糖GLU、总胆红素T-BIL、肌酐rea、总胆固醇T-H。取血后，将各组动物处死，立即剖取动物脑、心、肝、脾、肺、肾、胸腺、甲状腺、肾上腺、子宫卵巢、睾丸、前列腺称重，根据体重计算器官重量系数。并取心、肝、肾、脾、肺、脑、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、前列腺等脏器进展肉眼观察后用10%的甲醛溶液浸泡固定，作组织切片，H-E染色，光镜下检查组织病理学变化。转贴于

14、论文联盟.ll.2实验结果2.1大鼠的急性毒性SD大鼠口服腰痛宁胶囊后几分钟内出现激惹现象，随后呼吸急促，流涎，全身抽搐，四肢强直，惊厥，雌性大鼠在灌胃后5145in之间死亡，平均死亡时间为38.2843.47in，LD50为803.85g/kg，95%置信限为726.05889.99g/kg。雄性大鼠在灌胃后5135in内死亡，平均死亡时间为52.4537.36in，LD50为6158.95g/kg，95%置信限为5669.256690.94g/kg。死亡大鼠立即尸检，未发现肉眼可见明显病理改变，结果见表1。表1雌性SD大鼠经口急性毒性实验略2.2SD大鼠的长期毒性实验2.2.1腰痛宁胶囊对

15、大鼠一般情况的影响在腰痛宁胶囊连续给药期间，给药开场3周内，各给药组大鼠出现激惹反响，神经高度紧张，只要有小的刺激，即可产生直立反响。3周后此现象消失。各给药组与对照组比拟动物的活动、体重、摄食量、大便和毛发光泽等相似，未发现异常情况。A组给药第一周死亡3只大鼠，给药全程共死亡8只大鼠死亡率20%，B组给药第1，2周大鼠各死亡1只，全程共死亡6只死亡率15%，组死亡1只死亡率3.3%，D组死亡2只死亡率6.6%，空白对照组死亡0只，肉眼尸检未见脏器异常。表2雄性SD大鼠经口急性毒性实验略2.2.2腰痛宁胶囊对大鼠体重增长的影响实验结果见表36。表3腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响略表4腰痛宁胶囊对大

16、鼠体重的影响略表5腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响略表6腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响略从表2表5可见，腰痛宁胶囊4个剂量对大鼠连续给药不同时间的体重，与空白对照组比拟，其差异无统计学意义P值均0.05。说明，腰痛宁胶囊连续用药180d，对大鼠的生长发育体重增长无毒性影响。2.2.3腰痛宁胶囊连续给药对大鼠血象的影响实验结果见表7，表8。表7腰痛宁胶囊连续给药3个月对大鼠血象的影响略表8腰痛宁胶囊连续给药6个月对大鼠血象的影响略由表78可见，腰痛宁胶囊各给药剂量组对大鼠连续给药90d时，A组中性粒细胞升高，同空白对照组比拟P0.01，B组中性粒细胞升高，淋巴细胞降低，P值均0.01，其余指标均无异常;给

17、药180d时，A组、组、和D组的白细胞计数降低P0.01、0.001、和0.05，但都在正常范围内，其它检测均正常。恢复期各组大鼠外周血象各项检查无异常，同空白对照组比拟无明显差异。说明连续服用腰痛宁胶囊180d，对各给药组大鼠血象根本无明显影响。2.2.4腰痛宁胶囊连续给药3个月对大鼠血液生化指标的影响实验结果见表912。表9腰痛宁胶囊恢复期对大鼠血象的影响略表10腰痛宁胶囊连续给药3个月对大鼠血液生化指标的影响略表11腰痛宁胶囊连续给药6个月对大鼠血液生化指标的影响略表12腰痛宁胶囊恢复期大鼠血液生化指标的情况略从表79可知，腰痛宁胶囊连续给药90d时，A组和B组大鼠的各项生化指标数值同空

18、白对照组相应指标的数值比拟，碱性磷酸酶升高P0.01和P0.05，白蛋白降低P0.01，A组肌酐升高P0.01;其余各项检查数值无明显变化或在正常范围内。连续给药180d时，各给药组白蛋白降低P0.01和P0.001，肌酐升高P0.001;停药恢复30d后，各给药组肌酐测定值仍高于空白对照组P0.001。其它检测指标数值均恢复正常。说明长期服用腰痛宁胶囊对肾脏功能有一定影响。2.2.5腰痛宁胶囊连续给药3个月对大鼠主要脏器系数的影响实验结果见表1315。表13腰痛宁胶囊连续服药3个月对大鼠主要脏器系数的影响略表14腰痛宁胶囊连续服药6个月对大鼠主要脏器系数的影响略表15腰痛宁胶囊恢复期大鼠主要

19、脏器系数的情况略从表1315可见，腰痛宁胶囊连续服用3个月时，A组和B组大鼠各主要脏器重量系数与空白对照组比拟，肾、肾上腺重量系数降低P0.01和P0.001。连续给药6个月和恢复期时各个剂量组脏器重量系数与空白对照组比拟均无明显差异。说明腰痛宁胶囊连续服用180d中，前90d，A组和B组大鼠的肾脏和肾上腺重量系数有一定影响，进一步的连续服用观察180d时和恢复期，对各给药剂量组各脏器系数无明显影响。2.2.6腰痛宁胶囊对大鼠重要器官组织的肉眼观察腰痛宁胶囊连续给药90d、180d和停药后30d恢复期杀取大鼠解剖取材，肉眼观察心、肝、肾、脾、肺、肾上腺、甲状腺、胃、胸腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫

20、、脑、前列腺等各脏器情况，各给药剂量组和空白对照组动物各脏器都未见明显病变。2.2.7腰痛宁胶囊对大鼠重要器官组织病理形态的影响腰痛宁胶囊连续给药90d、180d和恢复期各杀取大鼠10，14和6只，雌雄各半，将各给药剂量组和空白对照组大鼠的心、肝、肾、脾、肺、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、脑、前列腺在一样部位取材，用10%甲醛溶液固定。切片，HE染色，进展病理学检查。检查结论如下:给药90d时，A组5只大鼠肝细胞脂肪变性;2只大鼠肾脏近曲小管上皮细胞高度水肿，轻度脂肪变性，管腔变大，肾小管内可见红细胞管型，肾间质少量炎细胞浸润。B组3只大鼠肝细胞脂肪变性，1只大鼠肾浊肿，其余各

21、脏器未见明显异常改变。给药180d时，A组、B组和D组各脏器均正常，未见明显病理改变;组2只大鼠肝细胞轻度脂肪变性，其余脏器未见明显病理改变，恢复期时大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、重要器官脏器系数均正常，生化指标检查，各给药组同空白对照组比拟肌酐升高，P值均0.001。病理学检查，空白对照组和各给药剂量组大鼠各脏器未发现病理改变。3讨论3.1本实验选用SD大鼠对腰痛宁胶囊进展了急性毒性实验，测定了口服该药的LD50值。实验发现，大鼠急性毒性表现非常明显的性别差异，雄性大鼠口服腰痛宁胶囊的LD50比雌性高7.66倍。大鼠在代谢和毒性反响上与人类较为接近3，临床使用中应注意该药急性毒性的性别差异。腰痛宁胶囊是由马钱子、土鳖虫、全蝎、川牛膝等十几味中药组成的复方制剂。其中马钱子中的有效成